富含脯氨酸的酪氨酸激酶2生物功能及药物研究进展

富含脯氨酸的酪氨酸激酶2(Pyk2)为粘着斑激酶家族重要成员之一,高表达于中枢神经系统及造血系统。Pyk2可使多种含SH2结构域的底物蛋白发生磷酸化,从而参与包括离子通道激活、应激反应、细胞黏附、骨架重组以及囊泡运输等多种信号转导通路的调节,使细胞迁移、存活、增殖等能力发生相应的改变,提示Pyk2可能成为疾病治疗的靶点。目前针对Pyk2的药物研发主要集中在治疗癌症、骨质疏松症、免疫系统疾病等方面。该文将主要对Pyk2的结构域、调控机制及潜在的治疗作用进行综述,为其药物研发提供理论依据。

CYP3A4高表达细胞模型及其应用于药物代谢研究进展

细胞色素P450酶3A4(cytochrome P450 3A4,CYP3A4)属于细胞色素P450酶家族,参与多种化合物代谢及相互作用,是药物(尤其是口服药物)筛选和代谢研究的重要对象。该文按年代顺序对国外文献中CYP3A4高表达细胞模型的建立及在药物代谢中的应用进行综述,旨在将这一有价值的模型引入到新药研究中。

山橙属植物化学成分与抗肿瘤活性研究进展

结合国内外文献综述了山橙属植物化学成分的研究进展,并对该属药用植物的抗肿瘤活性进行了总结。山橙属植物含有多种化学成分,主要有生物碱类以及少量三萜类、甾体类、木脂素类等。该属植物中的生物碱类成分具有显著的抗肿瘤活性。

香豆素类化合物药理和毒理作用的研究进展

香豆素类化合物是自然界重要的一类天然有机化合物,存在于不同种属的植物中,具有广泛的用途。实验研究发现香豆素具有抗HIV、抗肿瘤、抗氧化、抗炎等多种药理活性,在临床上广泛用于抗凝血和淋巴管性水肿的治疗。近年来的研究发现,香豆素类化合物在啮齿类动物中存在着明显的毒性作用,且具有种属和位点特异性,这与其代谢途径和CYP2A6酶的多态性有关。另外,毒性作用还与给药剂量和给药途径密切相关,口服和高剂量给药更容易产生毒性反应。该文综述了近年来有关香豆素及其衍生物在药理和毒理方面的研究进展,以期为香豆素类化合物的研发和临床应用提供帮助。

干细胞治疗阿尔茨海默病的研究进展及挑战

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是中枢神经系统常见的慢性进行性神经退行性疾病,病理特征主要是细胞外淀粉样蛋白沉积,细胞内神经元纤维缠结以及神经元丢失等,其中神经元丢失是造成AD患者功能损伤的根本原因之一。目前对AD的治疗多以缓解症状为主,而不能从根本上解决AD的病理特征。近年来,神经再生理论的发展和干细胞体外培养的成功为AD的治疗提供了一个崭新的视野。目前,干细胞来源主要包括神经干细胞、胚胎干细胞、骨髓间充质干细胞、诱导性多功能干细胞等。干细胞主要通过修复和替代受损神经细胞、重建细胞环路和功能、神经保护和营养支持、抑制淀粉样蛋白的形成和调解免疫功能等发挥治疗AD的作用。该综述主要介绍外源性移植干细胞治疗AD的研究进展及挑战,以及小分子化合物促进内源性神经再生的研究现状。

金银花与山银花绿原酸提取动力学比较研究

目的利用已建立的中药材成分封闭体系提取动力学模型,探讨金银花与山银花绿原酸的提取动力学差异。方法采用HPLC测定金银花与山银花绿原酸有效含量W0及分配系数ρ2,采用吸水法测定工艺参数V1、V2再计算V0,利用SPSS19.0软件非线性拟合得到参数M、N、L、α、β、π,用Excel2016按公式计算k、k1′、k2′、ρ1、t_(max)、c_(max)、AUC、P%、D%。运用总量统计矩相似度法计算两者的相似度。结果金银花的V0、V1、V2分别为18.69、9.50、30.20 m L,金银花绿原酸W0为3.75%、ρ2为0.884;山银花的V0、V1、V2分别为12.79、7.80、37.00 m L,山银花绿原酸W0为5.67%、ρ2为1.020。金银花与山银花绿原酸药时曲线呈三室模型,其主要提取动力学参数k分别为0.110 1、0.3755 h-1,k1′分别为3.632、3.288 h-1,k2′分别为53.12、55.28 h-1,ρ1分别为2.731、2.751,tmax分别为0.299 5、0.216 3 h,cmax分别为0.134 0、0.252 7 mg/m L,AUC分别为3.405、1.560 h,P%分别为35.73%、44.57%,D%分别为0.916 2%、2.680 7%。总量统计矩相似度为0.963 8,表明金银花与山银花绿原酸提取动力学行为基本相似。结论金银花与山银花绿原酸的溶出行为及其差异可以用中药提取动力学数学模型客观且有效地表达,本研究可以为进一步开展金银花与山银花提取工艺的优化及其制剂研究提供一定参考。

