天津市环湖医院 天津市神经外科研究所《中国现代神经疾病杂志》杂志社沉痛悼念刘宗惠教授

我国神经外科学家、立体定向和功能神经外科奠基人刘宗惠教授因病医治无效,于2022年11月25日12时15分在北京逝世,享年90岁。刘宗惠教授是中国共产党员,曾任解放军总医院第六医学中心(原海军总医院)神经外科主任、澳海伽马刀研究治疗中心主任。刘教授在颅脑创伤和颅内肿瘤的治疗、高血压脑出血的定向清除、颅内肿瘤的立体定向放射治疗、功能神经外科疾病中微电极及内窥镜的应用等临床工作中兢兢业业、造诣颇高,是我国立体定向和功能神经外科治疗领域的奠基人,也促进了伽马刀在颅内疾病的临床应用。

应重视心脑血管疾病的外科干预

心脑血管疾病是全球居民死亡的主要原因之一,动脉粥样硬化是其主要病理学改变,常同时累及心血管和脑血管,需神经外科和心血管外科同时手术干预。缺血性心脑血管疾病患者是采取颈动脉内膜切除术联合冠状动脉旁路移植术同期手术还是分期手术(颈动脉内膜切除术后冠状动脉旁路移植术和冠状动脉旁路移植术后颈动脉内膜切除术)尚未形成一致性意见。随着对心脑血管疾病研究的深入、手术技术的改进和血管内介入技术的发展,为外科手术同时干预提供了理论基础和技术支持。

脑蛋白水解液对大鼠神经胶质细胞间缝隙连接通讯的研究

目的探讨脑蛋白水解液对大鼠神经胶质细胞间缝隙连接通讯功能的影响。方法由大鼠神经干细胞诱导培养神经胶质细胞至致密单层,分为脑蛋白水解液组、对照组及佛波酯阴性对照组继续培养,利用划痕标记染料示踪技术,以荧光黄染料在细胞间的扩散距离作为评价缝隙连接通讯的指标,测定脑蛋白水解液对大鼠胶质细胞间缝隙连接通讯的影响;采用逆转录-聚合酶链反应法检测脑蛋白水解液组和对照组细胞Cx43 mRNA表达的变化。结果脑蛋白水解液组荧光黄染料5 min扩散距离为(189．80±6．56)μm,对照组扩散距离为(154．70±6．02)μm,组间差异有统计学意义(P<0．01);逆转录-聚合酶链反应检测显示脑蛋白水解液组细胞中Cx43 mRNA相对表达量为0．89±0．13,高于对照组细胞的0．67±0．10,两组比较差异有统计学意义(P<0．01)。结论脑蛋白水解液可通过上调胶质细胞Cx43基因的表达水平,增强大鼠胶质细胞间缝隙连接通讯,这可能是其在机体损伤修复过程中对胶质细胞起保护作用的重要机制。

PLGA与明胶膜支架材料对神经干细胞生长、分化影响的体外研究

目的:探讨PLGA作为中枢神经组织工程支架材料的可行性。方法:从胎龄14￣16d的Wistar大鼠分离培养获得神经干细胞,以108/L密度种植于PLGA膜、明胶膜和PLGA/明胶膜表面,置37℃、5%CO2培养箱中共培养,观察神经干细胞在PLGA膜、明胶膜和PLGA/明胶膜表面的生长、分化和PLGA的降解情况。结果:培养获得的神经干细胞表现具有自我更新和多相分化能力,能分化为神经元和胶质细胞。在观察期内PLGA膜无降解,神经干细胞在PLGA膜表面无贴附,但可在PLGA/明胶膜和明胶膜表面贴附、生长和分化。结论:PLGA可作为中枢神经组织工程支架材料。

