目的提高血清双向电泳实验的分辨率,建立理想的血清双向电泳实验方法。方法对血清双向电泳(two-diensional gel electrophoresis,2-DE)中血清标本的处理方法以及硝酸银染色方法等条件和技术方法进行了调整和优化。结果经过优化后,建立...目的提高血清双向电泳实验的分辨率,建立理想的血清双向电泳实验方法。方法对血清双向电泳(two-diensional gel electrophoresis,2-DE)中血清标本的处理方法以及硝酸银染色方法等条件和技术方法进行了调整和优化。结果经过优化后,建立了重复性较好的血清2-DE实验方法 ,血清样本中蛋白质斑点的分辨率得到了明显的提高,蛋白质斑点明显增多,且此方法能够兼容后续生物质谱分析。结论通过优化和验证,建立了较实用的血清2-DE实验方案,对血清样本的蛋白质组学分析具有很好的技术参考价值,为进一步分析、寻找和鉴定药物干预或与疾病相关的血清蛋白质奠定了实验基础。展开更多
目的 研究卷丹 (LiliumlancifoliumThunb .)鳞叶的化学成分。方法 用各种色谱技术进行分离和纯化 ,用MALDI TOF MS ,HR SI MS ,IR ,1 HNMR ,1 3CNMR ,DEPT ,1 H 1 HCOSY ,HMQC和HMBC等光谱和波谱技术鉴定其结构。结果 从卷丹鳞叶中分...目的 研究卷丹 (LiliumlancifoliumThunb .)鳞叶的化学成分。方法 用各种色谱技术进行分离和纯化 ,用MALDI TOF MS ,HR SI MS ,IR ,1 HNMR ,1 3CNMR ,DEPT ,1 H 1 HCOSY ,HMQC和HMBC等光谱和波谱技术鉴定其结构。结果 从卷丹鳞叶中分得 2个甾体皂苷 ,鉴定化合物 1为薯蓣皂苷元 3 O {O α L 鼠李糖基 (1→ 2 ) O [β D 木糖基(1→ 3) ] β D 葡萄糖苷 ,化合物 2为薯蓣皂苷元 3 O {O α L 鼠李糖基 (1→ 2 ) O [α L 阿拉伯糖基 (1→ 3) ] β D 葡萄糖苷。结论 化合物 2为新化合物 ,命名为卷丹皂苷A。展开更多
目的:荆防颗粒是新型冠状病毒肺炎预防及轻症治疗的推荐用药,本文结合化学成分分析及活性检测,阐明其潜在的活性成分。方法:采用酶学方法测定荆防颗粒提取物对新型冠状病毒3-chymotrypsin-like protease(3CL^(pro))、papain like protea...目的:荆防颗粒是新型冠状病毒肺炎预防及轻症治疗的推荐用药,本文结合化学成分分析及活性检测,阐明其潜在的活性成分。方法:采用酶学方法测定荆防颗粒提取物对新型冠状病毒3-chymotrypsin-like protease(3CL^(pro))、papain like protease(PL^(pro))、spike protein receptor-binding domain(S-RBD)及人cyclooxygenase-2(COX-2)的抑制活性,利用氨水引咳小鼠模型测试其止咳作用;基于liquid chromatography-mass spectrometry(LC/MS)技术对荆防颗粒进行化学成分定性、定量分析,阐明其化学组成;采用酶学实验、分子对接、定点突变等方法测定荆防颗粒中抑制3CL^(pro)、PL^(pro)的主要活性成分并阐明可能的作用机制。结果:荆防颗粒提取物对新型冠状病毒3CL^(pro)、PL^(pro)蛋白酶具有一定的抑制作用,且具有COX-2抑制活性及止咳药效。进一步在荆防颗粒鉴定了56个成分,其中16个成分经与对照品比对,准确鉴定其化学结构,并测定了其含量,总量为2498.8μg/g。16个成分中的主要成分升麻素苷对3CL^(pro)和PL^(pro)均具有显著的抑制活性,8μmol/L的抑制率分别为76.8%和78.2%;新橙皮苷、柚皮苷对PL^(pro)有抑制活性,8μmol/L的抑制率分别为53.5%和46.1%。分子对接结果表明,升麻素苷可与3CL^(pro)、PL^(pro)活性口袋的氨基酸残基形成氢键,结合能分别为-7.7和-7.3 kcal/mol。定点突变结果表明,氨基酸残基K157是升麻素苷与PL^(pro)相互作用的重要活性位点。结论:荆防颗粒的主要成分升麻素苷、新橙皮苷、柚皮苷等具有抑制新型冠状病毒3CL^(pro)及PL^(pro)的活性,为荆防颗粒的临床合理使用提供了依据。展开更多
