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利用中华蜜蜂工蜂幼虫肠道转录组纳米孔长读段数据完善东方蜜蜂参考基因组序列和功能注释
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作者 李坤泽 宋宇轩 +7 位作者 臧贺 荆欣 范小雪 陈颖 那志豪 陈大福 付中民 郭睿 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期346-357,共12页
【目的】将已获得的中华蜜蜂Apis cerana cerana转录组纳米孔长读段数据比对到东方蜜蜂A.cerana参考基因组,进行注释基因的结构优化,鉴定未注释的新基因和新转录本并进行功能注释以及预测其SSR位点、完整ORF和转录因子(transcription fa... 【目的】将已获得的中华蜜蜂Apis cerana cerana转录组纳米孔长读段数据比对到东方蜜蜂A.cerana参考基因组,进行注释基因的结构优化,鉴定未注释的新基因和新转录本并进行功能注释以及预测其SSR位点、完整ORF和转录因子(transcription factor,TF)家族及成员的分析验证,完善现有的东方蜜蜂参考基因组序列和功能注释。【方法】基于已获得的高质量的接种蜜蜂球囊菌Ascosphaera apis的中华蜜蜂工蜂4,5和6日龄幼虫肠道转录组纳米孔测序数据,使用gffcompare软件将已鉴定到的全长转录本比对到东方蜜蜂参考基因组以优化已注释基因的结构;采用gffcompare软件鉴定参考基因组上未注释的新基因和新转录本,再通过比对Nr,KOG,eggNOG,GO和KEGG数据库进行功能注释;使用MISA,TransDecoder v3.0.0和animalTFDB 2.0软件分别预测SSR位点、完整ORF和TF家族及成员。【结果】共对东方蜜蜂参考基因组上已注释的4648个基因结构进行了优化,对1336个基因同时延长了5′UTR和3′UTR,分别延长了1688个基因的5′UTR和1624个基因的3′UTR;共鉴定到2148个新基因,其中分别有818,298,587,359和333个新基因可注释到Nr,KOG,eggNOG,GO和KEGG数据库;共鉴定到35432条新转录本,其中分别有30974,21222,29025,19852和9214条新转录本可注释到上述5个数据库;共发掘出22541个SSR位点,其中单、双、三和六碱基重复的SSR数量分别为12078,7140,2825和43个,混合SSR的数量为2964个,分布频率最高的类型是单碱基重复(153.37个/Mb);共预测到58个TF家族及1611个成员;共预测出28775个完整ORF,其中编码长度分布在100~200个氨基酸的ORF(38.99%)最多。【结论】研究结果优化了东方蜜蜂参考基因组上已注释基因的结构,并补充了参考基因组上未注释的新基因、新转录本、SSR、完整ORF及TF。 展开更多
关键词 东方蜜蜂 中华蜜蜂 第三代测序技术 纳米孔测序 全长转录本 转录组 基因组
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西方蜜蜂AmAGO1蛋白的分子特性、时空表达谱及抗体制备
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作者 叶亚萍 刘治滩 +7 位作者 李琪明 臧贺 冯佩林 王宁 王杰 黄枳腱 陈大福 郭睿 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期18-28,共11页
【目的】Argonaute(AGO)家族是一类在进化上高度保守的蛋白家族,其在真核生物中主要参与形成RNA诱导沉默复合体(RNA-induced silencing complex,RISC),进而通过沉默基因表达参与诸多生物学过程。蜜蜂AGO蛋白的相关研究迄今仍然缺失。本... 【目的】Argonaute(AGO)家族是一类在进化上高度保守的蛋白家族,其在真核生物中主要参与形成RNA诱导沉默复合体(RNA-induced silencing complex,RISC),进而通过沉默基因表达参与诸多生物学过程。蜜蜂AGO蛋白的相关研究迄今仍然缺失。本研究拟通过预测西方蜜蜂Apis mellifera的AGO1(AmAGO1)理化性质和分子特性,解析AmAGO1在西方蜜蜂中的时空表达谱,并制备AmAGO1的多克隆抗体,为深入开展AmAGO1的功能与机制研究提供参考和基础。【方法】PCR扩增西方蜜蜂AmAGO1的编码序列(coding sequence,CDS);通过生物信息学预测AmAGO1蛋白的理化性质和分子特性;利用RT-qPCR检测AmAGO1在西方蜜蜂工蜂卵、3日龄幼虫、7日龄预蛹、8日龄预蛹、12日龄蛹以及1,2,6,12,15和18日龄成虫以及工蜂成虫触角、咽下腺、脑、表皮、中肠、脂肪体和毒腺中的表达量;构建原核表达质粒后诱导表达AmAGO1融合蛋白,并鉴定其表达形式;制备AmAGO1多克隆抗体,利用ELISA,Western blot和免疫沉淀(immunoprecipitation,IP)分别检测抗体效价、灵敏度和特异性。