不同生物活性基团修饰的纳米磁珠在核酸提取中的效能比较

目的评价不同生物活性基团修饰的纳米磁珠核酸提取效能,为临床应用及结果评价提供一些依据。方法通过不同生物活性基团修饰的纳米磁珠对检测乙型肝炎病毒的标本进行核酸提取,采用微量分光光度计(NanoDrop One~c)检测核酸的浓度及纯度,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测样本的CT值。结果在几种纳米磁珠提取法中,超顺磁性羧基纳米微粒提取的核酸浓度及纯度最高(浓度平均为953.3 IU/mL),其次是二氧化硅磁性微球与羧基微球混合纳米磁珠及纳米磁性氧化物MnFe_(2)O_(4)提取法。羟基修饰二氧化硅颗粒以及壳聚糖包覆的磁珠提取的核酸浓度较高,但纯度较差(A260/280及A260/230比值均超出标准范围)。对于同一样本,超顺磁性羧基纳米微粒提取的核酸扩增CT值为(21.28±0.36),核酸提取效率明显高于离心柱提取法,且具有统计学意义。二氧化硅磁性微球和羧基微球混合纳米磁珠、羟基修饰二氧化硅纳米磁珠及壳聚糖包覆的纳米磁珠核酸提取效率均低于离心柱提取法。此外,超顺磁性羧基纳米微粒的提取时间可缩短至15分钟。结论超顺磁性羧基纳米微粒核酸提取效率、精密度及核酸产物纯度最高,有较大的临床应用价值。

特拉唑嗪在治疗老年顽固性高血压中的疗效观察

目的探讨特拉唑嗪在治疗老年原发性顽固性高血压的临床疗效。方法将我院收治的80例顽固性高血压患者随机分成两组,均为原发性高血压。对照组36例使用拜新同及安博诺治疗,治疗组44例在对照组的基础上加用特拉唑嗪治疗,两组疗程均为6周。结果治疗组的总有效率明显高于对照组,两组相比较差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗后的收缩压与舒张压均较治疗前有明显下降,治疗前后差异具有统计学意义(P<0.05),治疗组的降压效果明显优于对照组。结论盐酸特拉唑嗪联合多种降压药治疗老年顽固性高血压效果良好,副作用少,值得临床推广。

西洋参中人参皂苷的真菌生物转化研究进展

西洋参作为一种名贵的中药材,有着多种多样的化学成分以及非常广泛的生物活性,深受世界各国人民的青睐,人参皂苷是其主要的活性成分。通过对不同真菌(食药用真菌、丝状真菌、西洋参内生真菌)对西洋参及人参皂苷的生物转化,转化产物的种类,成分变化及其功效等内容进行综述,为西洋参高效开发利用提供一定的参考价值。

基于化学发光原理的高通量免疫分析仪的研制

针对临床免疫检测高灵敏度、高通量的要求,研制了基于化学发光检测原理的免疫分析仪。结合化学发光免疫检测步骤,采用模块化设计思想和流水线作业模式完成仪器方案设计;通过微升级别液体加注过程的分析及仿真给出加样模块相关参数的优化原则;通过免疫复合物颗粒磁分离过程的分析给出磁场设计原则。在此基础上根据检测过程各步骤的操作要求及整体速度要求设计流水线各工位模块及控制系统。测试实验结果表明仪器检测结果准确,试剂兼容性好,达到了国家卫生部相关要求。仪器可稳定实现每小时180测试,目前已在多家医院临床应用。

血清糖类抗原19-9增高与良恶性疾病之间的关系

目的:探讨糖类抗原19-9(CA19-9)升高与良、恶性疾病之间的相关性。方法:回顾性分析344例血清CA19-9阳性患者资料中的检测数值与升高程度,并对升高程度和疾病例数进行分类统计,分析CA19-9升高与良、恶性疾病的关系。结果:(1)临床多种良、恶性疾病均有可能出现血清CA19-9升高;(2)血清CA19-9升高在良性疾病的患者中以胆系结石或感染为主,共23例(占10.9%),且患者血清CA19-9>120 U/ml在良性疾病中的比例最高,为47.8%;(3)恶性疾病血清CA19-9>120 U/ml的例数为44例,占恶性疾病CA19-9升高总例数的33.1%,而在良性疾病中仅占9.0%。结论:血清CA19-9升高可在多种良、恶性疾病中出现,但恶性疾病中血清CA19-9升高程度高于良性疾病。

