同型半胱氨酸水平与代谢性心血管疾病相关性的meta分析

目的:通过meta分析评估同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)水平与代谢性心血管疾病发生及死亡风险的相关性。方法:计算机检索Pubmed、中国知网(CNKI)、万方数据库和维普数据库,检索时限为建库至2023年7月24日。经过文献筛选、资料提取和质量评价,采用RevMan 5.3软件进行meta分析。结果:共纳入16篇文献,其中7篇为队列研究,9篇为随机对照试验(randomized controlled trial,RCT)。队列研究meta分析结果显示,与Hcy水平正常者相比,Hcy水平较高者全因死亡率(RR=2.38,95%CI:1.71~3.32)、代谢性心血管疾病(RR=1.91,95%CI:1.46~2.49)、卒中(RR=2.26,95%CI:1.91~2.67)和冠心病(RR=2.32,95%CI:1.40~3.83)的发生/死亡风险增加;RCT研究meta分析结果显示,叶酸联合B族维生素干预可降低人体内Hcy水平(RR=-2.85,95%CI:-3.86~-1.83),但试验组和对照组全因死亡率、代谢性心血管疾病、心肌梗死和卒中的发生/死亡风险均无统计学意义(均P>0.05)。结论:队列研究结果显示,体内Hcy水平升高会增加代谢性心血管疾病的发生风险和全因死亡风险。RCT结果显示,叶酸联合B族维生素干预虽然能降低体内Hcy水平,但远期内并不能观测到对代谢性心血管疾病的影响。

医学研究生“思政+科研+教学+创业”四维教育协同育人模式研究——以宁夏医科大学为例

文章以宁夏医科大学2019级、2020级、2021级在读研究生共185人为研究对象,探究了“思政+科研+教学+创业”四维教育协同育人模式的应用效果,具体从在线平台学情数据、满意度调查问卷结果、效果调查问卷结果、期末考试成绩和创新创业情况五个方面入手进行分析,结果发现,“思政+科研+教学+创业”四维教育协同育人模式实施成效显著,但同时也存在一些问题,并提出了相应的改进措施,包括加强教学质量保障和监督管理、完善研究生创新创业教育机制和课程体系等。

miR-5088-5p在同型半胱氨酸致肝细胞焦亡中的保护作用研究

目的探讨miR-5088-5p在同型半胱氨酸诱导肝细胞焦亡中的作用。方法培养正常肝细胞,分为Control组、Hcy组、转染miR-5088-5p NC与miR-5088-5p mimic后给予Hcy干预组,采用Western blot检测焦亡相关蛋白NLRP3、caspase 1、IL-1β的表达水平;采用qRT-PCR检测miR-5088-5p的表达水平;将CBS^(+/-)小鼠和CBS^(+/+)小鼠给予高蛋氨酸饮食12周,采用全自动生化仪检测小鼠血清中Hcy水平;采用免疫荧光检测小鼠肝组织中焦亡相关蛋白的表达水平。结果与Control组相比,Hcy组NLRP3、caspase 1、IL-1β表达水平增加(P<0.01);miR-5088-5p表达水平降低(P<0.01);转染miR-5088-5p NC与miR-5088-5p mimic并给予Hcy干预后,与Hcy组相比,miR-5088-5p NC+Hcy组NLRP3、caspase 1、IL-1β表达无差异,与miR-5088-5p NC+Hcy组相比,miR-5088-5p mimic+Hcy组NLRP3、caspase 1、IL-1β表达水平明显下降(P<0.05);与CBS^(+/+)小鼠相比,全自动生化分析仪结果显示CBS^(+/-)小鼠血清Hcy水平明显升高(P<0.01),免疫荧光染色结果显示CBS^(+/-)组小鼠肝脏中NLRP3、caspase 1、IL-1β荧光强度增高(P<0.01)。结论miR-5088-5p对同型半胱氨酸诱导的肝细胞焦亡具有保护作用。

PTEN介导紫草素抑制人增生性瘢痕成纤维细胞的胶原沉积

目的从PTEN角度探讨紫草素对人增生性瘢痕成纤维细胞胶原沉积的影响。方法苏木精-伊红染色(HE染色)和马松染色(Masson染色)鉴定增生性瘢痕组织,免疫荧光鉴定人增生性瘢痕成纤维细胞(HSFBs);Western blot检测人增生性瘢痕(HS)和同一个体正常皮肤(NS)组织中PTEN表达水平;将HSFBs随机分组为:DMSO组、shikonin组、control组、si-NC组、si-PTEN组、shikonin+si-NC组和shikonin+si-PTEN组;Western blot检测各组中PTEN和胶原相关蛋白(Col1、Col3、α-SMA)的表达。结果与正常皮肤组织相比,PTEN在增生性瘢痕组织中呈低表达(P<0.05);用IC50浓度(13.46μmol/L)的紫草素干预人增生性瘢痕成纤维细胞24 h后,人增生性瘢痕成纤维细胞中Col1、Col3和α-SMA的表达降低(P<0.05),而PTEN的表达升高(P<0.05);转染si-PTEN后,与si-NC组相比,人增生性瘢痕成纤维细胞中Col1,Col3和α-SMA的表达升高(P<0.05);共转染shikonin+si-PTEN后,与shikonin+si-NC组相比,人增生性瘢痕成纤维细胞中Col1、Col3和α-SMA的表达升高(P<0.05)。结论紫草素可通过上调PTEN的表达抑制增生性瘢痕成纤维细胞的胶原沉积。