【结果】成功克隆到西方蜜蜂AmAGO1的CDS;AmAGO1含928个氨基酸,分子式为C4624H7332N1316O1325S51,分子量约为104.2 kD,等电点为9.31,平均亲水系数为-0.2965,含86个磷酸化位点及典型的PAZ结构域和PIWI结构域,但不存在典型的信号肽;AGO1在智人Homo sapiens、斑马鱼Danio rerio、黑腹果蝇Drosophila melanogaster、家蚕Bombyx mori、西方蜜蜂、东方蜜蜂A.cerana和欧洲熊蜂Bombus terrestris中具有较高的氨基酸序列一致性;西方蜜蜂和东方蜜蜂的AGO1聚为一支,同源性最高。AmAGO1在西方蜜蜂工蜂卵、幼虫、预蛹、蛹和成虫中均有表达但表达量存在差异,3日龄幼虫和7日龄预蛹中AmAGO1的表达量显著低于卵中的表达量,而8日龄预蛹和12日龄蛹中AmAGO1的表达量显著高于卵中的表达量;AmAGO1在1,2,6,12,15和18日龄工蜂体内均有表达但表达量也存在差异,其中1日龄成虫体内AmAGO1的表达量显著高于其他日龄成虫体内的表达量;AmAGO1在工蜂成虫触角、毒腺、脑、中肠、咽下腺、脂肪体和表皮中均有表达但表达量存在差异,触角中AmAGO1的表达量与咽下腺中的相差无几,但二者均显著高于毒腺、脑、中肠、脂肪体和表皮中AmAGO1的表达量;AmAGO1融合蛋白的表达形式为包涵体;制备的AmAGO1多克隆抗体具有较高的效价、灵敏度和特异性。【结论】AmAGO1可能是亲水性胞内蛋白,含有典型的PAZ结构域和PIWI结构域;AmAGO1在西方蜜蜂工蜂不同组织和不同发育阶段发挥潜在的重要功能;成功制备出高效价、高灵敏度和强特异性的AGO1多克隆抗体。 展开更多
关键词 西方蜜蜂 AmAGO1 克隆 分子特性 时空表达谱 原核表达 多克隆抗体
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中华蜜蜂工蜂幼虫肠道全长转录组构建与注释
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作者 宋宇轩 李坤泽 +6 位作者 臧贺 荆欣 范小雪 邹培缘 陈大福 付中民 郭睿 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期183-192,共10页
【目的】通过纳米孔(nanopore)测序技术组装和注释中华蜜蜂Apis cerana cerana工蜂幼虫肠道高质量全长转录组。【方法】采用Nanopore PromethION系统对蜜蜂球囊菌Ascosphaera apis接种的中华蜜蜂工蜂3日龄幼虫后的4, 5和6日龄幼虫肠道(... 【目的】通过纳米孔(nanopore)测序技术组装和注释中华蜜蜂Apis cerana cerana工蜂幼虫肠道高质量全长转录组。【方法】采用Nanopore PromethION系统对蜜蜂球囊菌Ascosphaera apis接种的中华蜜蜂工蜂3日龄幼虫后的4, 5和6日龄幼虫肠道(分别为AcT4, AcT5和AcT6)进行转录组测序,鉴定全长转录本序列;将前期未接种蜜蜂球囊菌中华蜜蜂工蜂4, 5和6日龄幼虫肠道转录组纳米孔测序数据中鉴定到的全长转录本与上述鉴定到的全长转录本混合后滤除冗余全长转录本;将鉴定到的非冗余全长转录本比对Nr, KOG, eggNOG和GO数据库进行注释。采用CPC, CNCI, CPAT和Pfam 4种方法预测长链非编码RNA (long non-coding RNA, lncRNA)。【结果】AcT4, AcT5和AcT6分别测得14 474 634, 10 461 827和11 890 978条原始读段(raw reads),分别包含11 898 582, 8 630 186和9 091 035条全长转录本,去冗余后分别鉴定到27 815, 21 781和20 004条非冗余全长转录本,N50长度分别为1 900, 1 961和2 294 bp,平均长度分别为1 534, 1 584和1 792 bp,最长读段长度分别为10 855, 10 837和10 887 bp。鉴定到40 562条去非冗余全长转录本,分别有35 415, 24 646, 34 054和23 053条转录本可分别注释到Nr, KOG, eggNOG和GO数据库。在Nr数据库中注释全长转录本数目和占比最高的物种是东方蜜蜂A.cerana(20 310条,57.35%),其次为西方蜜蜂A.mellifera(4 686条转录本,占13.23%)、大蜜蜂A.dorsata(2 536条转录本,占7.16%)和小蜜蜂A.florea(2 079条转录本,占5.87%)。非冗余全长转录本可注释到eggNOG数据库中的未知功能及翻译后修饰、蛋白质更新和分子伴侣等25个功能分类、KOG数据库中的仅一般功能预测和信号转导机制等25个功能分类、GO数据库中生物学进程、细胞组分和分子功能三大类中的50个功能条目以及KEGG数据库中核糖体和RNA转运等196条通路。共鉴定到2 301条高可信度lncRNA,涉及正义链lncRNA、反义链lncRNA、内含子lncRNA和基因间区lncRNA 4种类型。【结论】成功构建和注释了中华蜜蜂工蜂幼虫肠道的首个全长转录组,为中华蜜蜂和东方蜜蜂A.cerana其他亚种的分子生物学及组学研究提供了高质量参考背景和关键基础。 展开更多