孔石莼多糖及其磺化衍生物HU体外结合脂类和胆固醇的研究

目的研究孔石莼多糖及其磺化孔石莼多糖HU在体外结合脂类和胆固醇的能力,并进一步阐明其可能作用的机制。方法在体外模拟人体消化环境,测定孔石莼多糖U及磺化孔石莼多糖HU对脂肪、胆固醇和胆酸盐的结合能力。结果孔石莼多糖进行磺化后显著增强了它对胆固醇和胆盐的结合能力,但相对减弱了它对脂肪的结合能力。结论孔石莼多糖及其磺化衍生物在体外对脂类和胆固醇具有很强的结合能力,孔石莼多糖中硫酸基的含量是影响其吸收脂类和胆固醇的重要因素。

小檗碱及药根碱在大鼠肝微粒体中的代谢转化研究

目的进行小檗碱和药根碱在大鼠肝微粒体中的代谢转化研究,尝试给中药有效成分的体外和体内关联研究提供一定的参考。方法制备大鼠肝微粒体,用Brad ford法测定酶活性,以此配制大鼠肝微粒体体外温孵体系,加入药物温孵,用质谱进行检测测定并比较小檗碱、药根碱代谢产物图谱。结果检测到小檗碱经大鼠肝微粒体代谢后产物中有药根碱,药根碱经大鼠肝微粒体代谢后产物中有巴马汀,但小檗碱代谢产物中未见巴马汀。结论小檗碱和药根碱是同母核生物碱,在肝微粒体中孵化可相互影响,但体外代谢无法简单关联体内代谢过程。

白刺果实化学成分研究

目的研究白刺果实的化学成分。方法采用大孔树脂层析、Sephadex LH-20凝胶和高效液相色谱法对其化学成分进行分离纯化,通过理化性质和波谱数据分析鉴定化合物结构。结果从白刺果实中分离得到9个化合物,分别为:色氨酸(1),对羟基苯甲酸(2),isorhamnetin 3-O-β-D-glucopyranosyl-(1-2)-α-L-rhamnopyranoside(3),5,7,2′-trihydroxyflavonol(4),peonidin-3-p-coumaroylrutinoside(5),cyanidin 3-[6″-(6-trans-p-coumaroyl-β-D-glucopyranosyl)-β-D-galactopyranoside](6),apigenin 5-O-(2″-O-E-p-coumaroyl)--D-glucopyranoside(7),H-trp-ala-OH(8),槲皮素(9)。结论化合物1～8均为首次从该植物中得到。

宁夏枸杞子化学成分的研究

目的研究枸杞子的化学成分。方法利用硅胶柱层析、氧化镁柱层析、Sephadex LH-20凝胶和高效液相色谱法对其化学成分进行分离纯化,通过理化性质和波谱数据分析鉴定化合物结构。结果从枸杞子中分离得到8个化合物,鉴定了8个化合物,分别为:烟酸(1),棕榈酸(2),正二十烷酸(3),麦角甾醇(4),β-胡萝卜素(5),玉米黄素双棕榈酸酯(6),β-谷甾醇(7),甜菜碱(8)。结论化合物正二十烷酸(3)为首次从该植物中得到。

α-突触核蛋白与Cu^(2+)相互作用的研究进展

帕金森病是一种慢性中枢神经系统退行性疾病,其主要的病理特征是黑质致密部多巴胺能神经元丢失,残存神经元胞质中出现路易小体,其主要成分是异常聚集的α-synuclein蛋白(α-突触核蛋白)。α-synuclein的聚集与多种因素有关,其中金属离子与α-synuclein结合可导致蛋白构象发生变化引起蛋白发生聚集。近年的研究发现,Cu2+能够特异地结合α-synuclein蛋白,并诱导α-synuclein的聚集。该文就Cu2+与α-synuclein相互作用的的结合位点、结合模式以及Cu2+在α-synuclein毒性形式中可能发挥的作用作一综述。

Nrf2/ARE信号通路在抑郁症中的研究进展

抑郁症是严重危害人类身心健康的重要疾病,氧化应激与慢性炎症反应是其发病的主要作用机制之一。由于心理应激导致的交感神经过度激活以及下丘脑-垂体-肾上腺(hypothalamic-pituitary-adrenal,HPA)轴过度兴奋引起的糖皮质激素水平升高,都可引发氧化应激与炎症反应。核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2-related factor 2,Nrf2)/抗氧化反应元件(anti-oxidant response element,ARE)信号通路是体内主要的抗氧化信号途径,Nrf2作为转录因子,可通过与ARE的结合对机体主要的抗氧化酶表达发挥调控作用。前期研究表明Nrf2-/-小鼠具有典型的抑郁症状表现,而给予抗炎药物治疗后可显著缓解其抑郁症状,提示免疫炎症在Nrf2缺失引发的抑郁症中具有重要的作用。该文将对抑郁症中Nrf2介导的抗氧化应激和调控免疫炎症的作用机制进行综述,以期为Nrf2/ARE信号通路为靶标,开发新型的抗抑郁药物奠定理论基础。

