乳酸菌食品级基因表达系统

乳酸菌是一类重要工业菌株,随着其遗传学和分子生物学研究取得长足进展,乳酸菌食品级表达系统作为高效表达系统日益受到重视。该表达系统和其他细菌表达系统相比有很多优点。介绍了糖诱导表达系统、噬菌体ф31爆发式诱导的表达系统、乳链球菌素调控表达系统、温控表达系统等的研究进展以及这些系统的应用前景。

几种食品添加剂对蔬菜杂粮方便面品质影响的研究

研究了几种食品添加剂对蔬菜杂粮方便面品质的影响,结果表明,随着羧甲基纤维素钠(CMC-Na)、瓜尔豆胶、黄原胶添加量的增加,方便面的断条率减少,吸水率增大。当CMC-Na添加量在0.5%以下时,方便面烹煮损失随其添加量的增大变化不明显。烹煮损失随瓜尔豆胶、黄原胶添加量的增大呈现先减小后增大的趋势,当其添加量为0.3%时,面条烹煮损失达到最小值。在减少方便面烹煮损失、断条率方面,单甘酯比蔗糖酯更加有效,马铃薯变性淀粉优于马铃薯原淀粉。

耐铅、铜微生物的筛选及吸附性能研究

采用浓度梯度筛选的方法,从重金属污染土壤中分离筛选到两株耐受和吸附铅、铜的细菌G、Y。用单因素的方法得到G最适的培养条件为:T=30℃;pH=6.0;NaCl浓度为0.5%;Y的最适培养条件分别为:T=37℃;pH=8.5;NaCl浓度为0.5%。用原子吸收分光光度法测得,G、Y的冻干菌体对Pb2+、Cu2+的吸附量分别为:G铅126.42mg/g,G铜75mg/g,Y铅61.08 mg/g,Y铜45.86 mg/g。G湿菌体对铅、铜的吸附率分别为:G铅94.66%,G铜92.84%;Y湿菌体对铅、铜的吸附率分别为:Y铅99.74%,Y铜97.96%。经检测,其遗传性状稳定。可进一步开发为重金属吸附剂。

大豆蛋白酶解技术比较

以大豆蛋白粉和碱性2709蛋白酶为原料,进行了超声波功率对大豆蛋白水解度的影响,以及有、无超声波作用下大豆蛋白酶解的正交优化实验。结果表明,超声波作用效果与超声波功率有关,与无超声波作用下的大豆蛋白酶解相比,40kHz、128W的超声波处理,可使大豆蛋白的水解度提高6.48%～30.86%,平均提高21.18%,有效地促进了大豆蛋白酶解。超声波作用没有改变大豆蛋白酶解的优化工艺参数,均为温度55℃、pH=10.5、ρ(底物)=5g/L、w(酶)=5%,但使各因素对水解度影响的大小顺序发生了改变。有超声波作用下各因素影响大豆蛋白水解度的大小顺序为:酶质量分数>pH>底物质量浓度>温度;无超声波作用下各因素对大豆蛋白水解度影响的大小顺序为:酶质量分数>温度>底物质量浓度>pH。

声酶法合成生物柴油的比较研究

以玉米油、乙醇和Lipozyme TL IM脂肪酶为主要原料,研究了声酶法合成生物柴油不同因素的影响,并与静态、摇床作用下酶法合成生物柴油进行了比较,结果表明,随着乙醇量、反应温度或溶剂石油醚加入量的增大,生物柴油的产率均先增大后降低,随着酶添加量增大、反应时间的延长,生物柴油产率相应增大。适宜的反应条件为:油醇摩尔比1:1、反应温度60℃、酶添加量10%、溶剂加入量(mL)与玉米油质量(g)比为1:1、声酶法合成反应时间3h。超声波辐射显著提高了生物柴油的产率,在相同反应温度下,超声波辐射使生物柴油产率比静态条件下的产率提高了27%-33%,比摇床作用下的产率提高了6%-15%。超声波作用没有改变酶的最适反应温度。