具有生物蛋白分离功能的新型磁性微球研发及其临床应用

目的:制备具有生物蛋白分离功能的新型磁性微球,并将其应用于体外诊断试剂研发中。方法:配制并使用适宜的乳化液对磁性微球基体进行处理,并通过乳液聚合获得相应的磁性微球;将制备的磁性微球应用于体外诊断试剂中,以EB病毒衣壳抗原IgM(EB-VCA IgM)抗体为例评估其临床应用的性能。结果:获得具有生物蛋白分离功能的新型磁性微球;制备的磁性微球应用于EB-VCAIgM抗体检测试剂:批内变异系数在高低2个水平分别为2.558%、2.861%;批间变异系数在高低2个水平分别是2.243%、1.708%;正确度在高低2个水平的偏差分别为2.27%、-0.84%;参考区间验证结果:20例正常人的标本检测结果均为阴性;EB-VCA IgM抗体的临床符合率96.13%。结论:本研究制备的新型磁性微球具有良好的生物蛋白分离功能,应用于EB-VCAIgM抗体检测,性能良好,为实现高特异性的蛋白吸附分离工程提供了新的选择。

AutolumiS系列全自动化学发光测定仪的研究与设计

目的:开发国产全自动化学发光测定仪,有效推动我国免疫分析技术的发展。方法:基于直接化学发光机制设计全机,包括光、机、电、软件、液路及温控等控制部分;采用微量生物试样精确加样技术、精密运动控制、闪光检测以及多模块集成控制等技术。结果:AutolumiS系列全自动化学发光测定仪,目前已通过临床试验,并取得了医疗器械注册证。结论:该产品可衍生出全系列的微粒子化学发光诊断试剂产品,以较低的价格,满足临床日益增长的各种疾病的体外诊断的需求。

新型磁分离直接化学发光方法的建立及其临床应用

目的建立新型磁分离直接化学发光的方法及探讨其临床应用。方法新型磁分离直接化学发光方法中发光标志物采用高灵敏度的异鲁米诺衍生物,分离试剂采用高特异性的羊抗异硫氰酸荧光素(FITC)多克隆抗体包被的免疫纳米磁性微珠,发光底物采用简便的NaOH和H2O2。新型磁分离直接化学发光方法的临床应用性能评估以血清促甲状腺激素(TSH)为例,选取2019年8月~2020年8月威海市立医院初诊的104例甲状腺功能亢进症患者血清作为甲亢组;121例甲状腺功能减退患者血清作为甲减组;以同期来体检的134例健康成年人血清作为对照组。标本采用新型磁分离直接化学发光方法及ADVIA Centaur XP同时检测,将此两种方法所得结果进行比对,评价其临床符合性。再通过对高、中、低三种浓度标准液的重复检测,评价其灵敏度、精密度和稀释回收率。结果实现了新型磁分离直接化学发光方法的建立,并通过了临床验证,以TSH为例的临床应用结果显示,建立的新型磁分离直接化学发光方法的检测灵敏度为0.01μIU/mL,批内和批间变异系数(CV)均<5%,稀释回收率>80%。本研究建立的新型磁分离直接化学发光方法与ADVIA Centaur XP的直接化学发光法对TSH的检测结果进行对比,相关系数为0.9874。结论成功建立一种新型磁分离直接化学发光方法,该方法具有高灵敏度、高精密度和很好的临床相符性,具有较好的临床应用价值。