过表达E46K突变α-synuclein通过JNK1-Bcl-2信号途径损害自噬功能

帕金森氏病（Parkinson’sdisease,PD）是一种以中脑多巴胺能神经元进行性丢失以及α突触核蛋白（αsynuclein）为主要成分的路易士小体（Lewybodies）的出现为特征的神经系统退行性疾病.遗传学研究表明,A30P,A53T以及E46K突变αsynuclein与家族性PD的发病密切相关,这就说明αsynuclein参与了PD的发病.然而α-synuclein的突变体是如何导致神经毒性的目前仍不清楚.越来越多的研究表明α-synuclein可以导致自噬溶酶体途径障碍.在本文中,过表达E46K突变α-synuclein能够损害哺乳动物细胞的大自噬.实验结果表明,过表达E46K突变α-synuclein后自噬的早期也就是自噬小体的形成发生障碍,该机制与JNK1-Bcl-2信号途径而不是mTOR相关.过表达E46K突变α-synuclein抑制了JNK1的活化,从而导致Bcl-2的磷酸化降低,进而增加Bcl-2和Beclin1的结合,进一步解聚Beclin1/hVps34的复合物,而此复合物是自噬起始的所必需的.本文的发现有利于阐明α-synuclein在PD发病中扮演的角色.

麦角甾醇类化合物G10-10A体外抗胃癌细胞MKN45生长作用的研究

麦角甾醇类化合物G10-10A是从西藏高原冷杉粘褶菌(G.Abietinum)子实体中分离得到的一种麦角甾醇类化合物,本研究通过体外细胞实验观察化合物G10-10A对胃癌抗肿瘤活性及其作用机制.MTT法、生长曲线和集落形成试验显示G10-10A对人胃癌细胞MKN45有强大的抗增殖活性,流式细胞术和免疫印迹法检测G10-10A可以诱导细胞凋亡,同时增加P53及其下游P21和PUMA表达,联合小分子抑制剂Z-VAD-FMK或者Pifithrin-α能下调G10-10A诱导CL-PARP增加,减轻细胞毒活性.

孔石莼多糖及其硫酸酯化衍生物抗肿瘤活性的体外实验研究

目的研究孔石莼多糖(U)及其硫酸酯化衍生物(HU)对不同肿瘤细胞株生长的影响。方法利用体外细胞培养模型,应用CCK-8法分析孔石莼多糖U及其硫酸酯化衍生物对不同肿瘤细胞生长的影响。结果孔石莼多糖U及其硫酸酯化衍生物HU对人肝癌细胞HepG2、人肺癌细胞SPC-A-1、人胃癌细胞CDX2、人乳腺癌细胞MDA-MB-231均具有一定的抑制作用,但作用又有明显差异。对孔石莼多糖(U)进行硫酸酯化衍生化后增强了对HepG2、SPC-A-1、CDX2及MDA-MB-231肿瘤细胞的抑制作用。结论孔石莼多糖(U)及其硫酸酯化衍生物(HU)对不同肿瘤细胞生长具有一定的抑制作用,硫酸酯化孔石莼多糖(HU)对肿瘤细胞的抑制作用强于孔石莼多糖(U)。

神经细胞凋亡与脑缺血疾病

脑缺血疾病是现代人类健康和生命的主要杀手之一。近年研究发现,神经细胞凋亡是脑缺血疾病造成神经系统损伤的重要机制,神经细胞凋亡通路主要包括线粒体通路、死亡受体通路、PARP/AIF通路。基于神经细胞凋亡与脑缺血损伤关系的深入研究,抗凋亡治疗已经成为了治疗脑缺血疾病的重要途径。

山香圆叶中黄酮苷类成分及其抗炎活性研究

应用大孔树脂、聚酰胺、Sephadex LH-20,HPLC等各种色谱技术对山香圆叶95%乙醇提取物经乙酸乙酯萃取后的水部位进行分离纯化,分离得到8个黄酮苷类化合物,采用NMR等谱学方法分别鉴定为:野漆树苷(1),女贞苷(2),刺槐素-7-O-[β-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(3),刺槐素-7-O-[α-L-吡喃鼠李糖基-(1→6)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(密蒙花新苷,4),木犀草素-7-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(5),金圣草素-7-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(6),刺槐素-7-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(蒙花苷,7),芹菜素6,8-二-C-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)。其中化合物3～8为首次从该植物中分离获得。采用脂多糖(LPS)刺激RAM264.7巨噬细胞炎症模型对分离得到的化合物进行抗炎活性评价,结果表明化合物2,3在1×10-5mol.L-1浓度下,对LPS刺激RAW264.7细胞NO生成的抑制率分别为33.7%和23.8%,提示化合物2,3具有较弱的抗炎活性。

