香椿老叶中黄酮类和皂苷类物质的分离鉴定

目的对香椿老叶中的黄酮类和皂苷类活性物质进行分离鉴定,为进一步开发香椿老叶产品提供理论基础。方法使用柱色谱和高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography, HPLC)对香椿老叶中的物质进行分离纯化,并采用核磁共振(Nuclear Magnetic Resonance, NMR)和红外光谱(Infrared Spectroscopy,IR)对分离物质进行测定。结果香椿老叶中含有芦丁、表儿茶素、槲皮素、异槲皮素、番石榴苷等。利用显色反应初步定性鉴定出香椿皂苷中包括甾体皂苷和三萜皂苷。结论香椿老叶中含有丰富的黄酮类和皂苷类物质,具有广阔的开发前景。

一种检测杂环胺类化合物的酶联免疫检测方法的建立

为了制备一种广谱性杂环胺抗体,并建立一种可以实现多种杂环胺同时检测的快速分析方法。以杂环胺2-氨基-3,4-二甲基咪唑[4,5-f]喹喔啉(MeIQx)为原料,将其与丁二酸单甲酯酰氯(MCO)反应合成杂环胺半抗原,通过活化酯法将半抗原与蛋白偶联制备免疫原进一步制备多克隆抗体,最终建立间接竞争酶联免疫分析方法(ic-ELISA)。该方法灵敏度(IC50,以MeIQx计)为81.16μg/L,检测限(IC15)为12.07μg/L。方法对喹啉类杂环胺(IQ、MeIQ)、喹喔啉类杂环胺(IQx、MeIQx、4,8-DiMeIQx、7,8-DiMeIQx、4,7,8-TriMeIQx)以及吡啶类杂环胺(PhIP)具有相同的识别能力,交叉反应率均达到93%以上。油炸牛肉和肉松样品中杂环胺(MeIQx)添加回收率在91.18%~98.64%之间,检测结果与液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)有很好的一致性(R2=0.9927)。本文建立的酶联免疫分析方法可以实现喹啉类、喹喔啉类以及吡啶类杂环胺总量的检测,为热加工肉制品中杂环胺的检测提供了一种简单、准确的快速检测方法。

重组酶聚合酶恒温扩增结合乳胶微球试纸条快速检测金黄色葡萄球菌

通过建立一种将重组酶聚合酶恒温扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)与乳胶微球试纸条(latex microsphere test strips,LMTS)相结合的方法,快速检测金黄色葡萄球菌。根据金黄色葡萄球菌保守区序列(nuc)设计特异性引物,经RPA扩增后用LMTS检测,确定RPA-LMTS检测金黄色葡萄球菌的灵敏度和特异性。灵敏度结果显示RPA-LMTS检测限为500 fg DNA和1.2×101 CFU/mL纯菌液;特异性结果表明与沙门氏菌、大肠杆菌O157∶H7、志贺氏菌、产气肠杆菌和单增李斯特菌无交叉反应,特异性良好;用食物样品评估RPA-LMTS检测效果,结果显示经过增菌3小时后,RPA-LMTS可检测1.2×100 CFU/mL(g)的金黄色葡萄球菌。

传统发酵蓝莓饮料中乳酸菌的分离鉴定及筛选

从传统发酵蓝莓饮料中分离、筛选出发酵性能优异的乳酸菌,为蓝莓相关产业的深加工提供理论依据。采用Ion S5 XL测序平台对样品中细菌16S rDNA V4区进行高通量测序,发现乳杆菌属(Lactobacillus)为主要发酵菌属,相对丰度为69.1%。通过分离鉴定共得到50株乳酸菌,与16S rDNA数据比对,其中8株菌株与相对丰度排名前十的聚类单元代表序列相似度为100%。进一步根据产酸、耐受性能测试及在发酵蓝莓果汁中生长状态最终筛选得到2株植物乳杆菌,菌株编号为TUST-L4和TUST-L27,适用于乳酸菌发酵蓝莓饮料的开发。