AutolumiS 3000全自动微粒子化学发光检测仪样本管理系统的设计与应用

目的建立AutolumiS 3000微粒子化学发光检测仪的样本管理系统,完善自动化样本检测流程。方法通过对计算机信息技术、条形码技术、人机交互技术的综合分析,以实现对AutolumiS 3000样本管理系统的开发及应用。结果成功研制出适用于AutolumiS 3000化学发光检测仪的样本管理系统,该系统通过具有图形交互的运行和调试软件AutolumiS 3000,可支持检测仪的自动进样、样本架识别、关联测试、自动重测功能。基于自反馈的ETH-CAN通讯前端检测装置设计出了新型的发光仪通讯模式,将实验室信息系统(LIS)与整机控制相结合,使整机运行流畅,提升测速至240测速/h。结论AutolumiS 3000样本管理系统的应用简化了操作步骤和实验室工作流程,提高了实验室的工作效率。且与LIS的互联可实现数据同步,给医生及患者的报告查询提供了便利,临床应用前景良好。

HCV抗体血清学检测联合HCV-RNA检测的应用价值:附2例病例分析

丙型肝炎(丙肝)为常见传染病,丙肝病毒(HCV)抗体血清学检测是HCV感染筛查的主要方式,常用的方法为化学发光法。但感染HCV后,抗体的血清学转换可延迟至数月后。HCV-RNA检测可直接检测病毒复制量,感染HCV后1~2周即可在血清中检测到病毒,是HCV感染的实验室诊断方法之一。但HCV-RNA检测操作繁琐、成本较高,常规实验室不作为筛选使用。威海市立医院收治2例疑诊病毒性肝炎患者,经核酸检测确诊后即给予相应治疗,患者肝功能好转。说明在实验室常规开展HCV-RNA检测提高了HCV感染检出的准确性。

不同DNA聚合酶突变体与野生型检测性能的比较分析

目的将Taq DNA聚合酶(Taq酶)不同的突变体与其野生型进行对比,分析二者扩增性能及聚合性能的差异,探讨突变型Taq酶在乙型、丙型肝炎病毒患者临床检测中的性能优势。方法提取DNA构建突变库,逐步筛选出热稳定性提高且扩增效率较高的突变体;选取威海市立医院2020年1月至2021年8月收治的乙型肝炎病毒表面抗原阳性样本30例、丙型肝炎HCV RNA阳性样本30例,通过PCR-荧光探针法应用Taq酶突变体与野生型进行性能检测。结果在同等PCR循环次数下,Taq酶突变体CT值均低于野生型,即突变体的扩增效率高于野生型;对临床样本进行3次重复检测,突变体标准曲线的相关系数为0.99;将Taq酶突变体进行重复检测,批内及批间的检测浓度对数值的变异系数(CV%)均小于5%。结论不同DNA聚合酶的突变体与野生型相比具有较高的扩增活性及扩增效率,灵敏度及特异性的优势也较为显著。这一特性为进一步研究开发扩增效率更高的DNA聚合酶,推动现代分子生物检测技术、辅助乙肝及丙肝病毒临床检测的发展打下基础。

系统性红斑狼疮伴圣乔治教堂诺卡菌肺部感染一例

目的:分析圣乔治教堂诺卡菌肺部感染病例的临床和实验室特点,提高对该病的诊治水平.方法:回顾性分析我院2018年经治的一例圣乔治教堂诺卡菌肺部感染病例的临床和实验室资料.结果:该患者系统性红斑狼疮多年,近2年因继发血小板减少接受糖皮质激素和免疫抑制剂治疗,近期出现肺部感染.胸部CT示团片状、颗粒状、条状密度增高影.右上肺病变可见空洞及坏死,双侧胸腔可见积液.痰涂片菌体呈树枝状,纯培养菌体呈杆状,弯曲状,球状,未见到丝状菌体,弱抗酸染色部分菌体阳性;应用复方新诺明联合亚胺培南抗感染,痰培养逐渐转阴.结论:长期应用激素和免疫抑制剂的患者出现肺部感染时应警惕诺卡菌;痰涂片圣乔治诺卡菌的形态与纯培养后形态不同,痰涂片菌体形态有助于该菌的早期鉴定.对于免疫抑制的肺诺卡菌病患者,需要早期、联合用药,并给予足够疗程的治疗.

