高效降解泔脚垃圾微生物制剂的研制

从堆肥土壤中筛选得到16株产蛋白酶、纤维素酶、淀粉酶、脂肪酶活力较高菌株。通过摇瓶筛选试验,确定了由14株菌组成的高效降解泔脚垃圾的微生物制刑,并在1．5 kg泔脚处理机上进行降解试验。结果表明,投入 100 g菌粉能在24 h内将1．5-2．0 kg泔脚垃圾基本降解,降解率达95％以上,连续运转1个月,其分解能力没有下降。

“生物工程设备”课程教学改革初探

文章针对目前“生物工程设备”课程教学中存在的学生工程意识薄弱、学习兴趣低、内容陈旧、教学手段单一以及教师队伍建设相对滞后等问题,提出了并开展了一系列的以提高学生学习兴趣和教学效果为核心的改革措施,取得了良好的教学效果。

适配子生物传感器对青霉素的快速检测

将玻碳电极进行阳极氧化和氨基化修饰,通过碳二亚胺盐酸盐（EDC）、N-羟基丁二酰亚胺（NHS）活化作用将青霉素适配子结合在电极表面。该适配子电化学生物传感器分子识别能力强、无放射性标记、检测速率快,青霉素类的最佳检测范围是2.81~281 nmol/L,最低检测限为2.81 nmol/L,检测时间为5 m in。

核酸适体生物传感器快速检测牛奶中抗生素

为了现场快速检测牛奶溶液中四环素类抗生素的含量,对电极进行阳极氧化、氨基化、活化等一系列处理,将四环素核酸适体作为识别分子,共价固定于玻碳电极表面,构建出新型核酸适体生物传感器。传感器可以特异性结合标本中四环素类抗生素,并产生电化学信号,强度与抗生素浓度相关。其最低检测量是1μg/L,检测时间为5 m in。

餐厨垃圾好氧生物处理菌株的选育

文章以枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌等10株细菌为出发菌株,以耐高温、生长速度快、生物安全性、生物拮抗性以及产酶能力为筛选原则,从中筛选得到4株细菌,分别为:地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis,TKFW1003)、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium,TKFW1005)、纳豆芽孢杆菌(Bacillus natto,TKFW1102)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis,TKFW1108)。然后将筛选得到的4株细菌按10%的比例添加到30 L固态发酵罐中,再添加10%的麸皮和50%的水为辅料,对餐厨垃圾进行固态发酵处理。最后将固态发酵结束后得到的产品取出烘干粉碎,经检测:经好氧微生物处理后得到的产品,其有效活菌数、有机质含量、水分含量及蛔虫卵死亡率等指标均达到了农业部农用有机肥标准,此法实现了餐厨垃圾的无害化、资源化、减量化处理,具有生产成本低、无二次污染、可操作性强等优点。

乳品中的核苷酸及其对婴儿的生物学功效

本文阐述了乳品中的核苷酸成分,分析比较了核苷酸在体内的吸收,并对核苷酸生物学功能和对婴儿的营养保健功能作了综述。与人乳相比,牛乳中的核苷酸成份主为乳清酸,其他核苷酸含量甚微。基于牛乳的婴儿配方奶粉也是如此。核酸及其组成物质时入消化道后,很快降解成核苷酸并被吸收,多数停留在肠道的上皮细胞中,并经呼吸和尿液排出体外。小部分则参与体内其它细胞的代谢及合成核酸大分子等。核苷酸除具有常见的生物功能外,乳品的核苷酸还具有特定的生理功能,尤其是对婴幼儿。婴儿配方粉中添加核苷酸,对提高婴儿的免疫功能,增加铁的吸收,影响脂蛋白的代谢,改善肠道有益菌群,完善肠道功能和肝功能及促进生长有一定的意义,并越来越为各国所重视。近年来中国也提倡婴儿配方粉中添加核苷酸。

多孔硅适配子生物传感器的电化学研究

构建1种用于快速检测四环素的新型电化学纳米多孔硅（PS）生物传感器。通过脉冲腐蚀法制得多孔硅基片,将适配子固定于其上,这种四环素适配子能够特异性识别四环素分子,并引起阻抗值的变化。利用电化学交流阻抗法比较固定适配子前后硅片表面阻抗值的变化,以及在体系中加入不同浓度四环素后阻抗谱的变化。选择1个合适的等效电路对测得的阻抗数据进行拟合,获得了四环素浓度与阻抗值的变化规律。传感器的线性检测范围为2.079~62.37 nmol/L,检测限为2.079 7 nmol/L。

核酸适配体生物传感器对心肌肌钙蛋白Ⅰ的检测研究(英文)

核酸适配体生物传感器是利用固定在电极表面的适配子与被测溶液中心肌肌钙蛋白Ⅰ（cTnⅠ）发生特异性结合,从而达到检测的目的.我们对玻碳电极进行阳极氧化、氨基化修饰,通过碳二亚胺盐酸盐（carbodiimide hydrochloride,EDC）、N-羟基琥珀酰亚胺（N-hydroxysuccinimide,NHS）活化作用将适配子结合在电极表面.cTnⅠ最佳检测范围是0.05-5 nmol/L,最低检测限为0.05 nmol/L,检测时间为5 min.

