病案教学法在病理生理学教学中的实践

目的探讨病案教学法(casebasedstudy,CBS)在病理生理学教学中的应用效果。方法对实施CBS的学生进行问卷调查,评价CBS在病理生理学教学中的满意度及其优缺点。结果发放问卷调查表共计270份,收回有效调查表259份,回收率95.93%。91.5%的学生完全同意或同意此教学法能激发学生学习的热情,对学习内容更感兴趣;92.7%的学生完全同意或同意此教学法能提高学生参与课堂教学的主动性;84.9%的学生完全同意或同意能提高学生的语言表达和交流能力;83.3%的学生同意或完全同意能挖掘学生的潜力,有利于培养临床思维能力;60.6%的学生同意或完全同意有利于提高学生听课效率。结论CBS可激发学生的学习热情,提高他们参与课堂教学的主动性;充分挖掘学生潜能培养他们的临床思维;同时也有利于教师的综合素质提高。

苦参素对感染性休克大鼠肺组织NF-κB等细胞因子的影响

目的:观察苦参素(oxymatrine,OMT)对感染性休克大鼠肺组织NF-κB等细胞因子的影响。方法:采用大鼠盲肠节扎穿孔法(CLP)复制大鼠感染性休克模型,随机将56只大鼠分为假手术组、OMT对照组、模型(CLP)组、CLP+OMT高、中、低剂量组、阳性对照(CLP+地塞米松)组。采用免疫组化法检测肺组织NF-κB(p65)及IkB-α的活性;放射免疫分析法测定肺组织匀浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)的含量改变。结果:OMT能显著抑制肺组织NF-κB(p65)及IkB-α的活性(P<0.05),降低肺组织匀浆中TNF-α及IL-6的含量(P<0.05),并提高动脉血PaO2,SaO2含量,降低PaCO2,HCO3-含量;降低肺组织W/D比值及肺系数(PWI)。结论:OMT能通过抑制诱导NF-κB的激酶(NF-κB-inducing Kinase,NIK)的活化从而抑制细菌、病毒等对NF-κB的激活作用,减少TNF-α,IL-6等促炎因子的表达,进而对感染性休克大鼠肺损伤性病变发挥治疗作用。

冠心病患者同型半胱氨酸与PPARα γ mRNA、蛋白表达相关性分析

目的探讨冠心病患者同型半胱氨酸与过氧化体增殖剂激活的受体的关系。方法采用高效液相色谱法测定287例冠心病患者和50例健康体检者(健康对照组)空腹血清Hcy的水平,根据测量结果将冠心病患者Hcy的水平分为冠心病Hcy正常、轻、中、重组,实时RT-PCR、westernblot检测各组血浆单核细胞PPARα、PPARγ mRNA和蛋白表达。结果冠心病轻、中、重组患者的PPARα、PPARγ mRNA、蛋白表达明显低于健康对照组(P<0.05)和冠心病Hcy正常组(P<0.05),并与Hcy呈明显负相关。结论冠心病患者Hcy较高而PPARα、PPARγ等的表达较低,提示高Hcy血症通过某种方式抑制PPARα、PPARγ等的表达,是其导致动脉粥样硬化的机制之一。

实验大鼠动脉粥样硬化模型的建立

目的建立一种简单易行的动脉粥样硬化的大鼠模型。方法雄性SD大鼠在高脂饮食的基础上给予维生素D3肌注和尼古丁灌胃,4周后观察各组动物血浆总胆固醇、高密度脂蛋白的变化和主动脉斑块形成情况。结果模型组血浆总胆固醇比正常对照组增高652%,高密度脂蛋白降低44%,且有明显的动脉斑快形成。结论高脂饮食辅以维生素D3肌注和尼古丁灌胃是一种简单快速的大鼠动脉粥样硬化模型的复制方法。

苦参碱对人单核细胞内三磷酸腺苷结合盒转运体A1及胆固醇酯的影响

目的观察苦参碱对人单核细胞胆固醇和三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)表达的影响。方法用TBARS法检测细胞内MDA,油红O染色法检测泡沫细胞的形成,荧光分光光度法检测细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量,RT-PCR和Western blot检测ABCA1mRNA与蛋白的表达。结果单核细胞经佛波脂(PMA)及ox-LDL共同孵育后,细胞内积聚的总胆固醇、游离胆固醇、胆固醇酯及脂质过氧化产物均明显增多(P<0.05),有大量泡沫细胞形成,而ABCA1蛋白、mRNA水平明显减少(P<0.05);苦参碱干预组显著缓解上述变化,细胞内胆固醇酯减少,ABCA1 mRNA、蛋白表达明显增加(P<0.05)。结论苦参碱可能通过增强ABCA1的表达和降低细胞内胆固醇聚积而发挥抗动脉粥样硬化的作用。