rhEGF和rhbFGF诱导胎鼠脑组织神经干细胞向神经元样细胞分化的研究

目的观察在重组人表皮生长因子和重组人碱性纤维母细胞生长因子诱导下胎鼠脑组织神经干细胞向神经元样细胞分化的超微结构及细胞标志物表型特征。方法采用孕16d大鼠胚胎脑组织进行神经干细胞体外分离、培养传代及鉴定,分别于倒置相差显微镜及电子显微镜下观察经体外诱导培养后神经干细胞的组织形态及超微结构变化;免疫细胞化学染色检测神经微丝、微管相关蛋白-2、去甲肾上腺素、乙酰胆碱、γ-氨基丁酸以及多巴胺等蛋白质标志物的表达。结果倒置相差显微镜观察显示,经体外培养的神经干细胞随着培养时间的延长逐渐形成神经干细胞球体,经体外诱导培养至第7天时即开始出现明显分化趋向,第14天时部分细胞分化发育完全;且蛋白质标志物神经微丝、微管相关蛋白-2、去甲肾上腺素、乙酰胆碱、γ-氨基丁酸及多巴胺均表达阳性。电子显微镜观察经体外诱导培养至第14天时,细胞出现明显的成熟分化趋向,细胞质中含有大量神经微丝和神经内分泌颗粒,呈典型的神经元分化特征。结论神经干细胞在体外诱导培养条件下短期即可向神经元方向成熟分化。

冷诱导RNA结合蛋白在亚低温下的神经保护作用研究

目的研究亚低温下冷诱导RNA结合蛋白(CIRP)对受损海马神经元的保护作用机制。方法将原代培养的海马神经元分为3组:对照组、损伤组和治疗组。氧糖剥夺55min制作海马神经元损伤模型,损伤组和治疗组在氧糖剥夺55min后分别置于37℃和32℃培养24h。收集各组细胞,MTT检测各组细胞的存活率,荧光定量PCR和Western blot检测CIRP的mRNA和蛋白的表达水平,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blot检测Caspase-3蛋白表达水平。结果与对照组比较,损伤组细胞生存率明显下降[(43.3±8.1)%vs(100.0±12.7)%,P<0.05],治疗组细胞生存率明显升高[(71.8±13.6)%vs(43.3±8.1)%,P<0.05],与损伤组比较,治疗组细胞凋亡率下降[(19.5±0.6)%vs(30.7±2.5)%],CIRP的mRNA蛋白表达明显升高,Caspase-3蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论亚低温下CIRP表达水平升高,通过抑制细胞凋亡发挥神经元保护作用,是亚低温脑保护作用途径之一。

心脑血管疾病的“脑心同治”

动脉粥样硬化是脑血管病和心血管病共同的病理生理学机制,二者为同源性疾病,可共病,这也是“脑心同治”的病理生理学基础。近年随着药物治疗和手术技术改进,“脑心同治”得以实现并提高临床疗效。本文综述“脑心同治”策略,以为心脑血管疾病的治疗提供理论基础和临床指导。

颅内-颅内血管搭桥术在基底动脉复杂动脉瘤中的应用

目的 探讨颅内-颅内血管搭桥术治疗基底动脉复杂动脉瘤的术式和适应证。方法与结果 回顾2017年4月至2023年4月在天津市环湖医院行颅内-颅内血管搭桥术的6例基底动脉复杂动脉瘤患者的临床资料,3例为椎基底动脉延长扩张型动脉瘤,1例为基底动脉上段动脉瘤合并近端基底动脉重度狭窄,2例为基底动脉巨大型夹层动脉瘤;5例为破裂动脉瘤,Hunt-Hess分级Ⅴ级1例、Ⅳ级1例、Ⅲ级2例、Ⅱ级1例;1例为未破裂动脉瘤。6例患者均采用颅内-颅内血管搭桥术,主要包括颈内动脉岩骨段-桡动脉-大脑后动脉搭桥术联合动脉瘤夹闭术(1例)、椎动脉V3段-桡动脉-大脑后动脉搭桥术联合动脉瘤孤立术(4例)、大脑中动脉M2段-桡动脉-大脑后动脉P2段搭桥术联合动脉瘤孤立术(1例),均顺利完成手术。术后即刻复查影像学提示桥血管通畅,动脉瘤不显影,基底动脉上段显影良好。4例预后较好,改良Rankin量表(mRS)评分为0~3分;1例术前即为重症蛛网膜下腔出血(Hunt-Hess分级Ⅳ级),虽手术顺利,动脉瘤得以控制,但预后欠佳(mRS评分4分);1例基底动脉干巨大型动脉瘤患者,术前存在蛛网膜下腔出血(Hunt-Hess分级Ⅴ级),虽手术顺利重建后循环并处理动脉瘤,仍于术后1周死亡。结论 对于无法使用常规手段治疗的基底动脉复杂动脉瘤,颅内-颅内血管搭桥术能够为其提供较好的选择,临床根据实际情况选择合适术式。