卧式生物反应器固定化少根根霉发酵生产脂肪酶

以聚氨酯为固定化载体,采用6 L卧式生物反应器进行少根根霉脂肪酶的发酵研究。考察了固定化面积、通气量、转速、装液量等参数对脂肪酶生产的影响,确定了最佳的发酵条件为:聚氨酯固定床为载体,通气量5 L/min、转速40 r/min、装液量3.5 L。在此条件下,研究了分批发酵代谢规律,获得了最高脂肪酶酶活95 U/mL,单位时间产率2021 U/(h·L)。重复批次发酵,重复3批次,获得平均酶活95 U/mL,最高酶活可达110 LU/mL,单位时间产率3476 U/(h·L),是批次反应的1.72倍。试验证明以聚氨酯固定床为载体的少根根霉菌体具有良好的重复使用率。

适配子纳米生物传感器在青霉素检测中的应用

通过脉冲腐蚀法对硅片进行多孔硅的制备，利用玻片通过对共价法、离子吸附法和APTES修饰的戊二醛交联法3种固定适配子方法的对比，以确定较好的固定青霉素适配子的方法。将适配子固定在多孔硅上后，利用交流阻抗法对加入青霉素前后传感器阻抗值进行测定、对比，构建等效电路并进行阻抗拟合。对多孔硅传感器的Nyquist谱图进行分析以确定多孔硅表面成功固定了青霉素适配子，从而证明构建纳米生物传感器成功。传感器的线性检测范围为0．05～0．2mg/L，检测限为0．05mg／L。

生物防霉剂防治葡萄贮运期病害研究初报

采用生长速率法测定了以纳他霉素为主要有效成分的生物防霉剂对葡萄白腐病菌、葡萄灰霉病菌、葡萄黑痘病菌的室内毒力,结果表明该制剂对各病害菌的抑制有效中浓度EC50分别为:29.67、35.79、32.08μg/ml,并用病原菌感染方法测定了制剂对贮运期葡萄的实物防治效果,纳他霉素浓度为200μg/ml的制剂各处理组不同时间的防效分别达80.18%、55.5%、65.17%,而1000μg/ml多菌灵对照防效仅19.82%、16.5%、21.72%,且均与多菌灵间存在显著性差异。

多孔硅Bragg反射镜适配子生物传感器检测心肌肌钙蛋白Ⅰ

通过脉冲腐蚀法制备多孔硅Bragg反射镜,将心肌肌钙蛋白I(cTnI)适配子共价固定到多孔硅Bragg反射镜的孔洞中,发现适配子能与cTnI分子特异性结合。定量分析不同浓度的cTnI与适配子结合后多孔硅Bragg反射镜的反射谱峰位的红移情况。结果表明:基于多孔硅Bragg反射镜适配子生物传感器的光学检测具有良好的特异性,且具有免标记及检测时间短等优异性能。传感器的线性检测范围0.05～4 nmol/L,最低检测限为0.05 nmol/L。

免标记光学纳米生物传感器的研究

利用发光稳定的多孔硅,当蛋白质溶液固定到多孔硅表面时,其发光强度和反射光谱的峰位会随着被测物质量浓度的变化而发生变化的特性。制备免标记光学纳米生物传感器来检测牛血清白蛋白(BSA),把不同质量浓度的BSA溶液固定到多孔硅上测量反射光谱的峰位和荧光强度的变化。实验结果表明:反射光谱的峰位与牛血清白蛋白的浓度呈线性关系:y=1.4189x+366.31,R2=0.9898;荧光强度的降低量与BSA溶液的浓度呈线性关系,检测限为8×10-9mol/L。

机械搅拌式生物反应器悬浮培养293T细胞生产慢病毒的工艺

采用L型大泡通气系统机械搅拌式生物反应器培养293T悬浮细胞和规模化生产慢病毒载体,通过4种方法驯化293T悬浮细胞,对其慢病毒包装能力进行验证,并建立种子扩增链,在5.5 L工作体积生物反应器中绘制悬浮细胞生长曲线和包装慢病毒。结果表明,采用体积分数50%的293 CD05 Medium无血清基础培养基和体积分数50%的SMM293-TⅡ培养基可以快速驯化293T细胞,成功得到野生型且具有慢病毒包装能力的悬浮细胞系。悬浮细胞在机械搅拌式生物反应器培养,2 d细胞密度可达1.5×106个·mL^(-1)。添加质粒复合物和补料培养基,培养4 d可以收获6.5×107 TU·mL^(-1)滴度的慢病毒粗产品,相比细胞工厂的滴度提高34倍。