白花檵木促大鼠皮肤伤口愈合物质基础初步研究

目的:观察白花檵木粗提物(extract of Loropetalum chinens,ELC)促大鼠皮肤伤口愈合作用,并对粗提物分离提取得到的组分进行促愈合药理筛选,为白花檵木促皮肤愈合物质基础研究奠定工作基础。方法:应用酶解和溶剂萃取手段制备白花檵木粗提物,进而以有机溶剂对粗提物萃取,获得多种分离组分;采用大鼠皮肤割伤模型(incision wound model)和切除伤模型(excision wound model)2种国际常用体内模型研究白花檵木粗提物及分离组分的促愈合作用,对伤口进行愈合病理和免疫组织化学染色观察;对白花檵木粗提物进行初步分离,并采用大鼠皮肤割伤模型对分离提取产物进行促愈合作用筛选。结果:白花檵木粗提物可显著促进大鼠皮肤伤口的愈合速度,缩短愈合时间,增加愈合后皮肤抗拉强度,促进伤口处细胞及血管新生;白花檵木粗提物的初步分离提取组分中,石油醚层,乙酸乙酯层和正丁醇层促皮肤愈合作用较强,提示白花檵木的促愈合作用物质极性较小。结论:白花檵木粗提物具有显著促愈合作用,石油醚层、乙酸乙酯层和正丁醇层3种分离组分促愈合作用较强,推测白花檵木促愈合功效活性物质极性较小。

神经生长因子抗体对哮喘模型大鼠肺中趋化素样因子1表达的影响

目的观察神经生长因子(NGF)抗体对OVA诱导的哮喘模型大鼠肺中趋化因子CKLF1的表达变化。方法采用OVA诱导的大鼠哮喘模型,通过腹腔给予NGF(8 ng.kg-1)及NGF抗体(0.1 mg.L-1),采用Western blot、ELISA和免疫组化观察CKLF1在支气管肺泡灌洗液(BALF)及肺组织中的表达变化。结果 CKLF1在OVA诱导的哮喘模型大鼠肺组织中的蛋白表达升高(P<0.05);NGF抗体能够降低CKLF1的表达;CKLF1在哮喘大鼠BALF中的含量升高(P<0.05),NGF抗体能够降低BALF中CKLF1的含量(P<0.05);NGF对肺组织及BALF中CKLF1的表达没有明显的影响。结论 NGF抗体能够抑制哮喘模型大鼠肺组织及支气管肺泡灌洗液中CKLF1的表达和释放,改善哮喘症状。

海洋链霉菌7-145中洋橄榄叶素衍生物的分离鉴定

目的分离鉴定海洋链霉菌Streptomyces sp．7-145产生的抗耐药菌活性成分。方法通过活性追踪，利用大孔吸附树脂、凝胶、正反相色谱等多种色谱技术分离纯化活性成分；通过紫外光谱、质谱、核磁共振谱等波谱学方法鉴定其结构。利用琼脂稀释法和微量肉汤稀释法分别测定所得化合物的抗耐药菌和抗结核活性，利用MTT法评价其细胞毒性。结果从中分离鉴定了4个活性化合物，其结构分别确定为洋橄榄叶素（1）、11-O-甲基洋橄榄叶素（2）、11，11’-O-二甲基洋橄榄叶素（3）、14’-去乙基-14＇-甲基洋橄榄叶素（4）。化合物1～4对甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌（MRSA）和万古霉素耐药的肠球菌（VRE）等革兰阳性耐药菌具有较强的抗菌活性，最低抑菌浓度（MIC）为1～16μg／mL；所有化合物对结核分枝杆菌H37Rv株显示出显著的抑制活性（MIC：0．5～4μg／mL），其中化合物1对结核分枝杆菌多重耐药（MDR）、广泛耐药（XDR）等耐药株也表现出较强的抑制活性（MIC：0．5～1μg／mL）；1和2对人肝细胞（L02）、肾上皮细胞（293T）和乳腺癌细胞（MCF-7）具有较强的细胞毒活性，IC50值200．14～0．28μmol／L。结论化合物1～4具有较强的体外抗MRSA、VRE等耐药菌活性。首次发现洋橄榄叶素（1）具有体外抗结核分枝杆菌标准株、多重耐药以及广泛耐药株活性。化合物1和2对人正常肝、肾上皮细胞具有细胞毒性。