邻苯二甲酸单己酯和邻苯二甲酸单丁酯联合染毒对小鼠睾丸间质细胞氧化应激的影响

目的探讨邻苯二甲酸单(2-乙基)己酯(mono 2-ethylhexyl phthalate,MEHP)和邻苯二甲酸单丁酯(monobutyl phthalate,MBP)联合染毒致体外培养的小鼠睾丸间质细胞(TM3)的氧化应激损伤。方法用浓度为0(对照组)、1、10、100、500、1000μmol·L^(-1)不同浓度梯度的MEHP和MBP作用于小鼠睾丸间质细胞48h后,以MTT法测定细胞活力,比色法测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量。结果 MEHP和MBP联合染毒对TM3细胞抑制率升高,增殖抑制存在交互作用,表现为协同作用;对细胞内的SOD水平和MDA水平的影响存在交互作用,使细胞内的SOD活性降低,呈现协同作用,使细胞内的MDA水平升高,呈现协同作用。荧光倒置电镜结果显示,高剂量染毒可见大部分细胞死亡,剩余细胞肿胀堆积、变暗,间隙更大。结论 MEHP和MBP联合染毒对小鼠睾丸间质细胞的增殖有抑制作用,并诱导小鼠睾丸间质细胞发生氧化应激反应,表现为脂质过氧化水平的增高,同时伴有抗氧化水平的降低。

银川市某高中学生睡眠时间、睡眠质量与血压的中介效应分析

目的对睡眠质量和睡眠时间与血压的关系进行分析,为预防青少年高血压提供参考依据。方法整群抽取宁夏银川市某高中2116名学生,进行匹兹堡睡眠质量指数量表(PSQI)问卷调查并测量血压。结果调查对象的平均收缩压为(119.270±8.551)mmHg,平均舒张压为(69.760±7.109)mmHg,平均睡眠时间为(6.412±0.977)h,平均睡眠质量分数为(6.803±2.445)分。收缩压和睡眠质量、睡眠时间呈正相关,舒张压和睡眠质量呈正相关(P均<0.05)。在睡眠质量与收缩压或舒张压的关系中,睡眠时间的中介效应不显著。在睡眠时间与收缩压的关系中,睡眠质量的中介效应显著。结论睡眠时间对收缩压的影响可能是通过睡眠质量实现的。在睡眠对血压的影响中,睡眠质量可能起主要作用。

DEHP低剂量慢性暴露对雌性大鼠糖代谢的影响

[目的]观察邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)低剂量慢性暴露对雌性大鼠糖代谢的影响。[方法]将24只SPF级雌性SD大鼠随机分为4组,分别为0、3、30、300 mg/kg(以体重计,后同)DEHP染毒组,每组6只,采用喂饲的方式连续染毒46周,定期测量大鼠空腹血糖,并记录体重变化。于末次染毒24 h后,称量大鼠体重,分别进行口服葡萄糖耐量试验(OGTT)、胰岛素耐量实验(ITT),计算曲线下面积(AUC);随后水合氯醛麻醉,心尖取血处死,取肝脏、胰腺、生殖器周围白色脂肪、腓肠肌称重,并保存于10%(体积分数)中性福尔马林中固定,用于组织病理形态观察(腓肠肌除外)。[结果]DEHP染毒期间,各组大鼠均未出现明显毒作用表现。与0 mg/kg组比较:(1)各实验组大鼠体重差异均无统计学意义(P>0.05)。(2)300 mg/kg组大鼠肝脏脏器系数升高(P<0.05),其余剂量组均无统计学差异(P>0.05);各实验组胰腺、生殖器周围白色脂肪、腓肠肌脏器系数差异均无统计学意义(P>0.05)。(3)DEHP暴露18周后,300 mg/kg大鼠空腹血糖升高(P<0.05),其他时点各组差异均无统计学意义(P>0.05);各组HOMA-IR、ISI、血清胰岛素水平差异均无统计学意义(P>0.05)。(4)OGTT结果显示,雌性大鼠300 mg/kg组服糖后血糖浓度峰值出现早[15 min出现峰值(P=0.004)],而服糖后60、120 min时血糖浓度明显下降(P=0.038,P=0.039),且服糖后120 min血糖浓度低于空腹水平,血糖AUC降低(P=0.040);ITT实验结果显示,30 mg/kg组血糖值在15 min时明显低于0 mg/kg组(P=0.029),300 mg/kg组血糖值下降较为明显,在60、120 min时血糖值下降超过空腹血糖的50%(P=0.017,P=0.038),且恢复至空腹血糖值缓慢,300 mg/kg组血糖AUC降低(P=0.028)。肝脏病理形态结果显示:各DEHP染毒组大鼠肝细胞出现不同程度增大、水肿,间质疏松,可见不同程度胆管周围炎。胰腺病理形态结果显示:各DEHP染毒组大鼠胰岛面积减小、细胞数量减少。生殖器周围白色脂肪病理形态结果显示各DEHP染毒组大鼠脂肪细胞不同程度缩小、大小不一,细胞排列不整齐。[结论]DEHP低剂量慢性暴露可能导致雌性大鼠发生胰岛素抵抗。