代谢工程改造黑曲霉生产葡萄糖二酸

葡萄糖二酸是葡萄糖的一种二元羧酸衍生物,是重要的平台化合物,被应用于医药、化工等领域。本研究以黑曲霉为底盘细胞,通过表达来自恶臭假单胞菌Pseudomonas putida KT2440的糖醛酸脱氢酶基因ppudh,成功在黑曲霉中实现了葡萄糖二酸的合成,产量为18.74 mg/L;在此基础上通过共过表达黑曲霉自身来源的肌醇加氧酶(anmioxA)和肌醇-1-磷酸合酶(aninoA)、酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae S288C来源的羧酸转运蛋白(scJEN1),强化了合成通路和外泌途径,将产量提高至102.10 mg/L;通过表达来自乳酸乳球菌Lactococcus lactis subsp.cremoris MG1363的NADH氧化酶(llnox),建立NAD~+辅因子循环系统,使产量进一步提高至115.65 mg/L;利用RNA干扰技术对竞争支路中的关键酶磷酸果糖激酶(pfkA)和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(zwf)进行弱化表达,葡萄糖二酸最终的产量达到313.65 mg/L。本研究为微生物高效生产葡萄糖二酸和下游相关产品生产奠定基础。

酸类物质对浓香型白酒风味的影响研究

为了探索不同浓度的酸类物质对浓香型白酒风味的影响,采用气相色谱(GC)法和高效液相色谱(HPLC)法对浓香型白酒中挥发性风味成分及乳酸进行检测。结合气味活性值(OAV)、香气重组和缺失实验筛选出关键香气化合物,并通过感官分析和顶空固相微萃取气质联用(HS-SPME-GC-MS)技术分析不同浓度的酸类物质对模型溶液香气轮廓及香气物质的影响。结果表明,共检出39种挥发性风味物质,包括16种酯类、9种醇类、10种酸类、3种醛类和1种呋喃类。己酸、乙酸、丁酸、乳酸在浓香型白酒中的含量都在100 mg/L以上,对浓香型白酒风味有着重要作用。基于OAV和香气缺失实验,共筛选出16种关键香气化合物,其中己酸乙酯的OAV>20000,是浓香型白酒的主体香气成分。感官分析结果表明,添加酸类物质对模型溶液香气轮廓有一定影响,其中乳酸的影响尤为突出;低浓度己酸有利于果香、花香、甜香等属性的增加,高浓度丁酸和乙酸可以增强花香属性。

N^+离子注入阿维拉霉素产生菌诱变效应的研究

选用低能(30keV)N+离子注入阿维拉霉素产生菌SV-56,研究其诱变效应。试验结果表明:SV-56菌株存活率曲线是典型的“马鞍型”剂量-效应曲线,“马鞍型”区域内具有高的正突变率(20．9％-26．2％)。通过5×1015cm-2N+注入诱变处理、链霉素抗性筛选,最终获得一株稳定性良好、阿维拉霉素产量稳定在79．6-82．9 mg·L-1之间、较出发菌株提高41．4％-47．2％的突变株SVN-116。

纳他霉素在不同溶剂中溶解度的测定与关联

采用平衡法测定了纳他霉素在纯水(278.15～341.15K)和异丙醇(278.15～318.15K)、甲醇(278.15～313.15K)溶液中的溶解度。在三种溶剂中的溶解度均随温度升高而增大,以在甲醇中溶解效果最好,异丙醇次之,纯水最差。分别用经验模型、理想溶解度方程和Apelblat方程对实验数据进行关联,关联效果令人满意,平均相对误差小于5%,获得了相关模型参数。相对而言,经验模型和Apelblat方程关联的效果较好。实验得到的溶解度数据和关联结果对纳他霉素结晶工艺的研究具有较大的指导意义。

山楂叶总黄酮的水浸提和纯化工艺研究

研究山楂叶总黄酮的水浸提和大孔吸附树脂纯化耦合工艺。重点探讨采用水浸提法提取山楂叶总黄酮的最佳工艺条件。试验结果表明:山楂叶黄酮类化合物的最优水提工艺参数是料液比为1:20(g/mL),浸提时间为120min,提取次数2次。在此条件下进行回流提取,山楂叶总黄酮的提取率达到87.2%。采用水浸提法与D101型大孔吸附树脂耦合对山楂叶总黄酮进行吸附纯化,该树脂对总黄酮的动态吸附率大于80%,稳定性试验重复次数为5,以体积分数70%乙醇为洗脱剂时解吸率大于86%。山楂叶总黄酮经上述工艺分离纯化后,得率为1.9%,纯度为82.8%。

细菌L-乳酸发酵培养基的优化

利用热葡糖苷酶芽胞杆菌(Geobacillus thermoglucosidasius)TL-4厌氧发酵生产L-乳酸,为降低L-乳酸生产成本,以农产品及副产物为主要原料,通过单因子试验确定了TL-4产L-乳酸的碳源及氮源,并运用正交试验对摇瓶发酵不同氮源的组合进行了研究,确定了发酵培养基中影响产酸的主要因子及配比。优化发酵培养基为葡萄糖160g/L,小肽发酵液10g/L,玉米浆5g/L,摇瓶发酵L-乳酸产量可达152.5g/L。