泛血管医学时代“脑心同治”手术与展望

“脑心共病”逐渐受到国内外神经外科和心血管内外科医师的重视,并着手开展“脑心同治”手术互为保障,“泛血管医学”概念提出多学科交叉、跨学科整合的研究模式和发展理念。泛血管医学思想对“脑心同治”手术具有重要指导意义,“脑心同治”手术又使“泛血管医学”概念更加完整与深化。现阶段坚持以动脉粥样硬化性疾病为基础进行手术实施设计,“脑心同治”手术将在未来突破传统的颈动脉与冠状动脉同期手术范畴,过渡到以血管重建为中心的发展方向,从外科手术角度扩大“泛血管医学”概念的内涵。

肺保护性通气策略对长时间神经外科手术患者术后肺部并发症的影响:回顾性研究

目的评价肺保护性通气策略对长时间神经外科手术患者术后肺部并发症的影响。方法基于麻醉时间>8 h,回顾性收集2019年1月1日至2021年12月31日本院在全麻下行择期首次开颅手术患者的病历资料。根据术中是否应用肺保护性通气分为肺保护性通气组(L组)和常规机械通气组(C组),记录2组患者基本情况、术中情况、术后肺部并发症以及住院情况等。结果与C组比较,L组患者V_(T)降低,PEEP和RR升高,术中低氧血症发生率降低,术后肺部并发症严重程度分级中1级患者例数增加,住院时间缩短(P<0.05);2组患者基本情况、术后7 d肺部并发症发生率等其他指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论肺保护性通气策略可减轻长时间神经外科手术患者术后肺部并发症的严重程度。

脑活素对液压冲击伤后原代神经细胞内游离钙的影响

目的探讨脑活素对液压冲击伤后神经细胞内游离钙的作用。方法原代培养的神经细胞分(1)正常组,(2)创伤组:液压冲击致神经细胞创伤后24h和48h组,(3)脑活素治疗组:分别于神经细胞创伤后0、1h给予1.25ml.L-1脑活素治疗(0h给药和1h给药组)。用激光扫描共聚焦显微镜和Ca2+荧光探针Fluo-3/AM观察细胞创伤后24h和48h细胞内游离钙[Ca2+]i的变化。结果神经元细胞创伤后,伤后24h神经元胞质内钙离子浓度达高峰,48h仍维持在较高水平;脑活素0或1h治疗后,在24h均能明显减轻创伤神经元细胞内的钙超载,48h后只有1h给予脑活素的细胞钙离子强度降低。结论脑活素对创伤的神经细胞有保护作用,且具有治疗时间窗。