关键词 东方蜜蜂 中华蜜蜂 蜜蜂球囊菌 肠道 全长转录组 长链非编码RNA 第三代测序技术 纳米孔测序
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中华蜜蜂酚氧化酶和丝氨酸蛋白酶相关基因及其全长转录本发掘与分析
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作者 赵浩东 王思懿 +6 位作者 李琪明 张天泽 张艺琼 高旭泽 陈大福 郭睿 付中民 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 2024年第1期82-87,共6页
为深入开展中华蜜蜂相关研究提供参考信息和基础,利用已获得的纳米孔(Nanopore)测序数据对中华蜜蜂Apis cerana cerana的酚氧化酶(phenoloxidase,PO)和丝氨酸蛋白酶(serine protease,SP)相关基因和全长转录本进行发掘和分析。通过Blast... 为深入开展中华蜜蜂相关研究提供参考信息和基础,利用已获得的纳米孔(Nanopore)测序数据对中华蜜蜂Apis cerana cerana的酚氧化酶(phenoloxidase,PO)和丝氨酸蛋白酶(serine protease,SP)相关基因和全长转录本进行发掘和分析。通过Blast工具将中华蜜蜂所有全长转录本比对KEGG和Nr数据库以筛选出PO和SP相关基因和全长转录本。采用gffcompare软件将PO和SP相关全长转录本与东方蜜蜂参考基因组(ACSNU-2.0)已注释基因进行比较以优化结构。使用Astalavista软件鉴定PO和SP相关基因的可变剪接(alternative splicing,AS)事件,再利用IGV浏览器进行结构可视化。通过PCR验证AS事件的真实性。利用TAPIS pipeline预测和分析可变多聚腺苷酸化(alternative polyadenylation,APA)位点,并通过TBtool软件鉴定APA位点上游的基序(motif)。鉴定到中华蜜蜂PO和SP相关的42个基因与146条转录本。优化了16个参考基因组已注释PO和SP相关基因的结构,其中5′端延长和3′端延长的基因均有7个,5′端和3′端同时延长的基因有2个。鉴定到PO和SP相关的10个基因的389次AS事件,其中最丰富的AS类型是5′端可变剪接。PCR结果证实了2次AS事件的真实性。共鉴定到34个PO和SP相关基因含有1个及以上的APA位点,其中含有3个APA位点的基因数量最多;在APA位点上游鉴定到多个motif,一致性序列为:GGHKSYWSHHTRATWTCNBHDMRRYWYRTNYTVACNGCKGCDCAYTGYR。鉴定到中华蜜蜂PO和SP相关的42个基因和146条全长转录本,优化了东方蜜蜂参考基因组已注释的PO和SP相关基因结构,并发掘出PO和SP相关基因的389次AS事件和237个APA位点。 展开更多
关键词 中华蜜蜂 酚氧化酶 丝氨酸蛋白酶 纳米孔测序 全长转录本 可变剪切 可变多聚腺苷酸化
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东方蜜蜂微孢子虫RRDRP的分子特性及系统进化分析
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作者 张凯遥 冯佩林 +6 位作者 宓诗雨 郭思佳 张艺琼 荆欣 陈大福 郭睿 付中民 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期371-376,共6页
【目的】通过对东方蜜蜂微孢子虫和其他物种的Rad18-like重组与DNA修复蛋白(Rad18-like recombination and DNA repair protein,RRDRP)进行系统进化分析,为进一步研究其功能提供理论依据。【方法】利用Protparam、ProtScale和SWISS-mode... 【目的】通过对东方蜜蜂微孢子虫和其他物种的Rad18-like重组与DNA修复蛋白(Rad18-like recombination and DNA repair protein,RRDRP)进行系统进化分析,为进一步研究其功能提供理论依据。【方法】利用Protparam、ProtScale和SWISS-model等软件分析RRDRP的理化性质、亲水性和三级结构。利用SignalP 4.1 Server、NetPhos 3.1 Server、TMHMM和SOPMA等软件预测RRDRP的信号肽、磷酸化位点、跨膜结构域及二级结构。使用PSORTⅡ软件预测RRDRP蛋白的亚细胞定位。使用MEME软件预测东方蜜蜂微孢子虫和其他物种RRDRP的保守基序。通过Mega 11.0软件对东方蜜蜂微孢子虫和其他物种的RRDRP进行氨基酸序列多重比对,并采用邻接法构建系统进化树。