产菊粉酶微生物的筛选及发酵工艺的研究

以菊粉为唯一碳源,从菊芋切面及表皮的土壤中筛选出产菊粉酶的微生物,其中霉菌5株,放线菌19株,酵母4株,细菌3株,经复筛菌株M08的发酵液酶活最高。其摇瓶发酵的最优条件为(g/L):75%的菊粉20,酵母膏15,NaCl5,NH4H2PO40.5,ZnSO4·7H2O0.5,FeSO4·7H2O0.1,pH7,接种2.5×106cfu/mL的孢子悬浮液0.5mL,250mL的三角瓶中装30mL的发酵培养基,29℃,90r/min下培养5d酶活力可稳定在3.28U/mL,比酶活25.43U/mg。

高效凝胶渗透色谱法检测菊糖相对分子质量

为了建立利用高效凝胶渗透色谱测定菊糖相对分子质量的方法,采用GPC色谱柱,示差折光检测器检测,以三蒸水为流动相,流速0.8ml/min,柱温30℃。结果表明不同分子量标准右旋糖酐的保留时间与相应的相对分子质量对数值(lgMw)在相对分子质量1.0×103～2.5×104范围内具有良好的线性关系(r=0.9894),精密度实验RSD为0.24%,重现性实验RSD为0.21%,稳定性实验RSD为0.38%,准确度实验相对误差在0.4%左右。该法简便、快速、灵敏度高,精密度、重现性及稳定性均较好。用此法检测热回流、超声、微波三种提取工艺得到的菊糖相对分子质量分别为:热回流提取3500,超声提取2405,微波提取3864。

双酶合成茶黄素工艺的研究

采用梨多酚氧化酶和Denilite IIS真菌漆酶双酶催化合成茶黄素。研究结果表明,酶促氧化的最佳条件为:pH值3.5,梨多酚氧化酶最适温度30℃,酶添加量10mL(酶活493.00U/min·mL),反应时间1.5h;Denilite IIS真菌漆酶最适温度50℃,酶添加量1.5mg/mL(酶活194.13U/min·mg),反应时间1.5h。与单一酶源合成方法相比,该方法可提高茶黄素产量。