蛛网膜下腔出血并迟发性脑血管痉挛大鼠脑能量代谢与脑血流量变化的实验研究

目的探讨实验性蛛网膜下腔出血导致的迟发性脑血管痉挛时脑能量代谢的变化规律,及其与皮质脑血流量(CBF)变化的相关性。方法50只雄性SD大鼠随机分为对照组和蛛网膜下腔出血第1、3、5、7天组,应用非抗凝自体动脉血枕大池两次注血法制备蛛网膜下腔出血大鼠模型;另5只大鼠用于颅内血液大体分布的观察。应用微透析仪监测各组大鼠脑组织间液中葡萄糖(Glu)、乳酸(Lac)及丙酮酸(Pyr)含量,并计算乳酸/丙酮酸比值;激光多普勒血流仪监测各组大鼠皮质脑血流量;于光学显微镜及透射电子显微镜下观察基底动脉血管壁的病理学改变。结果(1)5只用于观察颅内血液大体分布的大鼠中4只蛛网膜下腔出血模型鼠血液主要分布于基底池、脚间池及额叶底面,亚甲蓝与血液混合物主要沉积于颅底,同时在脑室及纵裂池亦可见血液分布;余1只注入人工脑脊液后未发生颅内出血及血液沉积。表明蛛网膜下腔出血动物模型制备成功。(2)与对照组相比,蛛网膜下腔出血组大鼠葡萄糖及丙酮酸含量明显降低(P<0.01);乳酸/丙酮酸比值明显升高(P<0.01),以第5、7天组升高最为明显(P<0.01);第5天组乳酸含量亦明显升高(P<0.01)。(3)激光多普勒监测显示,蛛网膜下腔出血组大鼠脑血流量减少率高于对照组(P<0.05),其中第5天组减少最为显著,与其他各亚组比较差异有统计学意义(P<0.05);脑血流量变化与乳酸/丙酮酸比值、乳酸水平的改变呈正相关(r=0.721,0.477;均P<0.01),与葡萄糖、丙酮酸水平的改变呈负相关(r=0.447,0.579;均P<0.01)。结论微透析指标与脑血流量变化具有一致性,可作为蛛网膜下腔出血脑组织间液生化指标的动态监测,用于预测迟发性脑血管痉挛的发生。

人外周血内皮祖细胞分离和诱导分化的实验研究

目的探讨人外周血内皮祖细胞和单个核细胞分离培养、诱导向内皮祖细胞分化的方法与鉴定。方法采取人外周血抗凝,用淋巴细胞分离液密度梯度离心法分离外周血中的内皮祖细胞和单个核细胞,于体外以细胞因子诱导单个核细胞向内皮祖细胞分化,用免疫荧光法和流式细胞仪分离鉴定单个核细胞向内皮祖细胞分化的细胞特异性标志。结果外周血内皮祖细胞和单个核细胞共同培养3d大部分贴壁密集生长,培养6d梭形细胞增多,培养12d收获细胞进行鉴定。Dil标记乙酰化低密度脂蛋白摄取率为(70.00±11.21)%,AC133,CD31,CD34,血管内皮生长因子受体鄄2和血管性假血友病因子免疫荧光染色阳性。流式细胞仪分类计数,AC133、CD31、CD34和血管内皮生长因子受体鄄2阳性细胞分别为95.80%、87.60%、1.27%和96.40%。结论外周血循环中的内皮祖细胞和单个核细胞共同培养,诱导后者分化的内皮祖细胞具有祖细胞特性且诱导分化率高。

颅脑损伤患者血浆神经元特异性烯醇化酶检测及临床意义

研究急性颅脑损伤患者血浆中神经元特异性烯醇化酶（ＮＳＥ）的变化规律。方法：以双抗体酶免法对５６例各型颅脑损伤患者伤后１周内血浆ＮＳＥ水平的变化进行观测，结合颅脑损伤程度及病情转归进行分析。结果：颅脑损伤患者伤后血浆ＮＳＥ浓度立即升高，其程度与脑损伤程度成正比。不同病情转归，患者伤后１周内血浆ＮＳＥ浓度的变化趋势不同。结论：通过对血浆ＮＳＥ浓度变化的动态观察，为颅脑损伤程度的判断及预后的评估提供较为实用的指标，还可用其指导选择治疗措施并及时调整。