【结果】东方蜜蜂微孢子虫RRDRP基因含有2928个核苷酸,可编码975个氨基酸,分子质量约11.50 ku,脂溶系数93.58,等电点6.63,分子式C_(5135)H_(8253)N_(1377)O_(1545)S_(34),平均亲水系数为-0.627,可同时定位于细胞核、细胞质、过氧化物酶体和细胞骨架;RRDRP包含55个磷酸化位点、678个α-螺旋、99条延长链、22个β-转角及176个无规则卷曲;RRDRP不含信号肽与跨膜结构域。东方蜜蜂微孢子虫、兔脑炎微孢子虫、颗粒病微粒子虫等11个物种的RRDRP中均含有5个相同的保守基序(Motif 1、Motif 2、Motif 3、Motif 4和Motif 5)。东方蜜蜂微孢子虫与颗粒病微粒子虫在进化树上聚为一支,同源性较高。【结论】东方蜜蜂微孢子虫RRDRP是潜在的亲水性蛋白和胞内蛋白,在东方蜜蜂微孢子虫以及其他微孢子虫和真菌中高度保守。【目的】通过对东方蜜蜂微孢子虫和其他物种的Rad18-like重组与DNA修复蛋白(Rad18-like recombination and DNA repair protein, RRDRP)进行系统进化分析,为进一步研究其功能提供理论依据。【方法】利用Protparam、ProtScale和SWISS-model等软件分析RRDRP的理化性质、亲水性和三级结构。利用SignalP 4.1 Server、NetPhos 3.1 Server、TMHMM和SOPMA等软件预测RRDRP的信号肽、磷酸化位点、跨膜结构域及二级结构。使用PSORT Ⅱ软件预测RRDRP蛋白的亚细胞定位。使用MEME软件预测东方蜜蜂微孢子虫和其他物种RRDRP的保守基序。通过Mega 11.0软件对东方蜜蜂微孢子虫和其他物种的RRDRP进行氨基酸序列多重比对,并采用邻接法构建系统进化树。【结果】东方蜜蜂微孢子虫RRDRP基因含有2 928个核苷酸,可编码975个氨基酸,分子质量约11.50 ku,脂溶系数93.58,等电点6.63,分子式C5135H8253N1377O1545S34,平均亲水系数为-0.627,可同时定位于细胞核、细胞质、过氧化物酶体和细胞骨架;RRDRP包含55个磷酸化位点、678个α-螺旋、99条延长链、22个β-转角及176个无规则卷曲;RRDRP不含信号肽与跨膜结构域。东方蜜蜂微孢子虫、兔脑炎微孢子虫、颗粒病微粒子虫等11个物种的RRDRP中均含有5个相同的保守基序(Motif 1、Motif 2、Motif 3、Motif 4和Motif 5)。东方蜜蜂微孢子虫与颗粒病微粒子虫在进化树上聚为一支,同源性较高。【结论】东方蜜蜂微孢子虫RRDRP是潜在的亲水性蛋白和胞内蛋白,在东方蜜蜂微孢子虫以及其他微孢子虫和真菌中高度保守。 展开更多
关键词 东方蜜蜂微孢子虫 染色体结构维持蛋白 Rad18-like重组和DNA修复蛋白 分子特性 系统进化
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东方蜜蜂微孢子虫侵染过程中nce-miR-15338及候选靶基因的表达谱
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作者 王思懿 高旭泽 +7 位作者 赵浩东 荆欣 刘小玉 冯佩林 宋宇轩 刘彩珍 陈大福 郭睿 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期89-95,共7页
【目的】本研究旨在为探究nce-miR-15338调控东方蜜蜂微孢子虫(Nosema ceranae)侵染意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica)工蜂的功能及作用机制提供参考和依据。【方法】采用Stem-loop RT-PCR和Sanger测序验证nce-miR-15338的存在和表... 【目的】本研究旨在为探究nce-miR-15338调控东方蜜蜂微孢子虫(Nosema ceranae)侵染意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica)工蜂的功能及作用机制提供参考和依据。【方法】采用Stem-loop RT-PCR和Sanger测序验证nce-miR-15338的存在和表达。利用相关软件预测nce-miR-15338的靶基因并进行数据库注释。通过RT-qPCR检测nce-miR-15338及其候选靶基因在东方蜜蜂微孢子虫侵染过程中的表达谱。【结果】nce-miR-15338在东方蜜蜂微孢子虫孢子中真实存在和表达;nce-miR-15338共靶向LCFAL 2和20s PS等16个基因;分别有16、7、8、3个靶基因可注释到Nr、Swiss-Prot、GO和KEGG数据库;相较于接种后1 d,nce-miR-15338的表达量在2 d极显著上调,在4、6、8 d均极显著下调;LCFAL 2的表达量在接种2、4、6、8 d后皆为极显著下调;20s PS在接种2、4、6、8 d的表达水平均为极显著下调。【结论】研究结果证实了nce-miR-15338的真实存在和表达,并明确了东方蜜蜂微孢子虫侵染意大利蜜蜂工蜂过程中nce-miR-15338及其候选靶基因LCFAL 2和20s PS的表达规律。 展开更多
关键词 东方蜜蜂微孢子虫 蜜蜂 意大利蜜蜂 nce-miR-15338 靶基因 表达谱
