重组抗原p29免疫保护小鼠细粒棘球蚴感染的差异长链非编码RNA的筛选研究

目的研究在筛选重组抗原p29诱导的免疫保护下细粒棘球蚴感染宿主后长链非编码RNA(lncRNA)差异分子的意义。方法将45只BALB/c小鼠随机分为空白对照组、感染组和p29免疫+感染组。p29免疫+感染组小鼠重组抗原p29免疫3次,末次免疫7周后,采用细粒棘球蚴原头蚴腹腔感染小鼠(包括感染组、p29+感染组);感染24周后,采集小鼠血液,密度梯度离心法获得外周血单个核细胞(PBMCs)。经Trizol提取总RNA后,采用Magnetic Core试剂盒构建lncRNA文库,通过HiSeq 2 000高通量测序与生物信息学方法筛选差异表达的lncRNA。最后,采用qRT-PCR验证候选lncRNA分子。结果高通量测序及生物信息学分析结果表明,与空白对照组相比,感染组小鼠PBMCs中有14个lncRNA显著差异分子(P<0.05);与感染组相比,p29+感染组外周血PBMCs细胞中有30个差异表达的lncRNA(P<0.05);进一步经qRT-PCR验证,确定XLOC-012763、INTE-015204与INTE-028446是p29+感染组的候选差异lncRNA。结论此研究筛选出p29免疫保护细粒棘球蚴感染小鼠PBMCs中的3个lncRNA差异分子,丰富了p29免疫保护理论机制,为其后续作为疫苗应用开发奠定了基础。