索氏提取与水蒸气蒸馏提取对丁香油抗氧化及抑制LDL氧化能力的影响

采用分光光度法和荧光分析法对这2种丁香油的抗氧化活性及抑制LDL氧化修饰能力进行了比较。结果表明,水蒸气蒸馏丁香油(COESD)的DPPH自由基清除率、总还原力、总抗氧化能力及FRAP法抗氧化能力均显著强于索式提取的(COESM)(P<0.05或P<0.01);通过对LDL氧化过程中Trp荧光淬灭、脂褐素及总荧光产生量、MDA修饰Lys残基荧光变化和全波长扫描比较,COESD的抑制能力也强于COESM的;有效成分含量分析表明COESD比COESM含有更高的抗氧化活性物质总多酚及总黄酮。

不同乳化盐对再制干酪的影响及其复配优化

以自制Mascarpone干酪和市售Cheddar干酪为原料制备再制干酪,研究4种常见乳化盐(焦磷酸钠、六偏磷酸钠、多聚磷酸钠和柠檬酸钠)对再制干酪功能特性的影响,并进行乳化盐的复配优化。结果表明:4种乳化盐的乳化能力大小为焦磷酸钠>柠檬酸钠>多聚磷酸钠>六偏磷酸钠;根据单因素试验结果,采用响应面法,选择焦磷酸钠、柠檬酸钠和多聚磷酸钠进行乳化盐复配优化,得出乳化盐的最佳配方为多聚磷酸钠添加量0.70%、柠檬酸钠1.50%、焦磷酸钠0.40%。

量子点标记免疫层析试纸条快速检测谷物中赭曲霉毒素A

目的:根据竞争抑制免疫层析原理,构建一种基于量子点标记的免疫层析试纸条用于检测谷物中赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)的残留量。方法:通过活化酯法将羧基功能化的量子点(Quantum dot,QD)与赭曲霉毒素A多克隆抗体(Antibody,Ab)偶联制备量子点抗体偶联物(QD-Ab);通过分别添加不同量的QD-Ab和工作液,优化量子点标记免疫层析试纸条的工作条件;通过商品化试剂盒验证该方法的有效性。结果:当QD与Ab的摩尔比为1∶10时,QD-Ab荧光特性最佳;在QD-Ab和工作液添加量分别为1、10μL时,量子点标记免疫层析试纸条结果最佳;量子点标记免疫层析试纸条的检测限为0.5μg/L,谷物样品中的检测限为5μg/kg,整个检测过程不超过10 min;量子点标记免疫层析试纸条特异性良好且具有有效性。结论:该方法操作简便、检测快速、结果准确灵敏,易于判断,可以满足谷物中赭曲霉毒素A残留量现场快速检测的要求。

应用Discovery Studio(TOPKAT)软件预测糖抑制PhIP过程中新产物的毒理学性质

通过Discovery Studio(TOPKAT)毒性预测软件对糖抑制PhIP形成途径中新产物的毒理学特性进行分析,为全面评价杂环胺减控后的食品安全性提供基础数据。结果显示,在致突变性和皮肤致敏性评价中,α-二羰基化合物与肌酐/PhIP的反应产物毒性与PhIP相比均无显著变化。在潜在发育毒性评价中,α-二羰基化合物与肌酐反应产物的毒性与PhIP相比增强,而α-二羰基化合物与PhIP反应产物的毒性与PhIP相比没有变化。在大鼠口服LD50和长期口服最低毒副反应水平评价中,α-二羰基化合物与肌酐的大多数反应产物的毒性均比PhIP强,而α-二羰基化合物与PhIP反应产物的毒性比PhIP弱。在大鼠吸入LC50评价中,α-二羰基化合物与肌酐/PhIP大部分反应产物的毒性均比PhIP强。由此可见,α-二羰基化合物与肌酐和PhIP反应产物的形成均会使它们的毒性发生改变。

