海藻酸钠包埋法固定L-阿拉伯糖异构酶的研究

以海藻酸钠为载体,戊二醛为交联剂,对L-阿拉伯糖异构酶进行固定化。研究海藻酸钠浓度、氯化钙浓度、戊二醛浓度以及硬化时间等因素对固定化效果的影响。结果表明最佳固定化条件为:海藻酸钠浓度3.5%,氯化钙浓度3.0%,戊二醛浓度0.2%,硬化时间7 h,该条件下制备的固定化酶与游离酶相比,最适宜反应温度和pH值基本没有变化,并且具有较好的操作稳定性和贮存稳定性。

银耳多糖分离提取工艺的优化研究

银耳多糖是银耳中的主要生物活性物质之一,可由银耳子实体、孢子及发酵液中分离、纯化后获得。大量研究表明,银耳多糖具有免疫调节、抗肿瘤、抗衰老、降血脂和降血糖等多种生理活性。采用超声辅助热水浸提法来提取银耳多糖,通过单因素及正交试验优化料液比、浸提温度、浸提时间和浸提液pH值,得出银耳多糖的提取工艺条件为:料液比1∶50(g/mL),浸提温度80℃,浸提时间4.5 h,pH 10,银耳多糖得率最高,为(16.25±0.37)%。方差分析结果表明料液比对银耳多糖得率具有显著性影响(p<0.10)。

出芽短梗霉聚苹果酸发酵条件的优化

在5 L发酵罐上，对出芽短梗霉PMLA发酵条件进行了研究，确定出芽短梗霉PMLA发酵的最优条件。由试验结果可知：优化的发酵温度为分阶段调节，即0-24 h设定发酵温度为30℃，24 h以后调节发酵温度为25℃；搅拌转速400 r/min；通风比1∶1.2。在此条件下，出芽短梗霉PMLA发酵获得的最大生物量为38.7 g/L；聚苹果酸产量为45.2 g/L；生产强度为0.38 g/（L·h）和PMLA分子量为8412 Da。

氨基酸对出芽短梗霉发酵生产聚苹果酸的影响

本文研究了添加氨基酸对出芽短梗霉A.pullulans CGMCC3337发酵生产聚苹果酸(PMLA)的影响。通过单因素实验和正交实验分别对氨基酸种类及其添加量进行优化。由单因素实验可知:天冬氨酸(Asp)、亮氨酸(Leu)、缬氨酸(Val)和苏氨酸(Thr)对菌体生长和PMLA合成最有利。由正交实验可知:氨基酸的最优组合为(g/L):天冬氨酸(Asp)0.4、亮氨酸(Leu)0.4、缬氨酸(Val)0.4、苏氨酸(Thr)0.4。在最优组合条件下获得的PMLA产量和分子量分别达到了57.89 g/L和8879 u,比未添加氨基酸获得的PMLA产量和分子量分别提高了40.92%和45.20%。

L-核糖的生物合成及其在药物中的应用

L-核糖是一种重要的药物中间体。综述了以核糖醇及L-阿拉伯糖为原料的L-核糖的生物合成方法,介绍了L-核糖在L-核苷类药物、糖缀合物、寡核苷酸中的应用进展。

聚苹果酸生产菌株出芽短梗霉菌代谢组学样品前处理方法的优化

为了得到更加准确和完整的胞内代谢物信息,从而更加真实的反映微生物胞内代谢情况,基于GC-MS平台,从淬灭剂、提取剂和溶解剂3个方面对代谢组学样品制备过程进行了系统性的优化。对比了不同淬灭剂对胞内代谢物的渗出及细胞损伤情况,结果表明60%甲醇/0.9%Na Cl效果最佳。研究了不同提取剂、溶解剂的提取和溶解效果,结果显示60%甲醇提取效果显著,吡啶溶解效果突出。最终确定了出芽短梗霉菌代谢组样品最适前处理方法 :预冷的60%甲醇/0.9%Na Cl淬灭细胞,液氮研磨和反复冻融破碎细胞,预冷的60%甲醇提取,最后采用吡啶溶解提取物并采用MSTFA 40℃衍生90 min。采用该方法可以检测出300多种代谢组分,包括大量氨基酸、有机酸和糖类物质。本方法可以有效的应用于出芽短梗霉菌代谢组学样品的研究。