一种用于检测1型糖尿病的抗原蛋白质表达及鉴定方法的临床应用

目的表达并鉴定一种用于检测1型糖尿病的抗原蛋白质,探讨其在化学发光检测系统中的临床应用。方法利用Primer 5.0软件设计引物,扩增谷氨酸脱羧酶65(GAD65)的部分蛋白质编码区(CDS)并克隆至pFastBac1载体中,经测序验证后在SF9细胞中表达。采用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定所得蛋白。利用该蛋白制备一种用于1型糖尿病检测的试剂盒,将其运用于化学发光检测系统,计算阳性检出率,并比较化学发光检测系统与蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)阳性检出率的差异。结果成功表达了与GAD65抗体特异结合的抗原蛋白质,SDS-PAGE显示其相对分子质量为65000,与预测值相符;亲和层析纯化后蛋白纯度≥95%。所制备的化学发光检测试剂盒的阳性检出率明显高于Western blotting〔78.95%(30/38)比52.63%(20/38),P<0.05〕。结论GAD65抗体特异结合抗原蛋白纯度高、特异性强,利用该蛋白制备的相应试剂盒可应用于化学发光检测系统,提高了GAD65抗体的阳性检出率和对1型糖尿病的诊断效率,避免传统检测方法的漏检,值得在临床推广。

AutolumiS 3000型化学发光分析仪温度控制系统的结构和功能分析

温度控制(温控)系统是全自动化学发光免疫分析仪最重要的子系统之一,可保证检测过程中样本和试剂的质量,并为反应液提供适宜温度环境,使化学反应更充分,从而获得可靠的检测数据。本文介绍一种用于AutolumiS 3000型全自动微粒子化学发光分析仪的温控系统,该系统根据样本的检测需求,采用恒温空气干浴方式通过多个独立温控模块对温度进行调控,改善了控制系统的性能,避免了因温度变异引起的结果异常。该系统孵育区与测量区温度可分别精确控制在(37.0±0.5)℃和(33.0±1.0)℃,试剂区可保持在8~12℃,在临床应用中表现出良好的稳定性和高控制精度。

全自动粒子化学发光法在梅毒抗体筛查中的应用与分析

目的评价威高Autolumis 3000微粒子化学发光分析仪在梅毒特异性抗体筛查试验中的特异度。方法对梅毒特异性抗体的检测结果进行回顾性分析。采用威高Autolumis 3000梅毒特异性抗体检测试剂,对2018年3月至2019年3月大连医科大学附属威海市立医院36854例患者的血清标本进行检测。对初筛结果阳性标本附加甲苯胺红不加热血清试验(TRUST),再采用梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)进行复检,并对TPPA试验复检结果为阴性的样本采用免疫印迹法(Western blot)进行确证。采用SPSS软件进行检测结果的数据统计分析。结果36854份血清标本中,微粒子化学发光免疫法共初筛检出阳性标本544份。TRUST试验复检阳性314份,阴性230份。经TPPA试验复检后,检出阳性标本526份,阴性标本18份;对18份TPPA阴性结果的血清标本,采用Western blot试验确证,检测结果为阳性2份,不确定样本5份,阴性11份。Autolumis 3000微粒子化学发光法检测梅毒特异性抗体的特异度为99.97%。结论微粒子化学发光免疫法检测梅毒特异性抗体的特异度高,对初筛阳性标本选用TPPA试验作为补充试验进行复检,可有效提高梅毒检出的准确性。