牛磺酸对液压冲击伤后神经细胞内钙超载的保护作用

目的探讨牛磺酸对液压冲击伤模型神经细胞伤后不同时间细胞内游离钙超载的保护作用。方法采用激光扫描共聚焦显微镜观察液压冲击伤模型伤后24 h和48 h神经细胞形态变化,并检测细胞内游离钙表达水平变化。结果损伤后,神经细胞肿胀,体积增大,突起回缩,细胞内游离钙表达水平升高,于伤后24 h达峰值水平,至伤后48 h仍维持在较高水平且高于对照组(均P<0.01)。经牛磺酸治疗后,神经细胞肿胀明显改善,接近正常细胞大小,突起回缩程度减轻,细胞内游离钙表达水平逐渐降低(均P<0.01),且各时间点均低于创伤组(P<0.01),以伤后1 h牛磺酸治疗48 h组效果最佳,细胞内游离钙表达水平接近正常值水平(P>0.05)。结论牛磺酸对液压冲击伤模型神经细胞内钙超载具有较好的保护作用,尤以伤后1 h予以牛磺酸并维持治疗48 h对神经细胞保护作用最佳。

颅脑创伤基础与临床研究十年回顾

针对颅脑创伤（TBI）救治的基础与临床研究，始终是近年来学术界关注的重点。虽然，在21世纪的最初10年该领域未能出现里程碑式的突破性进展，但在与其相关的诸多领域内，医学工作者仍然取得了可喜的进步。本文将对此进行简要回顾、总结、展望。

叶酸对胎鼠神经干细胞体外增殖的影响

目的探讨叶酸对体外培养的胚胎大鼠神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖的影响。方法本研究采用显微解剖、机械吹打、无血清悬浮培养方法分离培养鼠胚大脑NSCs,用巢蛋白(nestin)免疫荧光染色对其进行鉴定,5'-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)掺入法检测细胞增殖状态;设立正常对照组,叶酸低、高剂量(培养液中添加叶酸4.0 40 mg/L)和叶酸缺乏组(培养液中添加叶酸拮抗剂甲氨蝶呤0.4mg/L);通过nestin+BrdU免疫荧光双标记和绘制细胞生长曲线(MTT法)检测叶酸对细胞增殖状态的影响。结果无血清培养液中可形成大量呈nestin抗原阳性细胞组成的神经球,BrdU免疫标记证实培养的NSCs具有增殖能力。免疫荧光双标记和MTT结果显示,两个叶酸干预组NSCs增殖能力较对照组显著增强。结论体外培养的胚胎大鼠NSCs具有增殖和自我更新的能力;叶酸可以在一定程度上增强NSCs的增殖能力,促进神经干细胞的生长。

肺癌干细胞Wnt信号通路的研究进展

Wnt信号通路在维持肺癌干细胞的增殖和克隆形成方面发挥着重要作用,可通过影响其关键蛋白质抑制肺癌干细胞增殖,为肺癌的治疗提供新的路径。本文旨在通过总结2005年-2010年肺癌干细胞及Wnt通路的研究现状,探讨Wnt通路与肺癌干细胞的关系。

神经干细胞在PLGA、壳聚糖和明胶膜表面的生长规律

目的探索神经干细胞在PLGA、壳聚糖和明胶膜表面的生长规律,寻找适合中枢神经再生的支架材料。方法大鼠胚胎神经干细胞以105/mL密度分别种植于PLGA、壳聚糖和明胶膜表面,观察神经干细胞的生长、分化情况。结果接种后12h神经干细胞在壳聚糖膜表面呈团簇状贴附,在明胶膜表面24h贴附牢固;第2d起明胶膜表面贴附的神经干细胞周围见有突起的分化细胞;第3d壳聚糖膜表面贴附的神经干细胞周围也见有突起的分化细胞,壳聚糖膜部分溶解,明胶膜完全溶解,第5d分化细胞长满膜表面;观察期内PLGA膜表面无神经干细胞贴附,PLGA膜保持完整。结论神经干细胞不能在PLGA膜表面贴附和生长,在壳聚糖和明胶膜表面贴附和分化良好,壳聚糖比明胶更利于神经干细胞贴附,明胶比壳聚糖更利于神经干细胞分化。PLGA、壳聚糖和明胶都不宜单独作为生物支架材料和神经干细胞共同构建中枢神经工程化组织。