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豚鼠早期实验性近视眼视网膜色素上皮细胞前部及后极部TGF—β2表达变化的研究
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作者 陈博宇 王超英 陈维毅 《中医眼耳鼻喉杂志》 2016年第4期182-188,共7页
目的研究豚鼠早期实验性近视眼视网膜色素上皮(RPE)细胞前部及后极部转化生长因子β2(TGF-β2)的改变,探索近视的发病机制。方法2周龄豚鼠30只随机分为A、B、C组,每组10只,再随机选取5只(10眼)正常2周龄豚鼠不作任何干预,作... 目的研究豚鼠早期实验性近视眼视网膜色素上皮(RPE)细胞前部及后极部转化生长因子β2(TGF-β2)的改变,探索近视的发病机制。方法2周龄豚鼠30只随机分为A、B、C组,每组10只,再随机选取5只(10眼)正常2周龄豚鼠不作任何干预,作为正常对照眼。选取任意眼戴一10DS凹透镜,分别饲养6天、15天、30天后除去镜片,验光及测眼轴长度确定近视形成后,采用细胞酶消化法培养豚鼠的前部及后极部RPE细胞,取3~6代RPE细胞进行免疫细胞化学、实时荧光定量PCR、western—blot蛋白印迹法检查前部及后极部RPE细胞TGF-β2及其mRNA、蛋白表达变化。结果TGF-β2的表达定位于细胞浆和细胞核。实验组中前部RPE细胞于15天阳性表达率较高,30天阳性表达率最高;后极部RPE细胞于6天表达率开始较高,至15天阳性表达率最高,以后保持较高的阳性表达率,差异有显著性(P〈0.05);SC组各组自身前部及后极部比较,差异无显著意义(P〉0.05)。结论体外培养的豚鼠RPE细胞稳定表达TGF-β2、TGF—β2 mRNA及其蛋白。且前部RPE细胞于诱导15天开始阳性表达率较高;后极部RPE细胞于诱导6天开始阳性表达率较高。后极部RPE细胞较前部RPE细胞表达差异有显著性。 展开更多
关键词 豚鼠 视网膜色素上皮细胞 转化生长因子Β2 免疫细胞化学 实时荧光定量PCR Western-blot蛋白印迹法
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