酶法催化蓖麻油生产生物柴油的研究

[目的]优化酶法催化蓖麻油生产生物柴油的条件。[方法]从种植蓖麻试验地土壤中分离出1株脂肪酶产生菌(Pseudomonassp.)H-4,以其发酵液制备的固定化酶为催化剂,催化蓖麻油与甲醇转酯化生产生物柴油,研究该酶的转酯能力。[结果]薄层检测和气相色谱检测表明,该脂肪酶具有催化蓖麻油与甲醇发生酯交换反应制备蓖麻油酸甲酯的功能。随着反应时间的延长,酯交换率不断升高。甲醇分3次加入,酯交换率最高(78%)。反应温度40℃,酯交换率最高(81%)。酶添加量0.6 g,酯交换率最高(85%)。[结论]在醇油摩尔比3∶1,甲醇分3次加入,固定化酶添加量0.6 g,反应温度40℃,150 r/min条件下反应10 h,油脂的酯交换率达85%。

利用响应面法优化Bacillus natto TK-1产脂肽发酵培养基

用响应面法对Bacillus natto TK-1发酵产脂肽的培养基进行优化。首先用Plackett-Burman法筛选出三个影响较大的重要因素,分别为蛋白胨、酵母粉、CaCl2,然后进行最陡爬坡实验逼近最佳响应面区域,最后通过Box-Behnken设计,利用SAS软件进行回归分析,得到各因素的最佳浓度。在优化培养基条件下,发酵液的溶血圈直径较初始培养基提高了29.3%,脂肽的产量提高了约30%。

Bacillus natto TK-1产脂肽的纯化、抑菌活性及其表面活性剂特性

利用酸沉、醇提和薄层层析等方法从Bacillus natto TK-1发酵液中分离得到脂肽。TLC结果表明,在迁移值Rf0.58～0.65处出现单一紫红色条带其为脂肽粗提物。脂肽的临界胶束浓度约115mg/L。在浓度为512mg/L时,脂肽能将水的表面张力显著地降低到30.1mN/m。同时,通过体外抗粘连实验表明,脂肽能显著抑制沙门氏菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌对96孔板固体表面的粘附,其中,对沙门氏菌的抗粘连效果较为明显。通过平板扩散法考察脂肽抑菌活性,结果表明脂肽具有较广泛的抑菌谱,对灰霉和镰胞霉的抑菌能力较强。

免疫胶体金法快速检测动物源性食品中氯霉素残留的研究

目的:优化建立渗滤式(Flow through)和侧流式(Lateral flow)两种金标记免疫竞争快速筛选方法。方法:采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,标记氯霉素多克隆抗体,以硝酸纤维素膜为载体,包被氯霉素半抗原与卵清蛋白的偶联物作为检测带,经过竞争反应后目测结果。结果:通过简单的样品前处理方法,消除了基质影响,可成功用于猪肉、鸡肉和鳕鱼样品中痕量氯霉素残留的快速检测。检测标准溶液及组织试样的提取稀释液时,灵敏度分别为0.8μg/L和1μg/L。几种氯霉素的结构类似物及常见兽药对氯霉素检测均无干扰,通过酶联免疫吸附定量检测方法验证了2种快速筛选方法的有效性,加速稳定性试验证明渗滤式金标试纸条在4℃下6个月内可保持检测结果的可靠性。结论:所建立的方法操作简单,快速,灵敏度高,稳定性好,可作为动物源性食品中氯霉素残留现场大量筛选的有效手段。

红光对红曲霉生长及次级代谢产物的影响

光照作为重要的环境因子之一,对包括真菌在内的多种生物的生长及生理过程起着重要作用。研究发现,红色单色光对平板培养的红曲霉(Monascus M10)菌落形态有明显的影响;在液态发酵时,红光在发酵初期可促进红曲霉的生长并促进其提前进入色素合成期,但对其生物量无明显影响;红光培养与黑暗培养对照相比,其发酵液、菌丝及单位菌丝中产生的色素都有明显提高,并在一定程度上降低了桔霉素的产量。

硅藻变温发酵生产二十碳五烯酸的研究

考察不了同温度(10℃～30℃)对硅藻(Nitzschia laevis)合成二十碳五烯酸(EPA)的影响,对不同温度下的发酵过程进行动力学特性分析。在此基础上,提出了EPA合成的变温培养方法:延滞期及对数期初期温度控制在25℃,从对数期中期开始在20℃条件下进行培养。采用此变温培养进行发酵,EPA的含量和产量分别达到了6.00%和291.60mg/L,较采用单一温度(25℃)发酵的最大值分别提高了24.07%和18.81%。