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虚拟仿真实验在蜂学教学方面的实践 被引量:1
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作者 杨文超 《蜜蜂杂志》 2020年第12期12-13,共2页
虚拟仿真实验作为一种全新的实验课教学形式,解决了现实实验条件不具备或实际运行困难而无法开展实验的难题。结合疫情期间虚拟仿真实验在蜂学教学方面的应用情况,对虚拟仿真实验的优缺点进行了分析和总结,以期为虚拟仿真实验更好地服... 虚拟仿真实验作为一种全新的实验课教学形式,解决了现实实验条件不具备或实际运行困难而无法开展实验的难题。结合疫情期间虚拟仿真实验在蜂学教学方面的应用情况,对虚拟仿真实验的优缺点进行了分析和总结,以期为虚拟仿真实验更好地服务蜂学教学提供借鉴。 展开更多
关键词 蜂学 虚拟仿真 教学实践
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蜂毒制剂“神蜂精”对佐剂性关节炎大鼠血管表皮生长因子及其受体的影响 被引量:3
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作者 程林兵 龚雁 +1 位作者 王金胜 缪晓青 《中国蜂业》 2015年第8期47-50,共4页
目的:探讨"神蜂精"对佐剂性关节炎大鼠的治疗的可能机制。方法:60只SD雄性大鼠进行随机性分组,分为正常组、模型组、"神蜂精"高剂量组(1.0m L/kg/d)、"神蜂精"中剂量组(0.5m L/kg/d)、"神蜂精"... 目的:探讨"神蜂精"对佐剂性关节炎大鼠的治疗的可能机制。方法:60只SD雄性大鼠进行随机性分组,分为正常组、模型组、"神蜂精"高剂量组(1.0m L/kg/d)、"神蜂精"中剂量组(0.5m L/kg/d)、"神蜂精"低剂量组(0.25m L/kg/d)、阳性组(复方醋酸地塞米松乳膏给药组,1.0g/kg/d),每组10只。除正常组外,其余组大鼠右后足跖皮下注射完全弗氏佐剂诱导产生佐剂性关节炎(AA)。造模14 d后连续给药28 d。测量注射足足肿胀体积,采用酶联免疫吸附法(ELISA法)测定大鼠血清中血管表皮生长因子(VEGF)、血管表皮生长因子受体-1(VEGFR-1)及血管表皮生长因子受体-2(VEGFR-2)的含量。结果:(1)与模型组相比,"神蜂精"治疗组均能显著降低大鼠注射足足爪肿胀度(p<0.01);(2)与模型组相比,"神蜂精"高剂量组、中剂量组大鼠血清中VEGF和VEGFR-1含量,极显著降低(p<0.01,p<0.05);(3)各组大鼠血清中VEGFR-2的含量无统计学差异(p>0.05)。结论:"神蜂精"明显的抑制佐剂性关节炎大鼠足部炎症,降低血清VEGF及VEGFR-1的表达,从而减轻关节病理性血管新生。 展开更多
关键词 “神蜂精” 佐剂性关节炎 类风湿关节炎 VEGF VEGFR-1 VEGFR-2
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蜂胶提取物对顺铂诱导大鼠肝、肾损伤的保护作用 被引量:6
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作者 黄海波 沈圳煌 +5 位作者 耿倩倩 史培颖 吴珍红 孙燕如 韩鸣凤 缪晓青 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第15期159-164,共6页
目的:探究蜂胶乙醇提取物对顺铂所致肝、肾损伤的干预作用。方法:采用不同剂量(50、100、150 mg/kg mb)的蜂胶乙醇提取物对大鼠进行灌胃,连续7 d给药后单次腹腔注射10 mg/kg mb的顺铂建立肝、肾损伤模型,之后再灌胃5 d。实验结束后通过... 目的:探究蜂胶乙醇提取物对顺铂所致肝、肾损伤的干预作用。方法:采用不同剂量(50、100、150 mg/kg mb)的蜂胶乙醇提取物对大鼠进行灌胃,连续7 d给药后单次腹腔注射10 mg/kg mb的顺铂建立肝、肾损伤模型,之后再灌胃5 d。实验结束后通过测定血清中肝、肾损伤的标志物,肝、肾组织中脂质过氧化物、抗氧化物的含量以及观察肝、肾组织病理学的改变来探究蜂胶对顺铂毒性的干预作用。结果:与模型组相比,高剂量组大鼠血清中谷草转氨酶、谷丙转氨酶的活力,尿素氮、肌酐含量均有降低;肝、肾组织中超氧化物歧化酶、过氧化氢酶的活力,还原型谷胱甘肽的含量均有升高;丙二醛、诱导型一氧化氮合酶含量均有降低;从组织病理学方面来看,模型组的肝、肾组织都出现了病变,表现为肝小叶细胞坏死,肾小球细胞脱落、空泡性等,蜂胶给药组这些病变情况均有不同程度的降低。结论:蜂胶乙醇提取物可以降低体内的氧化应激程度,提高机体自身抗氧化能力,从而很好地降低顺铂造成的肝、肾损伤。 展开更多
关键词 蜂胶 顺铂毒性 肝损伤 肾损伤 氧化应激
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蜂胶与β-环糊精复合物在西番莲果汁饮料中的应用研究 被引量:2
