对医学院校实验室建设与管理模式的探讨

医学院校实验室是培养医学生创新能力、实践动手能力和操作能力、实施素质教育的重要场所,同时也是医学院校教师和实验技术人员进行实验教学、科研项目研发及创新的重要基地。高等医学院校实验室的建设对医学人才的培养、社会经济稳步的发展、现代智能社会的建设具有深刻的影响。该文就医学院校实验室管理现状与模式、实验室师资队伍建设、实验室制度建设及实验室安全管理等方面进行探讨,并结合实验室存在的问题进行了一些探讨。

医学院校实验室安全制度建设与管理探讨

实验室安全是科学研究和教学实践的前提,同时也关乎着国家财产及人民健康的安全。基于医学院校实验室安全工作现状,就安全管理规章制度、安全指标、安全检查、安全设备投入、安全教育、安全意识、信息化建设等工作的具体做法,提出了医学院校在实验室安全制度与管理中存在的问题以及改进的相应措施,对进一步探讨实验室安全制度建设与管理的策略、使实验室安全管理工作适应医学院校发展需求,促进实验室安全管理提供有益的启示和依据。

医学院校实验室大型仪器设备使用及管理探讨

大型仪器设备在高等院校学科建设、人才培养、实验教学、科技研发与创新及社会服务中发挥着至关重要的作用,也是医学院校综合办学实力的重要评估指标之一。随着科研项目和实验经费的不断增加,大型仪器设备的类型和数量也在逐渐增长,医学院校大型仪器设备的使用及管理问题也逐渐凸显。本文回顾了医学院校大型仪器设备使用及管理现状,探讨了大型仪器设备使用及管理的对策,提出了相应的改进措施及建议。

病理学实验室建设与管理模式探讨

高等医学院校对医学人才的培养、社会经济稳步的发展、现代的智能的社会构建有着重要意义。实验教学是医学院校课程构成的重要组成部分,而病理学实验室是基础教育与临床诊断的融汇点,也是初步培养医学生认识与鉴别疾病种类的重要场所。目前病理学实验室中存在的一些问题,我们应该从改善实验室教学环境、实验标本的建设和管理、实验室安全、实验室开放及实验室队伍建设等方进行了一系列的探讨,为提高病理教学效果提供参考。

银川市某高中学生睡眠时间、睡眠质量与血压的中介效应分析

目的对睡眠质量和睡眠时间与血压的关系进行分析,为预防青少年高血压提供参考依据。方法整群抽取宁夏银川市某高中2116名学生,进行匹兹堡睡眠质量指数量表(PSQI)问卷调查并测量血压。结果调查对象的平均收缩压为(119.270±8.551)mmHg,平均舒张压为(69.760±7.109)mmHg,平均睡眠时间为(6.412±0.977)h,平均睡眠质量分数为(6.803±2.445)分。收缩压和睡眠质量、睡眠时间呈正相关,舒张压和睡眠质量呈正相关(P均<0.05)。在睡眠质量与收缩压或舒张压的关系中,睡眠时间的中介效应不显著。在睡眠时间与收缩压的关系中,睡眠质量的中介效应显著。结论睡眠时间对收缩压的影响可能是通过睡眠质量实现的。在睡眠对血压的影响中,睡眠质量可能起主要作用。