文摘目的提高血清双向电泳实验的分辨率,建立理想的血清双向电泳实验方法。方法对血清双向电泳(two-diensional gel electrophoresis,2-DE)中血清标本的处理方法以及硝酸银染色方法等条件和技术方法进行了调整和优化。结果经过优化后,建立了重复性较好的血清2-DE实验方法 ,血清样本中蛋白质斑点的分辨率得到了明显的提高,蛋白质斑点明显增多,且此方法能够兼容后续生物质谱分析。结论通过优化和验证,建立了较实用的血清2-DE实验方案,对血清样本的蛋白质组学分析具有很好的技术参考价值,为进一步分析、寻找和鉴定药物干预或与疾病相关的血清蛋白质奠定了实验基础。
文摘目的 研究卷丹 (LiliumlancifoliumThunb .)鳞叶的化学成分。方法 用各种色谱技术进行分离和纯化 ,用MALDI TOF MS ,HR SI MS ,IR ,1 HNMR ,1 3CNMR ,DEPT ,1 H 1 HCOSY ,HMQC和HMBC等光谱和波谱技术鉴定其结构。结果 从卷丹鳞叶中分得 2个甾体皂苷 ,鉴定化合物 1为薯蓣皂苷元 3 O {O α L 鼠李糖基 (1→ 2 ) O [β D 木糖基(1→ 3) ] β D 葡萄糖苷 ,化合物 2为薯蓣皂苷元 3 O {O α L 鼠李糖基 (1→ 2 ) O [α L 阿拉伯糖基 (1→ 3) ] β D 葡萄糖苷。结论 化合物 2为新化合物 ,命名为卷丹皂苷A。
文摘目的:荆防颗粒是新型冠状病毒肺炎预防及轻症治疗的推荐用药,本文结合化学成分分析及活性检测,阐明其潜在的活性成分。方法:采用酶学方法测定荆防颗粒提取物对新型冠状病毒3-chymotrypsin-like protease(3CL^(pro))、papain like protease(PL^(pro))、spike protein receptor-binding domain(S-RBD)及人cyclooxygenase-2(COX-2)的抑制活性,利用氨水引咳小鼠模型测试其止咳作用;基于liquid chromatography-mass spectrometry(LC/MS)技术对荆防颗粒进行化学成分定性、定量分析,阐明其化学组成;采用酶学实验、分子对接、定点突变等方法测定荆防颗粒中抑制3CL^(pro)、PL^(pro)的主要活性成分并阐明可能的作用机制。结果:荆防颗粒提取物对新型冠状病毒3CL^(pro)、PL^(pro)蛋白酶具有一定的抑制作用,且具有COX-2抑制活性及止咳药效。进一步在荆防颗粒鉴定了56个成分,其中16个成分经与对照品比对,准确鉴定其化学结构,并测定了其含量,总量为2498.8μg/g。16个成分中的主要成分升麻素苷对3CL^(pro)和PL^(pro)均具有显著的抑制活性,8μmol/L的抑制率分别为76.8%和78.2%;新橙皮苷、柚皮苷对PL^(pro)有抑制活性,8μmol/L的抑制率分别为53.5%和46.1%。分子对接结果表明,升麻素苷可与3CL^(pro)、PL^(pro)活性口袋的氨基酸残基形成氢键,结合能分别为-7.7和-7.3 kcal/mol。定点突变结果表明,氨基酸残基K157是升麻素苷与PL^(pro)相互作用的重要活性位点。结论:荆防颗粒的主要成分升麻素苷、新橙皮苷、柚皮苷等具有抑制新型冠状病毒3CL^(pro)及PL^(pro)的活性,为荆防颗粒的临床合理使用提供了依据。
