瓦尼桑黄固体发酵产物的化学成分及其生物活性研究

对瓦尼桑黄(Sanghuangporus vaninii)固体发酵产物的化学成分及生物活性进行研究。采用超声提取、柱层析以及半制备高效液相色谱等方法分离纯化,通过波谱数据鉴定了化合物的结构,并对所得单体化合物进行体外抗氧化活性、α-葡萄糖苷酶和黄嘌呤氧化酶抑制活性筛选。从瓦尼桑黄固体发酵产物中分离得到17个化合物,分别为(2Z,4E)-γ-ionylideneacetic acid(1)、phellinulin E(2)、phellinulin F(3)、phellinulin G(4)、phellinulin J(5)、phellinulin L(6)、phellinulin M(7)、phellinulin N(8)、elgonenes D(9)、咖啡酸(10)、hispidin(11)、3-hydroxyhispidin(12)、原儿茶酸(13)、4-(3-ethoxy-4-hydroxyphenyl)but-3-en-2-one(14)、丁子香酚(15)、亚油酸甲酯(16)、硬脂酸(17),其中化合物1~9为首次从瓦尼桑黄中分离得到。活性测试结果显示化合物10~13表现出良好的抗氧化活性,对DPPH自由基的半数抑制浓度(IC_(50))分别为16.45、37.52、82.71、50.46μg/mL,对ABTS自由基的IC_(50)值分别为1.43、2.26、34.55、21.60μg/mL,对羟基自由基的IC_(50)值分别为38.43、49.46、86.74、69.16μg/mL。化合物10、11还对黄嘌呤氧化酶表现出良好的抑制作用,IC_(50)值分别为28.73和44.80μg/mL。化合物17具有一定的α-葡萄糖苷酶抑制活性,其IC_(50)值2.31μg/mL。

华泽兰内生真菌Septoriella phragmitis次级代谢产物及其生物活性研究

为研究华泽兰内生真菌Septoriella phragmitis的化学成分及其生物活性,运用硅胶柱柱色谱、半制备高效液相色谱等方法对其进行分离提纯,结合现代波谱技术鉴定化合物结构,从Septoriella phragmitis提取液中分离得到10个化合物,分别鉴定为腺苷(1)、cyclo-(S-Pro-S-Ile)(2)、5-羟基-2-羟甲基-4H-哌喃-4-酮(3)、3α-hydroxyartemisinic acid(4)、leptosphaerone C(5)、1-氨基四氢化萘(6)、泽兰素(7)、β-吲哚基丙氨酸(8)、环(丙氨酸-酪氨酸)二肽(9)、β-D-fructopyranocy-(2→6)-D-glucopyranose(10),所有化合物均为首次从华泽兰内生真菌Septoriella phragmitis中分离。对所得化合物采用对硝基苯基-β-吡喃半乳糖苷法测定α-葡萄糖苷酶抑制活性,对硝基苯磷酸盐法测定PTP1B抑制活性,MTT法测定胃癌细胞HGC-27抑制活性,标准精度对接法进行分子对接。化合物6和7有α-葡萄糖苷酶抑制活性,IC_(50)值分别为8.1、8.6μg/mL;化合物6、7和9有PTP1B抑制活性,IC_(50)值分别为6.5、8.2、0.5μg/mL;化合物5和6有胃癌细胞HGC-27抑制活性,IC_(50)值分别为12.2、16.8μg/mL。分子对接显示化合物6和7与α-葡萄糖苷酶和PTP1B蛋白有较强关联性,可作抗糖尿病先导化合物进行后续研究。

依托重点实验室以课题研究促进大学生创新素质的培养

依托重点实验室,以大学生参加课题研究作为课堂教学外延的形式,加强大学生创新意识、创新思维和创新能力的培养,使学生关注国家、社会和当地经济的发展,树立正确的人生观和价值观,培养学生不断进取的团队精神,能够增强师生间的交流,达到"教学相长"的目的,是培养大学生创新素质的一条重要途径。

依托重点实验室以课题研究促进大学生创新素质的培养

依托重点实验室,以大学生参加课题研究作为课堂教学外延的形式,加强大学生创新意识、创新思维和创新能力的培养,使学生关注国家、社会和当地经济的发展,树立正确的人生观和价值观,培养学生不断进取的团队精神,能够增强师生间的交流,达到"教学相长"的目的,是培养大学生创新素质的一条重要途径.

