荧光染色结合激光共聚焦活细胞成像快速评价人移植胰岛

目的:探讨一种快速有效的评价分离或培养的人胰岛方法。方法:使用双氯荧光黄乙酸乙酯(DCF)、高氯酸甲酯荧光素(TMRM)、荧光麦胚凝集素(WGA)三种荧光染色剂标记,评价胰岛细胞氧化应激反应,线粒体膜电位变化以及低聚糖分布。激光共聚焦显微镜使用增强型微透镜Nipkow双重转碟技术,且装配有倒置显微镜对细胞进行观察。结果:新分离的人胰岛细胞中,损伤细胞TMRM染色弱,另外WGA染色人胰岛细胞中内分泌细胞及外分泌细胞表面低聚糖量明显不同,内分泌细胞表面染色弱。DCF进入细胞内但在激光强度10%情况下未发出荧光。结论:TMRM染色线粒体膜对于早期识别损伤或应激细胞十分有益。多种荧光染色结合共聚焦成像系统对于快速评价分离和培养的胰岛细胞具有应用前景。