氧化苦参碱对大鼠血管平滑肌细胞钙化抑制作用的研究

目的观察氧化苦参碱(Oxymatrine,OMT)对血管钙化的影响,探讨血管钙化的发生机制。方法以β-甘油磷酸盐诱导大鼠主动脉平滑肌细胞(VSMCs)钙化,OMT干预。采用磷酸苯二钠法测定碱性磷酸酶(ALP)活性,Von Kossa染色鉴定细胞钙化,比色法测定细胞钙含量,硫代巴比妥酸法测定细胞丙二醛(MDA)含量。结果β-甘油磷酸盐可诱导VSMCs发生钙化,钙化组细胞总钙含量、ALP活性和丙二醛含量明显增高,OMT呈浓度依赖性地降低细胞总钙含量、ALP活性和丙二醛含量,VSMCs的钙化程度亦明显减轻。结论OMT能有效抑制β-甘油磷酸盐诱导的大鼠主动脉VSMCs钙化,其机制可能与减轻细胞的氧化损伤有关。

绿茶对实验大鼠血管钙化的影响

目的观察饮用绿茶对大鼠血管钙化的影响及其可能机制。方法用肌注维生素D3和灌胃尼古丁诱导大鼠血管钙化模型。实验分为对照组、钙化组、低剂量和高剂量绿茶干预组。Von Kossa染色,原子吸收分光光度法测定钙含量,放射免疫分析法测定血浆、血管骨钙素(osteocalcin,OC)、血管紧张素Ⅱ(angiotensin II,AngⅡ)及碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性。结果钙化组大鼠血管染色见平滑肌细胞内和细胞间基质有大量黑色颗粒聚集;与对照组相比,主动脉钙含量、ALP活性、OC和AngⅡ含量均有明显增加;采用50g/L和100 g/L绿茶防治大鼠均可抑制血管钙化,且高剂量时效应强于低剂量;与钙化组相比较,血管组织钙化指标均下降,而主动脉AngⅡ含量亦有减少。结论饮用绿茶可能部分通过拮抗血浆和血管组织局部的AngⅡ系统效应而产生抑制大鼠血管组织钙化的作用。

苦参碱对单核细胞源性泡沫细胞形成及PPAR-γ,caveolin-1表达的影响

目的:观察苦参碱对ox-LDL诱导的单核细胞源性泡沫细胞内胆固醇脂和PPAR-γ,小凹蛋白-1表达的影响.方法:用荧光分光光度法测定胆固醇浓度;采用TBARS法检测细胞内脂质过氧化产物;用油红O染色法检测泡沫细胞的形成;用荧光RT-PCR和Western Blot检测PPARγ,caveolin-1的表达.结果:单核细胞经PMA及oxLDL共同孵育后,细胞内形成大量脂滴,胆固醇酯(CE)和细胞内脂质过氧化产物(MDA)含量由(3.4±0.6)mg/L,(0.43±0.07)nmol/L升至(64.8±6.8)mg/L,(8.50±1.23)nmol/L(P<0.05),泡沫细胞由(4.7±2.2)%升至(77.8±7.0)%(P<0.05),而PPAR-γ mRNA和PPAR-γ,小凹蛋白-1蛋白表达由(4.4±0.8),(0.5±0.09),(0.6±0.09)降至(1.6±0.4),(0.33±0.09),(0.33±0.09)(P<0.05),苦参碱低、中、高干预组细胞内积聚的CE和MDA含量分别为(29.7±4.9)mg/L,(1.92±0.46)nmol/L,(5.8±1.3)mg/L,(0.6±0.08)nmol/L,(3.4±0.6)mg/L,(0.43±0.07)nmol/L;泡沫细胞为(46.2±5.8)%,(16.3±3.4)%,(4.8±1.5)%,PPAR-γ mRNA和PPAR-γ,小凹蛋白-1蛋白表达为(6.4±2.2),(0.6±0.08),(0.5±0.09),(7.4±2.2),(0.6±0.08),(0.6±0.07),(8.6±2.7),(0.6±0.06),(0.7±0.06),与ox-LDL+PMA组比较有显著性差异(P<0.05).结论:苦参碱减少ox-LDL诱导的单核细胞源性泡沫细胞的形成及细胞内胆固醇聚集,增加泡沫细胞内PPAR-γ,小凹蛋白-1的表达.