睡菜水提液对小鼠的急性毒性实验研究

目的:观察睡菜水提液对大鼠的急性毒性.方法:预实验:灌胃给予小鼠水提液剂量分别为2455、1841.25、1380.94、1035.70 g/L,观察给药当天及7 d内小鼠的状态,计算半数致死量(50%lethal dose,LD_(50));最大耐受量实验:灌胃给予睡菜最大剂量2455 g/L,观察给药后14 d内小鼠状态和死亡情况,给药14 d后检测小鼠的血液生化指标、计算主要脏器指数以及观察主要脏器病理学变化.结果:未能测出睡菜水提液的半数致死量.最大耐受量实验显示:给药后14 d内小鼠状态良好,无中毒反应或死亡情况.给药组小鼠第3、7、11、14 d体质量增长与空白组比较无统计学差异(P>0.05);给药组小鼠血液生化指标、主要脏器指数与空白组无统计学差异(P>0.05);组织形态学、组织病理学检查未发现睡菜水提液对小鼠主要脏器产生病理改变.结论:睡菜水提液的最大无毒剂量大于2455 g/L,是成人临床用药(15 g)的100.6倍,是安全的用药剂量范围.

内生放线菌Streptomyces californicus XY3-1抗菌活性次级代谢产物研究

从三峡地区濒危植物内生菌中寻找活性次级代谢产物过程中,发现中华蚊母树叶片得到的内生放线菌XY3-1粗提物显示较强抑制植物病原菌活性。以抗菌活性指导分离从Streptomyces californicus XY3-1液体发酵乙酸乙酯提取物中分离鉴定9个化合物,运用核磁共振,质谱及文献对照等方法确定其确定结构,分别为Benzodipyran(1),Okicenone(2),2-(2'-hydroxypropyl)-5-methyl-7-hydroxychromone(3),2-(6-methyl-8-oxo-5,8-dihydronaphthalen-1-yl)-acetic acid(4),3,8-dihydroxy-1-methyl-4a,9a-dihydroanthracene-9,10-dione(5),dibutylphthalate(6),bis(2-ethylhexyl)benzene-1,2-dicaroxylate(7),p-hydroxybenzaldehyde(8),indole-3-aldehyde(9)。以滤纸片法评价化合物1~9的抗菌活性,结果表明化合物1对番茄枯萎病原菌、角斑病原菌、柑橘溃疡病菌、鳗弧病菌均有抑制效果,MIC值分别为62.50μg·mL^(-1)、7.81μg·mL^(-1)、62.50μg·mL^(-1)、7.80μg·mL^(-1);化合物2对角斑病原菌,鳗弧病菌两种病原菌具有抑制作用,MIC值分别为7.80μg·mL^(-1)、3.90μg·mL^(-1);化合物4仅对鳗弧病原菌有抑制作用,MIC值为7.80μg·mL^(-1),其余化合物对四种指示病原菌均无有意义的抗菌活性。

蛇菰内生菌Aspergillus sp. SHG-7代谢产物研究

从药用植物宜昌蛇菰(Balanophora henryi Hesml.)中分离得到一株内生真菌Aspergillus sp.SHG-7,通过固体发酵,乙酸乙酯萃取得浸膏,其浸膏经硅胶柱层析、Sephadex LH-20、半制备型HPLC等分离手段分离得到6个化合物,经核磁共振、质谱等手段鉴定其结构分别为灰黄霉素(1),麦角甾醇(2),麦角甾-7,22-二烯-3,6-二酮(3),麦角甾-7,22-二烯-3,5,6-三醇(4),软脂酸-1-甘油酯(5),肉豆蔻酸(6).化合物1对MCF-7、A549及Hela细胞具有一定的细胞毒活性,IC50分别为18.36±2.32μM、26.58±1.62μM和74.29±1.34μM,化合物2~化合物6对以上肿瘤细胞无明显活性.