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作者 杜天雨 耿倩倩 +5 位作者 陈立府 李玉洁 梁孟达 史培颖 缪晓青 吴珍红 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2019年第20期143-148,共6页
为改善蜂胶的水溶性,将其添加到西番莲果汁饮料中,研制一款功能性西番莲果汁饮料。将β-环糊精(β-cyclodextrin,β-CD)与蜂胶乙醇提取物(ethanol extract of propolis,EEP)制成复合物(compound of ethanol extract of propolis and bet... 为改善蜂胶的水溶性,将其添加到西番莲果汁饮料中,研制一款功能性西番莲果汁饮料。将β-环糊精(β-cyclodextrin,β-CD)与蜂胶乙醇提取物(ethanol extract of propolis,EEP)制成复合物(compound of ethanol extract of propolis and beta cyclodextrin,EEP-βCD),测定EEP-βCD的水溶性和热稳定性,并对西番莲果汁饮料的工艺参数进行优化。结果表明:EEP与β-CD复合后,水溶性和热稳定性都显著提高(P<0.01);西番莲果汁饮料的最佳工艺参数为:西番莲果汁15%,木糖醇12%,EEP-βCD 0.6%。蜂胶与β-环糊精复合后水溶性、热稳定性和刺激性味道都得到改善,可将其应用于西番莲果汁饮料。 展开更多
关键词 蜂胶 Β-环糊精 西番莲 水溶性 热稳定性
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蜂胶复方产品对心肌肥厚改善机制的转录组学研究 被引量:1
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作者 孙燕如 韩鸣凤 +2 位作者 沈圳煌 吴珍红 缪晓青 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2018年第1期17-22,共6页
为了利用转录组学研究蜂胶复方产品改善心肌肥厚的机制,以自发性高血压大鼠(SHR)为研究对象,连续给药35d后剖取心脏、测定左心室指数,对药效最佳组和模型组的心肌进行转录组测序,筛选出差异基因(DGEs),并进行GO富集和KEGG代谢通路分析... 为了利用转录组学研究蜂胶复方产品改善心肌肥厚的机制,以自发性高血压大鼠(SHR)为研究对象,连续给药35d后剖取心脏、测定左心室指数,对药效最佳组和模型组的心肌进行转录组测序,筛选出差异基因(DGEs),并进行GO富集和KEGG代谢通路分析。结果表明:蜂胶复方产品组与模型对照组有1 297个DEGs(91个DEGs上调、1 206个DEGs下调)。KEGG代谢通路结果显示,有410个DEGs可富集到182个代谢通路中,DEGs富集较多的前3个通路与胰岛素信号转导密切相关,分别是PI3K-Akt信号通路、胰岛素信号通路、MAPK信号通路,提示该蜂胶复方产品通过调控与胰岛素信号转导相关的信号通路从而改善SHR的心肌肥厚。 展开更多
关键词 蜂产品 自发性高血压大鼠 心肌肥厚 RNA-SEQ 胰岛素信号通路
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蜂胶对烟曲霉抑菌机制的体外研究 被引量:5
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作者 沈菲 陈艺杰 +2 位作者 徐晓兰 缪晓青 吴珍红 《中国蜂业》 2016年第4期12-16,19,共6页
探讨蜂胶对烟曲霉的抗茵作用及其作用机制,为蜂胶临床治疗由烟曲霉引起的疾病提供参考依据。本文采用不同浓度(10、20、30、40、50、100、150、200 mg/m1)的蜂胶乙醇提取物(EEP)处理烟曲霉孢子,结果发现,其存在剂量依赖性,接着琼脂稀释... 探讨蜂胶对烟曲霉的抗茵作用及其作用机制,为蜂胶临床治疗由烟曲霉引起的疾病提供参考依据。本文采用不同浓度(10、20、30、40、50、100、150、200 mg/m1)的蜂胶乙醇提取物(EEP)处理烟曲霉孢子,结果发现,其存在剂量依赖性,接着琼脂稀释法测定蜂胶的最小抑茵浓度(MIC),将烟曲霉与1/2MIC_(50)EEP孵育3d后发现,蜂胶组烟曲霉菌丝的重量和呼吸速率显著低于对照组,且蜂胶组孢子的超微结构严重受损。通过半定量PCR分析磷脂腺肌醇信号通路相关的表达情况,发现蜂胶组pKC基因与对照组相比呈现下调趋势。这些结果暗示,蜂胶能够抑制烟曲霉的生长,具有治疗由烟曲霉引起的疾病的潜力,是一种有前途的生物活性化合物。 展开更多
关键词 蜂胶 烟曲霉 体外研究 PKC 作用机制
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中华蜜蜂Takeout(AcTO1)基因的克隆和表达分析 被引量:3
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作者 陈艺杰 解幸承 +3 位作者 吴双 吴珍红 李显春 缪晓青 《中国蜂业》 2017年第7期16-20,共5页
