耐铬胶原蛋白酶产生菌的筛选及应用

通过明胶平板法结合水解铬革屑试验,筛选到一株产耐铬胶原蛋白酶的菌株。经16S r DNA基因序列相似性分析,鉴定为解淀粉芽孢杆菌,命名为B.amyloliquefaciens TCCC11319。用茚三酮显色法和原子吸收分光光度法,测定了铬革屑水解液中氨基酸浓度为45.6μmol/m L,游离铬含量为1.3mg/m L。通过高效液相色谱(HPLC)进一步分析了水解液中氨基酸成分。对菌株及其所产胶原蛋白酶的Cr(Ⅲ)耐受性分析发现,菌株B.amyloliquefaciens TCCC11319能耐受的最大Cr(Ⅲ)浓度为0.3g/m L;B.amyloliquefaciens TCCC11319产生的胶原蛋白酶能耐受的最大Cr(Ⅲ)浓度为0.8mg/m L。研究结果为生物法降解含铬胶原废弃物技术的开发提供了依据。

产胶原蛋白酶菌株的构建及性质分析

使用聚合酶链式反应(PCR)法扩增了解淀粉芽孢杆菌(Bacillus.amyloliquefaciens TCCC11319)的胶原蛋白酶基因col,并在枯草芽孢杆菌(Bacillus.subtillis WB600)中进行表达。收集重组菌株的发酵酶液,以此来分析胶原蛋白酶性质。酶学性质研究表明:酶的最适反应温度为40℃,在30~40℃具有良好的温度稳定性;最适反应p H值为8.0,在pH值7.0~8.0的条件下稳定,表明是一种中性酶;金属离子Ca^(2+)、Mg^(2+)对酶有明显的激活作用,而Mn^(2+)、Cu^(2+)、Fe^(2+)对酶有明显的抑制作用,其中Cu^(2+)对酶的抑制作用最显著。酶学性质的研究结果对胶原蛋白酶在制革固体废弃物处理应用中具有很好的指导意义。

芽孢杆菌的基因改造研究进展(续)

介绍了芽孢杆菌的特征及其在制革工业中的应用,描述了芽孢杆菌基因改造之后的性能变化,指出通过基因工程改造可以提高芽孢杆菌产酶的热稳定性、耐酸碱性并改善底物特异性,从而改善芽孢杆菌产酶在制革中的作用效果。对芽孢杆菌基因改造在制革中的应用前景进行了展望,表明通过相关研究,可以建立高效可控的工艺,进一步推广酶在制革生产中的应用。

芽孢杆菌的基因改造研究进展

介绍了芽孢杆菌的特征及其在制革工业中的应用,描述了芽孢杆菌基因改造之后的性能变化,指出通过基因工程改造可以提高芽孢杆菌产酶的热稳定性、耐酸碱性并改善底物特异性,从而改善芽孢杆菌产酶在制革中的作用效果。对芽孢杆菌基因改造在制革中的应用前景进行了展望,表明通过相关研究,可以建立高效可控的工艺,进一步推广酶在制革生产中的应用。

蛋白酶与脂肪酶在制革浸水中的作用效果研究

针对蛋白酶Ⅰ、蛋白酶Ⅱ与脂肪酶在浸水中的作用,探讨了2种蛋白酶与脂肪酶的用量、pH等不同条件对浸水效果的影响.以皮革吸水量、浸水废液中蛋白质含量、羟脯氨酸含量、浸水生皮的柔软度、黄心程度为指标,比较不同酶制剂的浸水差异,并选择最佳的原料与比例.研究结果显示,酶制剂能明显缩短浸水时间,当pH=10,蛋白酶Ⅰ用量占皮质量0.4%,脂肪酶用量占皮质量0.1%(蛋白酶Ⅰ与脂肪酶复配比例为4∶1)时,浸水效果最佳.