全自动免疫分析仪检测丙型肝炎抗体的性能评价

目的:评价威高AutolumiS3000型全自动免疫分析仪对丙肝抗体(抗-HCV)的分析性能评价。方法:收集住院及门诊患者的血清标本119份,其中无反应性样本40份、有反应性样本59份以及确诊样本20份,依据国家卫生行业标准《临床定性免疫检验重要常规项目分析质量要求》(WST494-2017)的要求,采用AutolumiS3000型全自动免疫分析仪,以丙型肝炎为检测项目,对检测抗-HCV的精密度、检出限、阴阳性符合率等性能以雅培i2000型全自动化学发光仪为参照进行验证试验。结果:AutolumiS3000型全自动免疫分析仪检测抗-HCV的批内及批间精密度(CV%)均符合要求;室间质量评价(EQA)留样再检测符合率为100%;检出限为0.15 NCU/ml;阴阳性符合率为100%;检测抗-HCV无反应性、吸光度与临界值之比(S/CO)≥8.0时样本结果与i2000的符合率均为100%,S/CO为1.01～4.0和4.01～8.0时,样本结果的符合率为13.3%和55.6%;22例抗-HCV反应性标本重组免疫印迹试验(RIBA)确证结果:确认阳性3例,不确定8例,其余为阴性。结论:AutolumiS3000型全自动免疫分析仪检测抗-HCV的分析性能良好,能满足临床需求,适用于临床标本的常规检测,对于弱阳性样本,建议进行补充实验来明确诊断。

AutolumiS 3000型全自动微粒子化学发光分析仪加样系统的结构设计

化学发光分析仪是临床实验室中常用的自动化检测仪器,该仪器可减少手工操作环节,加快检测速度,缩短检测时间。自动加样系统作为化学发光分析仪的关键组成部分,对待测物及试剂加样的精确程度将直接影响分析标本的结果[1-2]。通过分析微量液体加样装置的工作原理,设计出AutolumiS 3000型全自动微粒子化学发光分析仪微量液体精确加样装置,较大幅度提高了检验准确性和结果可靠性。

大型海藻的降血压活性研究进展

1960年以来,我国因患高血压而死亡的人数逐年增加,而且高血压疾病也越来越低龄化,同时高血压更是很多高危疾病的并发症,较难治愈,逐渐成为威胁人类健康的一大杀手。海洋中的大型海藻种类丰富且有很高的降血压活性,该文综述大型海藻的种类、降血压作用机制及测定方法、大型海藻在降血压方面的研究现状及展望,以期为海洋降血压药物和保健品的开发提供借鉴。

AutolumiS 3000型全自动化学发光测定仪故障分析与维护保养

AutolumiS 3000全自动化学发光测定仪(威海威高生物科技有限公司)于2011年上市,该设备利用微粒子化学发光免疫分析技术,运行最快速度为300测试/h,现拥有检测项目65项,具有较高的灵敏度、特异性和稳定性[1]。同时,该设备可进行随机、连续和优先运行操作模式,既可检测大分子物质,也可检测小分子物质[2-3]。

全自动化学发光仪检测血清脂蛋白相关磷脂酶A2的性能评价

目的验证全自动化学发光仪检测血清脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)的性能。方法参考美国临床和实验室标准化协会颁布的系列文件和《医疗机构临床实验室管理办法》相关文献设计验证方案,对Autolumi S3000全自动化学发光仪检测Lp-PLA2的精密度、可报告检测范围、准确度、参考区间进行验证评价。结果全自动化学发光仪检测Lp-PLA2的批内精密度变异系数为3. 45%~3. 82%,批间精密度变异系数为3. 90%~4. 39%,均小于说明书中声明的10%,通过验证。根据可报告检测范围验证结果计算得线性方程为Y=0. 987X-29. 012,相关系数r^2=0. 995 7,结果显示在厂家声明的0. 1~1 000. 0μg/L范围内线性相关良好,验证通过。准确度验证结果显示检测后实测平均值均落在理论浓度±10%允许偏差范围内;测试均值计算线性方程为Y=0. 975X+16. 365,相关系数r^2=0. 989 8;在新鲜血清中分别加入20、50、100μl的本验证质控品,进行回收试验,对质控品的回收率分别为98. 3%、101. 2%和108. 6%,均在规定范围内,准确度验证通过。本研究纳入的200份健康体检者血清验证结果最低值为58. 1μg/L,最高值为191. 0μg/L,都在厂商提供的41. 24~199. 28μg/L参考区间之内,也符合相关法规要求,说明该参考区间适用于本实验室。结论 Autolumi S3000全自动化学发光仪检测Lp-PLA2的主要性能与厂家提供的资料和要求基本一致,且符合相关标准,可以满足临床应用。