益贞颗粒急性毒性实验研究

以益贞颗粒对小鼠灌胃,观察小鼠死亡情况及相关指标的变化情况来评价其安全性.通过半数致死量实验分别以不同浓度的益贞颗粒对小鼠灌胃,观察7d未见小鼠死亡,无法测出半数致死量;进行最大耐受量实验,实验小鼠以益贞颗粒最大混悬浓度和可承受的最大体积1d内灌胃2次,连续观察14d,每天记录小鼠的一般状况、体质量、进食量和饮水量.14d后处死动物,观察并记录脑、心、肝、脾、肺、肾、睾丸/卵巢等主要脏器的病变情况,若肉眼可见病理变化则即刻进行组织病理学检查.结果表明,14d内小鼠活动正常,无1只小鼠死亡.益贞颗粒组实验小鼠的体质量、进食量和饮水量与空白对照比较均无显著性差异(P>0.05);肉眼观察脑、心、肝、脾、肺、肾、睾丸/卵巢等主要脏器未发现有明显异常.实验小鼠灌胃益贞颗粒的量相当于成人临床日用量的93倍,说明益贞颗粒无明显毒性,临床常用量是安全可靠的.

苎麻叶凝胶急性毒性、皮肤刺激性及过敏性实验研究

为了观察苎麻叶凝胶经皮用药的安全性,采用苎麻叶凝胶对新西兰大白兔进行正常和破损皮肤急性毒性实验及皮肤刺激性实验;对豚鼠进行皮肤过敏实验。结果:苎麻叶凝胶均未引起家兔毒性反应;对家兔完整和破损皮肤无刺激作用;对豚鼠皮肤无过敏作用。结果显示,苎麻叶凝胶皮肤给药使用安全。

苎麻叶凝胶皮肤长期毒性实验研究

本文观察苎麻叶凝胶长期连续经皮肤给药对完整皮肤和破损皮肤实验大鼠可能产生的毒性反应,为临床应用提供毒理学依据。利用160只Wistar大鼠,随机分为完整皮肤凝胶基质对照组、完整皮肤苎麻叶凝胶低、中、高剂量组(相当于临床人用量的20、40、80倍),破损皮肤凝胶基质对照组、破损皮肤苎麻叶凝胶低、中、高剂量组(相当于临床人用量的20、40、80倍),每组20只,雌雄各半,每日涂药2次,连续给药4周,观察大鼠的一般状况、体重、摄食量,测定给药4周及停药2周后大鼠的血液生化指标,脏器系数、解剖学及病理组织学改变情况。结果表明,苎麻叶凝胶各组大鼠一般状况良好,体重增长、摄食情况、脏器系数、血常规、血液生化指标、解剖学和主要脏器的病理组织学检查均正常,与凝胶基质对照组比较无明显差异。苎麻叶凝胶在临床剂量范围内毒性小,使用安全。

衰老对小鼠肠黏膜上皮屏障功能影响的实验研究

目的:研究衰老对小鼠肠黏膜上皮屏障结构与功能的影响。方法:雄性SPF级C57BL/6小鼠按发育阶段的不同分为1月龄组、6月龄组、10月龄组、12月龄组。采用HE染色、PAS(高碘酸-Schiff试剂)染色、甲苯胺蓝染色对小肠黏膜形态与结构进行观察测量并统计免疫细胞数量;免疫组织化学染色检测紧密连接蛋白(Occludin)的表达。结果:随着月龄增加,小鼠小肠各段绒毛长度均呈降低趋势,相同月龄不同肠段相比,绒毛长度从十二指肠到空肠、回肠呈递减趋势。十二指肠绒毛宽度呈先增高后降低趋势,空肠和回肠绒毛宽度呈下降趋势。十二指肠隐窝深度随月龄增高呈增高趋势,空肠和回肠的隐窝深度随月龄增长呈先增高后降低趋势。随月龄增长,小鼠十二指肠、空肠、回肠各肠段中上皮内淋巴细胞数和肠壁固有层肥大细胞呈先增高后降低趋势,杯状细胞数呈下降趋势。小肠上皮黏膜组Occludin表达随着月龄升高逐渐减少。结论:衰老过程中,小鼠小肠形态发生了一系列结构性改变,黏膜组织中免疫细胞数量减少,肠黏膜上皮屏障免疫相关功能下降。