Takeou(tTO)是一种昆虫节律性调控输出基因,广泛分布于涉及到化学感受和营养功能的相关组织。TO基因主要参与昆虫的生长发育、行为调节及多种生理代谢过程。为探究TO基因是否参与社会性昆虫的劳动分工,我们克隆并分析了中华蜜蜂Apiscera... Takeou(tTO)是一种昆虫节律性调控输出基因,广泛分布于涉及到化学感受和营养功能的相关组织。TO基因主要参与昆虫的生长发育、行为调节及多种生理代谢过程。为探究TO基因是否参与社会性昆虫的劳动分工,我们克隆并分析了中华蜜蜂ApisceranaTO基因的编码框序列,测定了该基因在哺育蜂和采集蜂各个组织部位的mRNA表达水平,旨在为深入研究该基因的功能提供参考。本研究通过RT-PCR的方法首次克隆获得AcTO1基因的cDNA序列,利用生物信息学软件分析了该基因的核苷酸序列和氨基酸序列,并利用荧光定量PCR(qPCR)技术检测了该基因在中华蜜蜂3种采集蜂(18日龄正常采集蜂、22日龄正常采集蜂和7日龄提前采集蜂)和2种哺育蜂(7日龄正常哺育蜂和22日龄超龄哺育蜂)头部、胸部和腹部的表达量。本研究克隆获得的中华蜜蜂TO(命名为AcTO1)基因的cDNA序列长度为1058bp,开放阅读框(ORF)长度为738bp,编码246个氨基酸,预测蛋白分子量为27.09kDa,理论等电点为8.40。AcTO1蛋白的信号肽位于1-17位氨基酸,无跨膜结构,属于分泌型蛋白。AcTO1的氨基酸序列种含有一个JHBP超家族保守结构域。qPCR结果显示,AcTO1在3种采集蜂和2种哺育蜂的各组织均有表达,其中表达量由高到低依次为头部、胸部、腹部。AcTO1基因的表达具有组织依赖型,主要表达于头部,且所有采集蜂的头部表达量均高于哺育蜂,由此说明该基因可能参与蜜蜂的劳动分工。本研究克隆了中华蜜蜂takeout基因的全长cDNA序列,并分析了该基因的序列特征和表达谱,结果表明该基因可能参与调控蜜蜂的劳动分工。 展开更多
关键词 蜜蜂 劳动分工 takeout基因 基因克隆
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蜂胶抗心肌缺血/再灌注损伤作用机制的研究进展 被引量:1
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作者 陈聪海 史培颖 +1 位作者 吴珍红 缪晓青 《中国蜂业》 2016年第11期17-21,共5页
本文对蜂胶抗心肌缺血/再灌注损伤作用及其机制进行归纳阐述,主要涉及抗氧化、减轻钙超载、抑制炎症反应、抑制心肌细胞凋亡、调节K^+离子通道和血管因子水平等机制,为蜂胶抗心肌缺血/再灌注损伤的相关研究提供参考。
关键词 蜂胶 抗心肌缺血/再灌注损伤 作用机制 研究进展
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高糖对蜂蜜中鲁氏接合酵母生理特性的影响 被引量:1
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作者 李玉洁 陈鑫超 +2 位作者 徐晓兰 缪晓青 吴珍红 《中国蜂业》 2019年第12期69-73,共5页
为研究从蜂蜜中分离的鲁氏接合酵母在高糖培养基中的生理特性变化,本文对鸭脚木蜜的耐高渗酵母菌进行平板分离,筛选具有代表性的酵母菌菌落,摇培后提取其DNA,进行ITS序列扩增,经比对后获得酵母菌的种属信息;用30%、40%、50%、60%的高糖... 为研究从蜂蜜中分离的鲁氏接合酵母在高糖培养基中的生理特性变化,本文对鸭脚木蜜的耐高渗酵母菌进行平板分离,筛选具有代表性的酵母菌菌落,摇培后提取其DNA,进行ITS序列扩增,经比对后获得酵母菌的种属信息;用30%、40%、50%、60%的高糖培养基进行培养,测定其生长、培养基残糖量和氧化酶活力的变化。分离鉴定后得到鲁氏接合酵母,与对照组相比,在40%、50%、60%组中生长速率降低,但30%培养基中出现二次生长;随着糖浓度的增加,酵母菌的糖耗量减少,在30%培养基中糖耗量最大;但在高糖培养基中酵母菌胞内SOD、POD、CAT活力增加。这些结果为筛选耐糖工程菌提供理论依据。 展开更多
关键词 蜂蜜 鲁氏接合酵母 高糖 ITS鉴定
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蜂王浆促细胞生长作用的研究进展 被引量:1
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作者 孙燕如 缪晓青 《蜜蜂杂志》 2014年第4期6-7,共2页
蜂王浆具有丰富的药理活性特性,其重要组分10-HDA和王浆主蛋白都发挥着重要作用。归纳和总结了蜂王浆的各种成分在促进细胞生长方面的研究现状。
关键词 蜂王浆 10-HDA 王浆主蛋白 细胞生长
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油菜蜂花粉乙醇提取物对异丙肾上腺素致心肌细胞肥大的保护作用及机制研究 被引量:2
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作者 陈立府 孟菲 +2 位作者 李志良 谢仕慧 史培颖 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2021年第10期1741-1750,共10页
