静动脉血二氧化碳分压差联合下腔静脉呼吸变异度在脓毒性休克患者容量复苏中的价值

目的探讨静动脉血二氧化碳分压差联合下腔静脉呼吸变异度在脓毒性休克患者容量复苏中的价值。方法选取收治的脓毒性休克患者作为研究对象,进行前瞻性观察性研究,在患者入重症监护病房(ICU)时,复苏6、12、24 h后测量患者心率(HR)、中心静脉压(CVP)、平均动脉压(MAP)、乳酸(Lac)、下腔静脉呼吸变异度(VIVC)、静动脉血二氧化碳分压差(Pcv-aCO_2)水平;根据患者28 d病死率分为死亡组和存活组,比较2组患者复苏24 h乳酸清除率、VIVC、Pcv-aCO_2、急性生理和病理评分(APACHEⅡ评分)、感染相关器官功能衰竭评分(SOFA评分)等指标。通过ROC曲线分析Pcv-aCO_2联合VIVC的应用价值。结果复苏6、12、24 h时患者MAP、VIVC、Lac及Pcv-aCO_2水平均较复苏前明显改善,且差异有统计学意义(P <0. 05);死亡组患者复苏24 h的APACHEⅡ评分、SOFA评分、VIVC及Pcv-aCO_2水平显著高于存活组(P <0. 05),且死亡组患者乳酸清除率显著低于存活组(P <0. 05);高Pcv-aCO_2组患者APACHEⅡ评分、SOFA评分、VIVC及死亡率均显著高于低PcvaCO_2组(P <0. 05),乳酸清除率显著低于低Pcv-aCO_2组(P <0. 05);高VIVC组患者APACHEⅡ评分、SOFA评分、Pcv-aCO_2及死亡率均显著高于低VIVC组(P <0. 05),乳酸清除率显著低于低VIVC组(P <0. 05)。结论在脓毒性休克患者容量复苏过程中采用Pcv-aCO_2联合VIVC检测可有效提高患者预后质量,具有较高的临床应用价值。

乌司他丁对心肺复苏后大鼠肾功能的影响

目的观察不同剂量乌司他丁(UTI)对心肺复苏(CPR)后大鼠不同时相肾功能的影响。方法将40只雄性SD大鼠随机分为5组:假手术组(S组),生理盐水组(NS组),乌司他丁U1(5万U/kg)组,乌司他丁U2(10万U/kg)组,乌司他丁U3(20万U/kg)组。采用窒息法建立CPR大鼠模型后,按不同处理方法给药,采集自主循环恢复(ROSC)即刻(T0)、ROSC后6 h(T6)、ROSC后24 h(T24)的大鼠静脉血标本,检测血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)水平;采用ELISA法检测血清中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)水平。结果 S组血BUN、Cr在不同时相比较差异无统计学意义(P>0.05);各组血NGAL在T0时的差异无统计学意义(P>0.05);与S组比较,NS组、U1组、U2组、U3组在T6时血BUN、Cr及NGAL均显著升高(P<0.05);与NS组比较,U1组、U2组、U3组在T6、T24时血BUN、Cr及NGAL均显著降低(P<0.05);U2组、U3组在T6时血BUN、Cr及NGAL均显著低于U1组(P<0.05);与U2组比较,U3组在T6时血BUN、Cr及NGAL均显著降低(P<0.05)。结论乌司他丁对心肺复苏后大鼠肾功能有一定保护作用,具有重要的临床意义。

一种实用的β-分泌酶表达、纯化和活性鉴定方法

目的 探讨一种在常用真核细胞系中表达、纯化和鉴定阿尔茨海默病（AD）相关蛋白-β-分泌酶（BACE1）的方法. 方法 在从人脑基因库中获取BA CE1序列并成功扩增的基础上,将其插入带有增强绿色荧光蛋白（EGFP）的表达载体pEGFP-c3中.将BACE1/pEGFP-c3重组质粒用脂质体转染至HEK293细胞中表达,再通过TALON亲和色谱法分离纯化及酶切得到BACE1蛋白.用Western blotting及荧光共振能量共振转移（FRET）法鉴定BACE1的表达和体外活性.同时将BACE1/pEGFP-c3质粒与表达淀粉样前体蛋白（APP）的重组质粒（APP/pDsRed-Monomer-N1）共转染HEK293细胞,再以Western blotting法检测BACE1切割底物APP的效果. 结果 （1）实验获得的BA CE1基因与GenBank中的序列一致.（2）活性测定表明,空白对照组、标准BACE1阳性对照组、纯化的BACE1实验组的荧光强度分别为55.013 ±3.597、2639.548±207.190和1836.629±154.195,差异有统计学意义（F=78.681,P=0.000）,其中后2组差异无统计学意义（P＞0.05）.（3）Western blotting结果显示转染的BACE1在细胞内可切割底物APP并产生CTF-APP条带. 结论 本实验方法可成功获取BA CE1基因片段并在HEK293细胞中高效表达,同时具备生物学活性,可为AD临床药物的开发提供物质基础.