乙二醛和丁二酮抑制PhIP形成的作用机制研究

乙二醛和丁二酮是糖降解产生的具有高反应活性的α-二羰基化合物,可显著抑制杂环胺2-氨基-1-甲基-6-苯基-咪唑[4,5-b]吡啶(2-amino-1-methyl-6-phenylimidazo[4,5-b]pyridine,PhIP)的产生。通过对模拟体系中反应前体物及产物变化的分析,探讨乙二醛和丁二酮抑制PhIP形成的作用机制。结果表明:PhIP的前体物苯丙氨酸和肌酐均会与乙二醛和丁二酮发生化学反应而消耗,从而减少PhIP的产生;产生的PhIP可进一步与乙二醛和丁二酮反应而被消耗;同时,乙二醛和丁二酮与苯丙氨酸的反应会促进PhIP的直接前体物苯乙醛的产生,存在促进PhIP产生的可能。因此,乙二醛和丁二酮对PhIP的抑制作用是体系中复杂化学反应综合作用的结果。

低温储存条件对原料乳嗜冷菌及细菌多样性的影响

分析了储存条件对原料乳中嗜冷菌细菌多样性及牛乳品质的影响,为原料乳低温储存条件的筛选提供科学依据。通过16SrRNA高通量测序分析了原料乳在4℃储存一天后的细菌多样性,依据现行国标方法监测了4,10℃和15℃储存期间原料乳中嗜冷菌数和菌落总数的变化。原料乳在4℃储存过程中,微生物繁殖比较缓慢,但其微生物群落组成变化明显,储存24小时后,假单胞菌、黄杆菌等嗜冷菌的相对丰度占原料乳中细菌总量的90%以上;根据微生物计数结果和国标限量,低温储存4℃≤24 h,10℃≤16 h,15℃≤8 h,原料乳中菌落总数能满足生乳的食品安全国家标准,但嗜冷菌大量增殖可能会引起牛乳品质的下降。

奶粉中阪崎克罗诺杆菌耐干燥性与MLST分型的研究

为了解奶粉中阪崎克罗诺杆菌耐干燥性及多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)间的关系,对实验室保存的35株阪崎克罗诺杆菌进行干燥试验,并采用MLST对所有菌株进行分子遗传学分析。经过6 d干燥试验处理,结果显示,35株阪崎克罗诺杆菌中,耐干燥能力较强的IQCC10409(1号)、IQCC10455(6号)和110609-3(31号)菌株失活率分别为63.73 %、56.94 %和44.43 %,其中31号菌株耐干燥能力最强,它们分别属于ST73、ST73和ST23型。MLST分析表明,全部菌株共分成16个不同的序列型(sequence type,ST),其中,属于ST1型(20号、24号、27号、28号、33号)和ST4型(4号、6号、7号、9号、11号)的菌株较多,分别有5株菌。结果表明阪崎克罗诺杆菌基因多样性程度较高,而耐干燥性较强的菌株主要集中于ST73和ST4型,另外还发现,即使相同ST型的菌株,其耐干燥能力也不定相同。

烤肉中糖对杂环胺形成的影响及其作用机制研究

烤肉中添加不同种类的糖,分析糖的添加对4种杂环胺以及5种α-二羰基化合物形成的影响,通过杂环胺与α-二羰基化合物形成量的相关性分析,探讨糖对杂环胺抑制作用机制。结果表明:不同种类的糖均可显著抑制杂环胺(PhIP、IQ、MeIQ和MeIQx)的生成,且不同种类的糖对杂环胺的形成存在显著的量效关系。其中葡萄糖、果糖和蜂蜜对于各种杂环胺的抑制效果明显高于蔗糖。同时添加不同种类的糖,α-二羰基化合物(丙酮醛、乙二醛、3-脱氧葡萄糖醛酮和葡萄糖醛酮)的产生量显著增加,且均与糖量呈显著量效关系。通过相关性分析表明添加葡萄糖、果糖、蔗糖和蜂蜜时,α-二羰基化合物的形成总量与杂环胺形成总量之间呈负相关性。验证了糖对食品中杂环胺的抑制作用可能是通过热降解形成的α-二羰基化合物实现的。