为研究油菜蜂花粉乙醇提取物(RBPEE)对异丙肾上腺素(ISO)诱导H9c2心肌细胞肥大的干预作用及机制,本实验采用梯度浓度RBPEE处理心肌细胞24 h后饥饿12 h,再以50μmol/L ISO损伤48 h,收集上述细胞用于骨架染色、表面积、总蛋白、SOD、GSH和... 为研究油菜蜂花粉乙醇提取物(RBPEE)对异丙肾上腺素(ISO)诱导H9c2心肌细胞肥大的干预作用及机制,本实验采用梯度浓度RBPEE处理心肌细胞24 h后饥饿12 h,再以50μmol/L ISO损伤48 h,收集上述细胞用于骨架染色、表面积、总蛋白、SOD、GSH和MDA测定以及相关基因表达水平检测。研究显示,RBPEE能够显著降低肥大心肌细胞的表面积、总蛋白含量和心肌细胞肥大标志物ANP、BNP、β-MHC的mRNA表达水平;显著增加SOD活性和GSH含量,降低MDA含量;显著降低炎症相关指标IL-2、IL-6、TNF-α和凋亡相关指标Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Bax的mRNA表达水平,及显著增加Bcl-2的mRNA表达水平和Bcl-2/Bax比值。结果表明RBPEE对ISO致心肌细胞肥大的保护作用与降低氧化应激水平、抑制炎症反应和抗凋亡作用密切相关。 展开更多
关键词 油菜蜂花粉 异丙肾上腺素 心肌细胞肥大 氧化应激 抗炎 抗凋亡
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针刺配合蜂针治疗桡骨茎突狭窄性腱鞘炎 被引量:1
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作者 程林兵 缪晓青 《中国民间疗法》 2020年第17期25-26,共2页
目的:探讨针刺配合蜂针治疗桡骨茎突狭窄性腱鞘炎的临床疗效。方法:选取38例桡骨茎突狭窄性腱鞘炎患者,采用针刺配合蜂针治疗,共治疗4周。观察患者治疗后的临床疗效。结果:治疗后,38例患者中痊愈32例,好转6例,总有效率为100%。治疗后随... 目的:探讨针刺配合蜂针治疗桡骨茎突狭窄性腱鞘炎的临床疗效。方法:选取38例桡骨茎突狭窄性腱鞘炎患者,采用针刺配合蜂针治疗,共治疗4周。观察患者治疗后的临床疗效。结果:治疗后,38例患者中痊愈32例,好转6例,总有效率为100%。治疗后随访半年,患者症状均未见加重或复发。结论:针刺配合蜂针治疗桡骨茎突狭窄性腱鞘炎患者,可提高临床疗效,减轻患者的疼痛不适感,值得临床推广应用。 展开更多
关键词 针刺 蜂针 桡骨茎突狭窄性腱鞘炎
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“翻转分享”模式在蜂学教学改革方面的探索
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作者 杨文超 《蜜蜂杂志》 2021年第11期I0032-I0034,共3页
传统教学模式的主要形式是教师讲授、学生理解记忆和作业。翻转教学是运用信息技术改革课堂教学模式、促进学生积极学习的一种新的教学模式。文章总结并分析了2020-2021学年第二学期《蜂产品加工与制药学》的“翻转分享”的教学实践的... 传统教学模式的主要形式是教师讲授、学生理解记忆和作业。翻转教学是运用信息技术改革课堂教学模式、促进学生积极学习的一种新的教学模式。文章总结并分析了2020-2021学年第二学期《蜂产品加工与制药学》的“翻转分享”的教学实践的效果和存在的问题,为今后更好地开展教学改革提供参考。 展开更多
关键词 翻转分享 蜂产品加工与制药学 教学改革
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宝元灵对离体蛙心脏收缩功能的影响 被引量:1
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作者 刘婕 高虹 缪晓青 《华西药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期140-142,共3页
目的研究不同剂量蜂毒复方制剂宝元灵对牛蛙离体心脏收缩张力的影响,并探讨其对心脏运动功能的作用机制。方法采用斯氏蛙心插管制备离体蛙心,分别灌流不同剂量的宝元灵、盐酸普萘洛尔及肾上腺素,记录心脏搏动幅度及心肌收缩张力。结果 ... 目的研究不同剂量蜂毒复方制剂宝元灵对牛蛙离体心脏收缩张力的影响,并探讨其对心脏运动功能的作用机制。方法采用斯氏蛙心插管制备离体蛙心,分别灌流不同剂量的宝元灵、盐酸普萘洛尔及肾上腺素,记录心脏搏动幅度及心肌收缩张力。结果 5个剂量的宝元灵均能增强离体牛蛙心脏的收缩力,其中2.0 mg·L-1剂量的差异显著(P<0.01),其正性肌力作用类似于肾上腺素,可被盐酸普萘洛尔抑制。结论蜂毒复方制剂宝元灵能有效增强离体蛙心脏收缩张力从而改善心脏功能。 展开更多
关键词 蜂毒 复方制剂 宝元灵 离体蛙心 心肌收缩力
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