天然药物化学自我设计实验教学研究

文章将自我设计实验教学引入我校药理学专业硕士点的学位课程——天然药物化学实验教学中,对如何充分发挥自我设计实验教学的作用,从实验教学内容、教学方法和教学环节等方面进行了改革尝试,为培养天然产物研究与利用的高级应用型人才提供了新的实验教学参考模式。

中华剑角蝗内生真菌Penicillium oxalicum次级代谢产物Secalonic acid A的分离及毒性实验研究

从中华剑角蝗肠道内生真菌分离鉴定Penicillium oxalicum,并进行其次级代谢产物的分离研究;在前期研究证实具有良好的抗肿瘤活性基础上,进行其毒性实验研究,为临床应用提供毒理学依据.采用活性追踪法,从中华剑角蝗肠道共生真菌Penicillium oxalicum的发酵产物中分离得到具有较高抗肿瘤活性的化合物;将40只昆明小鼠随机分为空白对照组和Secalonic acid A三个剂量给药组,每组10只,分别按照175、550、1 750mg/kg药物剂量(用橄榄油溶解),1次灌胃,灌胃体积为40mL/kg,逐日观察动物行为、外观及大小便,计算LD50,对主要脏器进行病理学检查.结果从内生真菌Penicillium oxalicum的发酵产物中分离得到一个具有较高抗肿瘤活性的苯并吡喃酮二聚体类化合物,经波谱数据及理化性质鉴定为Secalonic acid A,为首次从该属菌种中分离得到;Secalonic acid A给药后出现明显的活动异常,并随后相继死亡;肉眼观察可见肝脏表面呈红褐色,有少量出血点,胃肠臌胀,小肠充血扩张,其余器官肉眼观未见明显异常;病理学检查可见心、肝、肾、脾、胃、大小肠有不同程度病理学改变.结论表明,在动物水平上发现Secalonic acid A具有较强的毒性,其毒性机制正在进一步研究之中.

睡菜水提液对小鼠的急性毒性实验研究

目的:观察睡菜水提液对大鼠的急性毒性.方法:预实验:灌胃给予小鼠水提液剂量分别为2455、1841.25、1380.94、1035.70 g/L,观察给药当天及7 d内小鼠的状态,计算半数致死量(50%lethal dose,LD_(50));最大耐受量实验:灌胃给予睡菜最大剂量2455 g/L,观察给药后14 d内小鼠状态和死亡情况,给药14 d后检测小鼠的血液生化指标、计算主要脏器指数以及观察主要脏器病理学变化.结果:未能测出睡菜水提液的半数致死量.最大耐受量实验显示:给药后14 d内小鼠状态良好,无中毒反应或死亡情况.给药组小鼠第3、7、11、14 d体质量增长与空白组比较无统计学差异(P>0.05);给药组小鼠血液生化指标、主要脏器指数与空白组无统计学差异(P>0.05);组织形态学、组织病理学检查未发现睡菜水提液对小鼠主要脏器产生病理改变.结论:睡菜水提液的最大无毒剂量大于2455 g/L,是成人临床用药(15 g)的100.6倍,是安全的用药剂量范围.