晚期糖基化终产物诱导小鼠胰岛素抵抗的研究

以丙酮醛修饰β-乳球蛋白产物(methylglyoxal modifiedβ-lactoglobulin product,MG-bLG)为蛋白质结合态晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)的代表物,通过灌胃摄入方式研究AGEs对小鼠胰岛素抗性的影响。经长时间摄入MG-bLG,相较于对照组(C组),实验组(MG-bLG组)小鼠摄食量增多,体重增大,血清中低密度脂蛋白、总胆固醇和甘油三酯含量显著增高(P<0.05),空腹血糖显著升高(P<0.05)至7.1 mmol/L,空腹胰岛素水平显著升高(P<0.05)至14.8 mU/L,胰岛抵抗指数和胰岛β细胞功能指数同样显著升高(P<0.05)。此外,MG-bLG组小鼠血清中AGEs水平显著升高(P<0.05)至131.99 pg/mL。因此,长期摄入AGEs可改变机体的糖脂代谢情况,促进机体胰岛素抵抗形成,增加机体患2型糖尿病风险。

糖基化修饰对澳洲坚果蛋白性质的影响

将澳洲坚果蛋白(Macadamia protein,M-Pro)分别与蔗糖、葡萄糖按质量比为1∶1和3∶1分别在160℃和180℃加热10 min,研究糖基化修饰对M-Pro溶解性、消化性和免疫反应性的影响。结果表明,与单独热处理M-Pro相比,糖基化修饰降低了M-Pro的免疫反应性,但提高了M-Pro的溶解性,且对消化性影响不大。在相同处理条件下葡萄糖参与的糖基化反应比蔗糖对M-Pro结构的影响程度更大,说明还原糖对改善M-Pro致敏性更为有效。糖基化处理能显著降低M-Pro的免疫反应性,特别是还原糖的作用更强,是降低蛋白致敏性的潜在有效手段。

基于CdSe/ZnS量子点和黑磷的组胺分子印迹聚合物的合成及性能评价

在室温下通过一步聚合法,在反相微乳液体系中合成了一种新型的基于黑磷和量子点结合分子印迹技术的荧光传感材料(BPS-QDs@MIP),其中黒磷是一种新型的优于石墨烯的二维半导体材料。该聚合物以组胺为模板,以3-氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)为功能单体,以四乙氧基硅烷(TEOS)为交联剂而合成的。通过扫描电镜和红外光谱表征表明,本实验成功地合成了新型的荧光分子印迹聚合物,结构均一,球形分布。与荧光非印迹聚合物相比,显示出了较高的模板选择性和特异性吸附性。在最佳浓度条件下,荧光分子印迹传感材料随着组胺浓度的增加,荧光强度呈现线性增强,组胺的线性范围为0.10~20 mg/L,相关系数为0.99,方法的检出限为0.019 mg/L。当组胺浓度为10 mg/L时,重复3次,方法的RSD为2.0%。

碳量子点分子印迹荧光传感器检测多巴胺

以多巴胺作为模板分子,碳量子点作为荧光响应信号,通过自由基聚合制备对多巴胺具有特异性识别位点的荧光分子印迹聚合物。所制得的印迹聚合物对多巴胺最大吸附量为非印迹聚合物吸附量的2.61倍。对检测过程中体系pH,振荡时间及水浴孵化时间对分子印迹荧光传感器荧光响应的影响进行探究。所建立的荧光传感器对多巴胺的选择性明显高于对其结构类似物、糖类、氨基酸及常见的离子,方法的线性范围在0.02~0.3 mg/L之间,相对标准偏差为0.090%~1.8%,检出限为0.01 mg/L,实际样品的回收率为76.7%~118.4%,表明制备的多巴胺分子印迹荧光传感器可以用于复杂样品中多巴胺的定量分析。

响应面法优化蓝莓生料乳酸菌发酵工艺

以蓝莓果浆为原料、乳酸菌为发酵菌株,制作蓝莓生料发酵饮料。通过单因素、正交和响应面试验优化发酵工艺。结果表明,乳酸菌发酵蓝莓果浆的最佳工艺条件为果浆浓度35%、发酵菌株TUST-L 4、碳源为葡萄糖、碳源添加量2.5°Brix、接种量6%、发酵温度37℃、发酵时间86 h,此时乳酸菌活菌数为9.34 lg cfu/mL,与预测值较为接近,响应面试验拟合度良好。研究结果可为发酵蓝莓产品的生产实践提供试验数据参考。