西维因与氰戊菊酯联合染毒对大鼠肝脏脂质过氧化的影响

目的探讨西维因与氰戊菊酯联合染毒对大鼠肝脏脂质过氧化作用的影响。方法将80只健康成年清洁级SD大鼠按2×2析因设计随机分为4组,分别为阴性对照(玉米油)组、西维因单独染毒组(1/50 LD_(50),11.2 mg/kg)、氰戊菊酯单独染毒组(1/50 LD_(50),9.02 mg/kg)和西维因(11.2 mg/kg)+氰戊菊酯(9.02 mg/kg)染毒组,每组20只,雌雄各半。采用经口灌胃方式进行染毒,每天1次,每周6天,连续染毒8周。末次染毒24 h后,测量大鼠肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽S转移酶(GST)活力和还原性谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量。结果西维因和氰戊菊酯联合染毒使雄鼠肝脏中SOD活力下降(P<0.05)、MDA含量升高(P<0.05),雌鼠肝脏中GSH含量下降(P<0.05),交互效应均有统计学意义,对SOD、GSH表现为拮抗作用,对MDA表现为协同作用;其它指标交互作用均无统计学意义(P>0.05)。结论西维因和氰戊菊酯联合染毒对大鼠肝脏存在联合毒性作用,可能是通过破坏氧化-抗氧化系统的平衡,产生氧化损伤作用。

MBP、MEHP诱导小鼠睾丸间质细胞自噬过程中PTEN的相关研究

[目的]目前对于邻苯二甲酸酯的研究多集中于其原型,但有学者认为,邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸二乙基己基酯的毒性作用可能是其在体内的代谢产物邻苯二甲酸单丁酯(MBP)和邻苯二甲酸单乙基己酯(MEHP)所致。本研究拟探讨MBP和MEHP对小鼠睾丸间质细胞(TM-3)自噬的影响以及与第10号染色体缺失的同源性磷酸酶-张力蛋白(PTEN)的相关研究。[方法]体外培养TM-3并取其对数生长期,预实验设置毒物浓度梯度为0(对照组)、50、100、200、400、800μmol/L,染毒24 h后,利用改良寇氏法计算MBP、MEHP的半数致死浓度(IC50)后,确定实验染毒浓度为0(对照组)、200、400、800μmol/L。分别采取CCK-8法检测不同毒物剂量和不同染毒时间对细胞存活率的影响;透射电镜观察400μmol/L的MBP、MEHP诱导24 h后具有双层膜状结构的自噬小体;单丹黄酰尸胺(MDC)免疫荧光法检测细胞自噬囊泡的荧光信号强度;采用Western blot技术检测自噬标志蛋白LC3、p62和自噬调节相关蛋白PTEN的表达水平。[结果] CCK-8结果显示:与对照组相比,随着MBP、MEHP染毒剂量增高,细胞存活率降低(P<0.05)。透射电镜结果显示:400μmol/L MBP、MEHP染毒24 h后细胞内可见具有双层膜状结构的自噬小体。MDC法检测结果显示:与对照组相比,200μmol/L MBP、MEHP染毒组荧光信号强度差异无统计学意义(P>0.05);400、800μmol/L MBP染毒组荧光信号强度分别增加了9.0、16.8倍;400、800μmol/L MEHP染毒组荧光信号强度增加了16.3、26.4倍,差异均有统计学意义(P<0.01)。Western blot结果显示:200μmol MBP、MEHP染毒组LC3II/LC3I、PTEN表达水平与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);400、800μmol/L MBP染毒组LC3II/LC3I蛋白表达水平分别增加了7.5、13.6倍,PTEN表达水平增加了4.8、15.4倍;400、800μmol/L MEHP染毒组LC3II/LC3I蛋白表达水平增加了4.5、9.8倍,PTEN表达水平增加了5.7、14.4倍(P<0.05);200μmol/L MBP染毒组p62表达水平与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),400、800μmol/LMBP染毒组p62蛋白表达水平分别降低了43%、72%;200、400、800μmol/L MEHP染毒组p62蛋白表达水平也分别降低了55%、80%、88%(P<0.01)。[结论]一定剂量的MBP、MEHP可提高TM-3细胞自噬水平,并且PTEN表达水平与细胞自噬水平呈正相关趋势。

邻苯二甲酸单丁酯和邻苯二甲酸单乙基己酯联合染毒对小鼠睾丸间质细胞自噬水平的交互作用

目的探讨邻苯二甲酸单丁酯(MBP)和邻苯二甲酸单乙基己酯(MEHP)染毒对小鼠睾丸间质细胞的自噬的影响以及MBP+MEHP联合染毒的交互作用分析。方法将处于对数生长期的TM-3细胞分别暴露于0(对照)和400μmol/L的MBP、MEHP及400μmol/L MBP+400μmol/L MEHP溶液中;染毒24、36、48 h后,采取CCK-8法检测细胞的存活率;染毒24 h后,采用单丹黄酰尸胺(MDC)免疫荧光法检测细胞自噬囊泡的荧光信号强度;染毒24 h后,采用Western blot法检测自噬标志蛋白LC3和p62的表达水平。结果与对照组相比,MBP和(或)MEHP染毒TM-3细胞的存活率均下降,自噬囊泡的荧光信号强度均增高,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达水平升高,p62蛋白表达水平均降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。MBP和MEHP联合染毒对TM-3细胞的存活率、自噬囊泡的荧光信号强度、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和p62蛋白表达水平具有交互作用,具体均表现为拮抗作用(P<0.01)。结论MBP和(或)MEHP体外染毒均可诱导TM-3细胞自噬水平升高,MBP和MEHP联合染毒交互作用表现为拮抗作用。