华泽兰内生真菌Aspergillus puniceus次级代谢产物及其抗三阴性乳腺癌活性和作用机制

从华泽兰根部分离得到一株内生真菌Aspergillus puniceus.采用正相硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱及半制备高效液相色谱等方法,从该菌株的发酵液中分离得到8个结构类似的口山酮类化合物,通过现代波谱技术分别鉴定为3′,4′-hydrogenated austocystins A(1)、austocystin M(2)、austocystin F(3)、austocystin D(4)、austocystin B(5)、austocystin K(6)、austocystin A(7)、austocystin H(8).MTT结果显示化合物5对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞具有较好的选择性细胞毒活性(IC_(50)为1.28μmol·L^(-1)).另外,流式细胞术检测化合物5作用于MDA-MB-231细胞后凋亡率的变化,相比于对照组,最高总凋亡率为69.7%.同时,AO/EB双荧光染色也证明化合物5能够诱导MDA-MB-231的细胞凋亡.JC-1线粒体膜电位检测进一步显示化合物5能够通过线粒体途径诱导三阴性乳腺癌MDA-MB-231的细胞凋亡.

内生放线菌Streptomyces californicus XY3-1抗菌活性次级代谢产物研究

从三峡地区濒危植物内生菌中寻找活性次级代谢产物过程中,发现中华蚊母树叶片得到的内生放线菌XY3-1粗提物显示较强抑制植物病原菌活性。以抗菌活性指导分离从Streptomyces californicus XY3-1液体发酵乙酸乙酯提取物中分离鉴定9个化合物,运用核磁共振,质谱及文献对照等方法确定其确定结构,分别为Benzodipyran(1),Okicenone(2),2-(2'-hydroxypropyl)-5-methyl-7-hydroxychromone(3),2-(6-methyl-8-oxo-5,8-dihydronaphthalen-1-yl)-acetic acid(4),3,8-dihydroxy-1-methyl-4a,9a-dihydroanthracene-9,10-dione(5),dibutylphthalate(6),bis(2-ethylhexyl)benzene-1,2-dicaroxylate(7),p-hydroxybenzaldehyde(8),indole-3-aldehyde(9)。以滤纸片法评价化合物1~9的抗菌活性,结果表明化合物1对番茄枯萎病原菌、角斑病原菌、柑橘溃疡病菌、鳗弧病菌均有抑制效果,MIC值分别为62.50μg·mL^(-1)、7.81μg·mL^(-1)、62.50μg·mL^(-1)、7.80μg·mL^(-1);化合物2对角斑病原菌,鳗弧病菌两种病原菌具有抑制作用,MIC值分别为7.80μg·mL^(-1)、3.90μg·mL^(-1);化合物4仅对鳗弧病原菌有抑制作用,MIC值为7.80μg·mL^(-1),其余化合物对四种指示病原菌均无有意义的抗菌活性。

一株昆虫内生真菌Alternaria sp.次级代谢产物研究

采用硅胶柱色谱,Sephadex LH-20凝胶柱色谱及HPLC等方法从昆虫共生真菌Alternaria sp.(Be-1)的发酵液分离得到7个代谢产物,经NMR,MS及理化性质等确定为4个环肽和3个聚酮类化合物,4-甲氧基格链孢酚(1),5'-methoxy-6-methyl-biphenyl-3,4,3'-triol(2),altenusin(3),二氢腾毒素(4),腾毒素(5),环(4-羟基-脯-亮)二肽(6)和cyclo(L-Phenylalanine-trans-4-hydroxy-L-proline)(7)。测定了化合物1-7对抗肿瘤治疗靶点-受体酪氨酸激酶的抑制活性,药理实验结果表明,化合物1-6对三种酪氨酸激酶(EGFR,VEGFR-1,c-Met)具有不同程度的抑制活性,化合物1,3,6对EGFR,VEGFR-1,c-Met均具有强的抑制作用,而且化合物6还有选择性抑制EGFR和c-Met的活性。

湖北海棠质量标准研究

目的:制定湖北海棠药材质量标准,为湖北海棠的合理开发利用提供科学依据。方法:采用生药鉴别、常规检测、薄层鉴别及HPLC法进行研究。结果:湖北海棠性状、显微特征明显,能较好地与同属其他植物相区分。湖北海棠药材醇溶性浸出物平均含量为30.66%,总灰分平均含量为6.45%,酸不溶性灰分的平均含量为2.70%,水分的平均含量为9.79%。湖北海棠药材薄层色谱中,在对照品相同位置显相同颜色斑点。HPLC定量分析中,根皮苷线性范围为2.40～16.80μg/mL(r=0.9998),平均回收率为98.82%,RSD为1.04%。结论:所建立的分析方法简便、准确、可靠,可作为该药材的质量标准。