MAPK信号通路在百草枯诱导上皮-间充质改变中的作用

目的探讨MAPK家族中P38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）、细胞外调节蛋白激酶（ERK）、c—Jun氨基端激酶（JNK）信号通路在百草枯（Paraquat，PQ）诱导的肺泡上皮细胞上皮．间质转分化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）中的作用。方法在体外培养的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞（RLE-6TN）中加入不同浓度PQ（0、25、50、100μmol／L）后共培养6、12、24ho倒置相差显微镜观察细胞形态学改变，划痕实验评估细胞迁移能力，免疫印迹法（Westernblot）检测上皮及间质细胞表型蛋白表达（上皮细胞表型蛋白：E—cad、ZO-1，间质细胞表型蛋白：Vimentin、a—SMA）、MAPK信号通路关键蛋白的表达（P-p38MAPK、P-Erkl／2、P-JNK），实时荧光定量PCR（RT—PCR）检测成纤维细胞，肌成纤维细胞（MFB／FB）主要产物COL-Ⅰ、COL—Ⅲ、Fn和EMT来源的成纤维细胞标志物FSP-1的基因表达。结果100μmol／LPQ分别处理6、12、24h，细胞由卵圆形或多边形的上皮细胞变成长梭形的间质细胞，细胞间连接消失，且时间越长形态学改变越明显。与对照组比较，50、100、200、300μmol／LPQ处理24h的细胞存活率明显下降，200μmol／LPQ作用于细胞的时间越长（6、12、24、36、48h），细胞存活率越低；与对照组比较，50、100μmol／LPQ诱导上皮细胞标记蛋白E-cad、ZO-1蛋白表达下调，且下调的趋势随时间延长更加明显，差异有统计学意义（P〈0．05）；同时，随着PQ诱导剂量的升高、时间的延长，间质细胞标记蛋白α-SMA、vimentin蛋白表达逐渐升高，差异有统计学意义（P〈0．05）。划痕实验结果显示，与对照组比较，100μmol／LPQ处理24h后的细胞迁移能力明显增强，差异有统计学意义（P〈0．05）；与对照组比较，100μmol／LPQ诱导细胞24h后，P-p38MAPK、P-JNK及P-Erk1／2蛋白表达显著上调，差异有统计学意义（P〈0．05），分别给予上述蛋白的抑制剂进行干预后，蛋白磷酸化水平较诱导组均明显降低，差异有统计学意义（P〈0．05）；RT-PCR结果显示，与对照组比较，PQ促进了Fn、COL-Ⅰ、COL—Ⅲ、FSP-1mRNA表达水平，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论PQ诱导肺泡上皮细胞通过EMT转变为间质细胞，可能为MFB的一个重要来源；MAPK家族中p38MAPK、ERK、JNK信号通路参与了PQ诱导EMT的发生。

PKCα/β通过调控紧密连接蛋白参与百草枯致脑微血管内皮细胞的通透性异常

目的 探讨经典型蛋白激酶C(cPKC:PKC α、PKC β)是否通过调控紧密连接蛋白(tight Junction,TJ)的表达,引起百草枯(paraquat,PQ)致小鼠脑微血管内皮细胞通透性的异常。 方法 体外培养小鼠脑组织来源的血管内皮细胞株(bEnd.3)作为单层血脑屏障模型,通过Millicell-ERS细胞电阻仪测定跨内皮细胞电阻(TEER)、荧光素钠(Na-FLU)通透性测定以评价体外血脑屏障模型的功能。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞相对存活率:终浓度0、50、100、200、300 μmol/L PQ处理细胞24 h,确定剂量-效应关系;终浓度200 μmol/L PQ分别处理细胞6、12、24、48、72 h,确定时间-效应关系。终浓度0、100、200、300 μmol/L PQ处理细胞24 h,免疫荧光(IF)和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分别测定紧密连接蛋白(ZO-1、Occludin、Claudin-5)和基因的表达水平,免疫印迹法(Western blot)测定PKC α、PKC β、p-PKC α、p-PKC β蛋白表达水平;经典PKC抑制剂(Go 6983)1 μmol/L预处理细胞1 h后,200 μmol/L PQ染毒细胞24 h,Western blot法测定ZO-1、Occludin、Claudin-5及p-PKC α、p-PKC β蛋白表达水平。 结果 bEnd. 3细胞的TEER随培养时间延长逐渐升高,于第6 d达到峰值[(114.3±6.9)Ω· cm^2],荧光素钠通透性检测显示,细胞通透性随培养时间延长逐渐降低,于第6天降至(1.7±0.2)cm/min,说明细胞屏障功能良好。与对照组比较,100、200、300 μmol/L PQ染毒组细胞存活率明显降低,200 μmol/L PQ染毒细胞12、24、48、72 h,细胞存活率明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),呈剂量依赖和时间依赖关系。IF和qRT-PCR显示,随着PQ浓度的升高,ZO-1、Occludin、Claudin-5蛋白和基因表达量明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。Western blot法检测显示,与对照组比较,PQ染毒组的p-PKC α、p-PKC β蛋白表达水平明显升高,ZO-1、Occludin、Claudin-5蛋白表达量明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);Go 6983干预组的ZO-1、Occludin、Claudin-5蛋白表达水平较染毒组明显升高,p-PKC α、p-PKC β蛋白表达水平明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。 结论 PQ通过激活cPKC(PKC α、PKC β)导致紧密连接蛋白/基因表达降低,引起小鼠脑微血管内皮细胞通透性升高。