JNK信号通路与细胞凋亡关系的研究进展

c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal ki-nase,JNK)信号通路是近20年来发现的与细胞分化、细胞凋亡、应激反应以及多种人类疾病的发生和发展关系非常密切的通路之一,其生物化学功能和对细胞生理、病理情况下的调节作用一直被国内外学者所关注。近年来,研究发现JNK信号通路在调控细胞凋亡中发挥重要作用,通过调节JNK信号通路有望成为治疗细胞凋亡引起的疾病的重要靶点。本文就其生物学功能及其与细胞凋亡关系作一阐述。

化红胶囊治疗围绝经期综合征50例临床研究

目的观察化红胶囊治疗围绝经期综合征的临床疗效。方法将符合围绝经期综合征诊断标准的100名患者,随机分为治疗组(50例)和对照组(50例),治疗组采用化红胶囊治疗,对照组采用戊酸雌二醇片和谷维素治疗,连续用药3个月。疗程结束后观察治疗前后两组患者的临床症状、内分泌变化及安全性指标等情况。结果治疗组总有效率为80%,高于对照组的52%(P<0.05);治疗组的临床证候改善显著优于对照组;而治疗后两组E2均上升,FSH、LH均下降,与本组治疗前比较,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);两组治疗后组间比较,差异无统计学意义(P>0.05),证明两组用药均在改善女性围绝经期激素水平上面起到积极的作用。结论化红胶囊能有效治疗女性围绝经期综合征,明显改善临床症状,并在一定程度上改善血清性激素水平,临床应用安全有效,无明显毒副作用,值得进一步研究和临床推广使用。

水马桑化学成分及其乙酰胆碱酯酶抑制活性研究

目的:研究水马桑乙酸乙酯部位的化学成分及其乙酰胆碱酯酶抑制活性。方法:采用硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱色谱和制备高效液相技术等进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物结构。通过改良的Ellman法测试所有化合物对乙酰胆碱酯酶的抑制活性。结果:从水马桑乙醇提取物的乙酸乙酯部位分离得到6个香豆素类化合物,分别鉴定为:东莨菪内酯(1)、东莨菪苷(2)、秦皮素(3)、秦皮苷(4)、臭矢菜素A(5)、臭矢菜素B(6)。活性测试结果表明化合物6显示乙酰胆碱酯酶抑制活性,半数抑制浓度(IC50)为3.32±0.01 mmol/L。结论:其中,化合物2~6为首次从该属植物中分离得到,且以上所有化合物均为首次从该植物中分离得到,水马桑中香豆素成分有一定的乙酰胆碱酯酶抑制活性。

忍冬木层孔菌液体培养物的化学成分研究

忍冬木层孔菌(Phellinus lonicerinus(Bond.)Bond.et Sing)为湖北等地习用的桑黄品种,也是土家族常用药。对忍冬木层孔菌液体培养物的化学成分及其体外抗肿瘤活性进行研究。通过硅胶柱色谱、SephadexLH-20柱色谱及半制备型HPLC等色谱分离技术从忍冬木层孔菌发酵液及菌丝体中分离得到10个化合物,经核磁共振,质谱等现代波谱学技术将它们的结构分别鉴定为环(L-缬-L-脯)二肽(1)、环(L-亮-L-脯)二肽(2)、环(L-异亮-L-脯)二肽(3)、环(L-丙-L-脯)二肽(4)、麦角甾醇(5)、麦角甾-7,22-二烯-3,6-二酮(6)、过氧麦角甾醇(7)、苯乙酸(8)、对羟基苯甲醛(9)和4-羟基苯乙酸(10)。除化合物5、6和7外,其余7个化合物均为首次从该真菌中分离得到。体外细胞毒活性显示化合物1~4对胃癌细胞株HGC-27和子宫内膜癌细胞株RL95-2有不同程度的抑制活性,其中化合物3抑制活性最强,对HGC-27和RL95-2的IC_(50)分别为6.69μM和12.81μM。