开口箭与筒鞘蛇菰提取物醒酒作用的实验研究

目的探讨开口箭、筒鞘蛇菰提取物的醒酒作用。方法采用行为学指标,探讨酒精对小鼠的致醉量及开口箭、筒鞘蛇菰提取物对急性酒精中毒小鼠的翻正反射和自发活动的影响。结果39度白酒对小鼠的致醉量为0.34 m l.(20 g)-1;小鼠给酒致醉后,开口箭、筒鞘蛇菰提取物对其翻正反射维持时间的影响明显,与模型组相比有显著性差异(P<0.05)。自发活动实验显示,开口箭、筒鞘蛇菰醇提取物的醒酒效果均比水提取物的效果要好。结论开口箭、筒鞘蛇菰提取物具有醒酒作用,值得进一步研究。

苎麻叶的饲用研究与开发利用

改革开放以来,养殖业的迅猛发展,导致了蛋白和能量饲料紧缺。同时,随着国家对食品安全越来越重视,用一些优质牧草代替部分饲料,对解决＂人畜争粮＂问题具有重要意义,同时积极寻找牧草以外可替代的植物性饲料显得尤为重要。苎麻是一种多年生宿根作物,同时又是一种湿草类速生性多叶植物,其叶片约占植株质量的40%,它不但是光合作用的器官,而且是植物体内蛋白质的代谢中心,加之苎麻本身也是一种民间常用的中药,

七叶一枝花内生真菌Penicillium sp.(NO.24)次级代谢产物研究

从神农架地区濒危药用植物七叶一枝花叶片中一株内生真菌Penicillium sp.中分离纯化得到七个聚酮类化合物和一个简单的生物碱类的次级代谢产物,其结构经核磁共振,质谱等方法确定,分别为Citrinin H1(1),dehydroisopenicillide(2),penicillide(3),7,9-二烯-十九碳酸单甘油酯(4),7-烯-十九碳酸单甘油酯(5),Silvaticol(6),5-hydroxy-2-pyridinemethanol(7),2,4,6-辛三烯酸(8);运用MTT法评价了八个次级代谢产物的体外抑制肝癌细胞的活性,结果表明化合物1,2,3,7具有较好体外抑制肝癌细胞的活性,其IC50分别为8.5,12.5,15.0,18.2μg.mL-1。

七叶一枝花内生真菌Penicilliumsp．(No．4)聚酮类次级代谢产物研究

从濒危药用植物七叶一枝花的叶片中分离得到内生真菌Penicillium sp.(NO.4),活性筛选结果显示Penicillium sp.(NO.4)显示出较强的抑制肝癌细胞活性,通过固体发酵,乙酸乙酯萃取得浸膏,其浸膏经硅胶柱层析,Sephadex LH-20,半制备型HPLC等分离手段分离得到八个化合物,经核磁共振,质谱等手段鉴定其结构分别为1,3,14-三甲氧基-6-甲基-9,10-蒽醌(1),bostrycin(2),isorhodoptilometrin(3),physcioin(4),emodin(5),aloesol(6),coniochaetone B(7),2,5-dimethyl-7-hydroxychromone(8),其中化合物1为一新天然产物。体外细胞毒活性显示化合物1,3,14-三甲氧基-6-甲基-9,10-蒽醌(1),bostrycin(2)和isorhodoptilometrin(3)对肝癌细胞有较强的抑制活性,其IC50分别为15.6,6.5,13.2μg/mL,化合物4～8则没有显示生物活性。