红曲色素不同成分的光稳定性研究

对红曲红色素Rubropunctamine和Monascorubramine在日光照射下的稳定性进行了研究。结果表明,红曲色素光降解符合一级动力学反应,并且不受溶解氧的影响。色素光降解的半衰期与色素浓度呈正相关性。使用二极管阵列检测器的高效液相色谱仪对两种色素纯品的光降解过程进行表征发现,Rubropunctamine和Monascorubramine对光敏感,光照后降解形成新的无色物质。色差仪评价显示,随着褪色的进行,色素溶液的色饱和度逐渐减小,色相角保持不变。

猪肝中莱克多巴胺残留的分析研究

优化了莱克多巴胺的仪器分析条件。建立了适合于分析检测猪肝中莱克多巴胺的SPE前处理方法,样品加标回收率为53.75%～66.60%,变异系数0.87%～19.43%。

生活饮用水和肉制品中亚硝酸盐的快速测定

实验建立了一种简便、快速测定亚硝酸盐含量的新方法。在这种方法中,NO2-与对氨基苯磺酸发生重氮化反应,将反应液缓慢倒入由吸附1-萘酚的D290树脂填充的吸附柱中生成红色的偶氮染料。亚硝酸盐测定的线性范围为0.1μg/mL～10.0μg/mL,检出限为0.1μg/mL。将显色结果与标准比色卡比对可进行生活饮用水和肉制品中亚硝酸盐含量的定性和半定量分析,结果满意。

江米酒中凝乳酶产生菌的分离及产酶条件的优化

江米酒是我国南方的一种传统食品,江米酒中微生物所产凝乳酶具有凝乳作用。从江米酒中分离纯化得到4株菌,经菌落分离计数和酪蛋白平板实验研究确定产凝乳酶的优势菌为其中的霉菌,并对该霉菌产凝乳酶条件进行了初步优化,结果表明:2倍浓度的PDA培养基中添加5%葡萄糖而不添加氮源是霉菌产凝乳酶的最佳培养基,在此条件下其所产凝乳酶活力可比优化前提高144%。

甲胺磷降解菌的筛选

从长期使用农药的大棚菜地的土壤中分离筛选到1号、2号、4号和8号4种甲胺磷降解菌。采用气相色谱法,分别测定了它们对甲胺磷的降解能力。结果表明,2号菌有较好的降解能力,培养28 d后对甲胺磷降解可达到46.31%。

蓖麻碱降解菌的选育及脱毒效果的研究

以蓖麻碱为底物,从牛瘤胃液中选育出脱毒能力强、生长旺盛的菌株4-2w,经初步鉴定为假单胞菌(pseydomonas sp．),其最适生长温度为36℃,最适pH为7．0。经脱毒实验,4-2w菌降解蓖麻碱的脱除率达到90%以上,且该菌株未降解其中的蛋白质。

虾青素对四氧嘧啶致糖尿病小鼠降血糖作用研究

为研究天然虾青素在四氧嘧啶致糖尿病小鼠体内的降血糖作用,将天然虾青素分为高、中、低3个剂量组给四氧嘧啶致糖尿病小鼠灌胃,以0.9%生理盐水为模型对照,以二甲双胍为阳性药物对照进行实验。结果表明:三个剂量的天然虾青素均能较好的降低四氧嘧啶致糖尿病小鼠的血糖水平,并能减缓糖尿病小鼠消瘦和多饮多食的症状,以高剂量组的效果最佳。进一步考察了高剂量的虾青素对正常小鼠的影响,发现其对正常小鼠血糖无显著影响。虾青素对四氧嘧啶致糖尿病小鼠具有明显的降血糖作用。

响应面法对Bacillus natto TK-2产聚-γ-谷氨酸(γ-PGA)发酵培养基的优化

通过Plackett-Burman设计和响应面分析对B.natto TK-2发酵产γ-PGA的培养基进行了优化。首先通过Plackett-Burman设计从6个因素中筛选出了有显著影响的葡萄糖、味精、CaCl_2等3个因素;然后通过最陡爬坡和Box-Behnken设计进一步优化,并利用SAS软件进行回归分析,得到以上3个因素的最佳浓度分别为(g/ L):葡萄糖21.4,味精25.1,CaCl_2 2.6。在优化后的培养基下,γ-PGA的产量比优化前提高了34.01%。