木榄提取物及单体化合物对SH-SY5Y神经细胞抗氧化研究

研究了中国海南红树植物木榄提取物及其单体化合物对SH-SY5Y神经细胞的抗氧化作用.对木榄成分提取分离、结构鉴定后,用H2O2处理人神经瘤母细胞（SH-SY5Y细胞）,建立细胞损伤模型,以MTT法检测木榄提取物及单体化合物的细胞增殖作用与抗氧化活性.结果表明木榄乙醇提取物、石油醚萃取部位、乙酸乙酯萃取部位及部分单体化合物能很好地对抗H2O2诱导的SHSY5Y细胞损伤.单体化合物在低剂量（1.25~5μg·mL-1）时量效关系良好,随着浓度的增加,对SH-SY5Y细胞的抗氧化作用逐渐增强.木榄能能很好地对抗H2O2诱导的SH-SY5Y细胞损伤,对SH-SY5Y细胞具有显著的抗氧化作用,该作用与减少胞内氧自由基有关,其机制有待进一步研究.

人血草质量标准研究

目的:研究药材人血草的显微特征、理化鉴别、水分、总灰分、酸不溶性灰分、醇溶性浸出物,为制定人血草药材的质量标准提供依据。方法:采用2005年版《中国药典》规定方法。结果:人血草显微特征:表皮细胞为多角形,黄绿色,垂周壁呈念珠状增厚。理化鉴别结果:人血草药材醇提取物与生物碱试剂碘化铋钾反应生成桔红色沉淀;与碘-碘化钾试剂反应生成棕红色沉淀;与硅钨酸,反应生成灰白色沉淀。水分测定结果:人血草药材水分的平均含量为7.74%;人血草药材的总灰分平均含量为12.24%,酸不溶性灰分的平均含量为0.49%;人血草药材的醇溶性浸出物平均含量为12.88%。结论:以上人血草药材的显微特征具有显微鉴定的意义;生物碱特征显色反应可作为人血草理化鉴定指标;建议其质量标准分别控制为:水分含量≤10.00%;总灰分含量≤15.00%,酸不溶性灰分含量≤1.00%;乙醇浸提物浓度≥11.00%。

海棠凝胶家兔单次皮肤给药毒性实验

通过家兔皮肤急性毒性实验,初步评价海棠凝胶对动物完整皮肤及破损皮肤所产生的毒性反应,为后续毒性试验和临床试验提供参考信息.采用最大给药量法,家兔16只,分为4组,即海棠凝胶完整皮肤组及破损皮肤组、赋形剂完整皮肤组及破损皮肤组,每组4只(♀、♂各半),给药前24h用电推剪推去背部两侧毛(约150cm2),破损皮肤制作:在脱毛区用9号针头划"#"字状,以划破表皮渗血为度,给药量均为2g/kg凝胶,给药组主药剂量为0.05g/kg,将供试品和赋形剂涂于脱毛区,用一层称样纸覆盖及兔固定衣固定,并用兔脖套将兔固定,24h后用生理盐水洗去受试物及赋形剂,仔细观察和记录动物出现的毒性反应情况,连续观察14d,并记录体重和进食量情况.结果表明:海棠凝胶完整皮肤组及破损皮肤组无动物死亡,动物体重、进食量与赋形剂组比较无显著性差异(P>0.05),呼吸、自主活动等均未见中毒反应,动物处死后经对各组家兔系统剖检,对皮肤给药部位及其它组织脏器进行观察,未见明显病理性改变.结论:海棠凝胶单次皮肤给药2g/kg凝胶(主药剂量为0.05g/kg),家兔未见明显毒性反应.