昆虫内生真菌Penicillium oxalicum次级代谢产物的研究

研究中华剑角蝗肠道内生真菌Penicillium oxalicum的次级代谢产物.通过溶剂提取法和多种色谱方法分离单体化合物,并利用现代波谱技术和理化性质进行结构鉴定.分离并鉴定了9个化合物,分别为1,10-dihydroxy-8-methyl-dibenz[b,e]oxepin-6,11-dione(1),大黄酚(2),柳胺酚(3),邻乙酰氨基苯甲酸(4),3,5-bis-(4-hydroxyphenyl)-pyridine(5),对羟基苯乙酰胺(6),烟酸(7),环(丙氨酸-异亮氨酸)(8),环(丙氨酸-亮氨酸)(9).所有化合物均为首次从该属菌种中分离得到.

共生真菌巴西类壳小圆孢中环二肽类代谢产物研究

利用正相和反相柱色谱,Sephadex LH-20凝胶柱色谱及反相HPLC等方法从昆虫共生真菌Paraconiothyrium brasiliense的发酵产物中分离得到9个环二肽类化合物,经NMR,MS及理化性质等方法,结构确定为环(L-亮氨酸-L-酪氨酸)(1),环(L-色氨酸-L-脯氨酸)(2),环(L-脯氨酸-L-苯丙氨酸)(3),环(L-脯氨酸-L-酪氨酸)(4),环(L-脯氨酸-L-亮氨酸)(5),环(L-亮氨酸-反式-4-羟基-L-脯氨酸)(6),环(L-异亮氨酸-L-脯氨酸)(7),环(L-缬氨酸-L-脯氨酸)(8),环(L-亮氨酸-L-异亮氨酸)(9)。所有化合物均为首次从该属菌种中分离得到。

开口箭皂苷体外抗肿瘤作用的初步实验研究

目的通过体外细胞培养技术,探讨开口箭皂苷的细胞毒活性及其机制,为进行深层次研究提供依据。方法MTT比色法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡。结果MTT结果显示,开口箭总皂苷、30%皂苷和70%皂苷对Hela和HepG2细胞的抑制作用显著,与阴性对照组相比有非常显著性差异(P<0.005)。开口箭总皂苷、30%皂苷和70%皂苷和环磷酰胺对Hela细胞IC50分别为1 372.92,3 138.51,729.72,3 459.08μg/m l;对HepG2细胞IC50分别为1 221.39,2 657.53,562.70,3 668.51μg/m l。流式细胞仪检测结果显示,开口箭总皂苷、30%总皂苷在浓度为2 500μg/m l时,70%总皂苷和环磷酰胺在浓度为1 250μg/m l时主要将Hela细胞细胞周期阻滞于S期,且能够诱导肿瘤细胞凋亡。结论开口箭皂苷对Hela和HepG2细胞较环磷酰胺具有明显的抑制作用,其中对HepG2细胞株较为敏感,且能将Hela细胞细胞周期阻滞于S期从而诱导Hela细胞凋亡。

湖北海棠抗大蒜病毒活性研究

[目的]探讨湖北海棠抗大蒜病毒的活性。[方法]以湖北海棠提取物浸泡大蒜,用电镜法检测病毒数量。[结果]湖北海棠醇提物具有较强的抗病毒作用。[结论]湖北海棠抗病毒有效成分主要为黄酮类化合物,具有良好的开发应用价值。其中MH-1结构正在鉴定中,MH-2为根皮苷。

红树林内生真菌Paecilomyces sp.(tree1-7)蒽醌类代谢产物研究

红树林内生真菌Paecilomyces sp.(tree1-7)采自红树植物秋茄树皮,在实验室150L规模下静置培养.反复进行硅胶,Sephadex LH-20柱层析.通过1D,2D NMR和EI-MS等手段鉴定5个蒽醌类化合物和2个甾体类代谢产物的结构.通过MTT法测试5个蒽醌类化合物有抑制鼻咽癌细胞(KB,KBv)的活性,结果显示蒽醌类化合物1-5对鼻咽癌细胞有不同程度的抑制活性.