金银花提取物体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒研究

通过观察金银花提取物对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染的Marc-145细胞的保护效果、对病毒感染滴度(TCID50)的影响及对ORF7mRNA表达的影响来评价其体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的活性。结果表明,金银花提取物大孔树脂600mL/L的乙醇/水洗脱部位对PRRSV感染细胞具有较好的保护效果,最小保护浓度为6.25μg/mL。6.25μg/mL 600mL/L的乙醇/水洗脱部位使PRRSV病毒滴度从105.8 TCID50降低至100.3 TCID50左右,使PRRSV ORF7mRNA含量降低1 000多倍。因此,金银花提取物大孔树脂600mL/L的乙醇/水洗脱部位具有良好的体外抗PRRSV活性。

海洋微生物源生物农药研究进展

综述了海洋微生物源生物农药的最新现状,系统总结了海洋微生物源生物农药种类,展望了海洋微生物源生物农药的应用前景。

松针层孔菌的质量标准研究

目的:控制松针层孔菌Phellinus pini药材质量,制订药材质量标准,为其进一步开发利用提供依据.方法:采用性状、显微、薄层鉴别药材;按照2015年版中国药典四部通则方法测定水分、总灰分、酸不溶性灰分及浸出物含量,以Hispolon作对照品,TLC法定性鉴别,HPLC法进行含量测定,紫外-可见分光光度法测定总酚含量.结果:松针层孔菌不同部位性状、显微特征及薄层色谱区别明显,能较好地和同属其他真菌相区分;Hispolon的平均含量为0.0160%,拟定Hispolon的含量不得低于0.01%;总酚的平均含量为0.238%,拟定总酚的含量不得低于0.20%;水分不得过13.0%;总灰分不得过2.0%;酸不溶性灰分不得过1.0%;水溶性浸出物不得低于2.0%;醇溶性浸出物不得低于4.0%.结论:建立的松针层孔菌药材的质量标准可全面、有效地控制药材质量,为临床合理、有效、安全用药提供参考.

树形金银花生长特性及水土保持功效研究

本文旨在研究树形金银花生长特性及水土保持功效。选定南方丘岗区,研究5年生金银花一个生长周期的形态变化,以及种植3年、5年和7年金银花后,不同土壤深度土壤水分、氮、磷和有机质等土壤理化性状的变化。通过对土壤理化性质的分析,发现树形金银花具有涵养水分,增加土壤肥力,保持水土的良好功效。

离舌橐吾根部的抗肿瘤活性成分研究

综合运用硅胶柱、TLC和制备HPLC等多种色谱技术,从离舌橐吾Ligularia veitchiana(Hemsl.)Greenm根部分离得到了7个单体化合物,并根据理化性质和波谱数据鉴定其结构分别为:bakkenolide A(1),phthalic acid isodibutyl ester(2),dibutyl phthalate(3),eremophila-7(11),9-dien-8-one(4),6β,8β-hydroxyeremophil-7(11)-en-12,8α-olide(5),6β-hydroxyeremophil-7(11)-en-12,8β-olide(6)和6β-Hydroxyeremophil-7(11)-en-12,8α-olide(7).其中,化合物1、2、4和7为首次从该植物中分离得到.化合物1为首个从离舌橐吾中分离得到的具有螺环骨架的倍半萜类化合物.化合物6与化合物7为一对非对映异构体.采用MTT法对所有化合物针对人胃癌细胞株(HGC-27)的体外抗肿瘤细胞抑制活性进行评价.结果表明化合物1对人胃癌细胞(HGC-27)具有显著的细胞毒抑制活性,其IC50为31.10μg·mL^-1.

依布硒啉对多重耐药金黄色葡萄球菌的杀伤效果研究

目的:研究抗卒中老药依布硒啉(Ebselen)对临床分离多重耐药性金黄色葡萄球菌的杀伤效果,并探究其作用靶点。方法:收集我院多重耐药金黄色葡萄球菌共计108株,通过微孔及涂布法观察Ebselen对金黄色葡萄球菌的杀菌效力;通过5,5’-二硫代双(2-硝基苯甲酸)(DTNB)实验检测Ebselen对金黄色葡萄球菌硫氧还蛋白还原酶(TrxR)活性的影响。结果:Ebselen可高效杀伤分离得到的108株多重耐药金黄色葡萄球菌,最小抑菌浓度(MIC)5~40μM;且Ebselen作用后的细菌TrxR活性降低至8.3%~51.9%(对照组为100%)。结论:Ebselen可通过降低TrxR的活性,实现对多重耐药性金黄色葡萄球菌的高效杀伤。