组蛋白去乙酰化酶2在衰老心肌细胞自噬水平降低中的作用

目的探讨组蛋白去乙酰化酶2(histone deacetylase 2,HDAC2)在D-半乳糖(D-galactose)诱导的衰老心肌细胞自噬水平降低中的作用。方法使用D-galactose刺激大鼠心肌细胞H9c2衰老后,β-半乳糖苷酶染色验证模型是否成功;透射电镜观察未给予D-galactose对照(control)组与给予D-galactose组的自噬情况;Western Blot检测LC3B及p62的蛋白表达;分别采用qRT-PCR与Western Blot检测control组与D-galactose组HDAC2的mRNA与蛋白表达;同时,D-galactose组干扰HDAC2的表达后,Western Blot检测HDAC2的自身表达及LC3B与p62的蛋白表达,免疫荧光染色观察LC3B的定位及表达;最后,Western Blot检测control组与D-galactose组H3K14ac的蛋白表达;D-galactose组干扰HDAC2的表达后,Western Blot检测H3K14ac的蛋白表达。结果成功复制了衰老心肌细胞模型;经过D-galactose干预后,细胞内的自噬结构较未干预组明显减少;Western Blot结果显示,LC3BⅡ/Ⅰ水平降低,p62表达升高;qRT-PCR与Western Blot结果均证实D-galactose组与control组相比HDAC2的mRNA和蛋白水平明显降低;干扰HDAC2的表达后,Western Blot结果显示干扰HDAC2后的D-galactose组(Ad-shHDAC2)与未干扰HDAC2的D-galactose组(AdshNC)相比,LC3BⅡ/Ⅰ水平降低,p62表达升高,免疫荧光染色结果显示Ad-shHDAC2与Ad-shNC相比LC3B荧光强度要低;Western Blot结果显示,D-galactose组H3K14ac水平与control组相比明显升高;干扰HDAC2的表达后,Western Blot结果显示Ad-shHDAC2组与Ad-shNC组相比,H3K14ac表达进一步增加。结论 D-galactose能够诱导衰老心肌细胞自噬水平降低,且HDAC2的表达降低介导H3K14高乙酰化水平可能是衰老心肌细胞自噬水平降低的重要机制之一。

miR-195-3p在同型半胱氨酸诱导的肝氧化应激损伤中的调控作用研究

目的 探讨miR-195-3p在同型半胱氨酸(Hcy)诱导的肝氧化应激损伤中的作用。方法 小鼠分为CBS^(+/+)组、CBS^(+/-)组、Lv-miR-195-3p组(CBS^(+/-)小鼠经尾静脉注射病毒滴度为2×10~7 TU·mL^(-1)的miR-195-3p重组慢病毒)、Lv-GFP组(CBS^(+/-)小鼠经尾静脉注射等体积病毒滴度为1×10~8 TU·mL^(-1)的绿色荧光蛋白慢病毒)和PBS组(CBS^(+/-)小鼠经尾静脉注射等体积磷酸盐缓冲液),每组10只。体外培养人源肝细胞(HL-7702),分为对照组(0μmol·L^(-1) Hcy)、Hcy组(100μmol·L^(-1) Hcy)、mimic-NC组(转染模拟物对照组)、mimic-NC+Hcy组(转染模拟物对照组+100μmol·L^(-1) Hcy)、miR-195-3p-mimic组(转染miR-195-3p模拟物)、miR-195-3p-mimic+Hcy组(转染miR-195-3p模拟物+100μmol·L^(-1) Hcy)、inhibitor-NC组(转染抑制物对照组)、inhibitor-NC+Hcy组(转染抑制物对照组+100μmol·L^(-1) Hcy)、miR-195-3p-inhibitor组(转染miR-195-3p抑制物)、miR-195-3p-inhibitor+Hcy组(转染miR-195-3p抑制物+100μmol·L^(-1) Hcy)。用实时荧光定量聚合酶链反应检测肝组织和肝细胞中miR-195-3p的表达水平,用试剂盒检测肝组织及肝细胞中丙二醛(MDA)含量和总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性。结果 Lv-miR-195-3p组、Lv-GFP组和PBS组肝组织中miR-195-3p相对表达量分别为2.29±0.67,0.73±0.09和0.57±0.27,MDA含量分别为(1.82±0.19),(0.99±0.13)和(1.19±0.18)nmol·mg^(-1) prot,T-SOD活性分别为(229.64±63.62),(377.08±75.58)和(336.19±71.49)U·mg^(-1) prot,Lv-miR-195-3p组的上述指标与Lv-GFP组或PBS组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。对照组和Hcy组的miR-195-3p相对表达量分别为2.88±0.41和6.51±2.21,差异有统计学意义(P<0.05)。mimic-NC+Hcy组、miR-195-3p-mimic+Hcy组、inhibitor-NC+Hcy组和miR-195-3p-inhibitor+Hcy组的MDA含量分别为(1.18±0.17),(2.58±0.24),(1.92±0.11)和(0.97±0.10)nmol·mg^(-1) prot,T-SOD活性分别为(50.37±5.61),(31.74±2.50),(32.45±2.30)和(41.18±2.55)U·mg^(-1) prot,miR-195-3p-mimic+Hcy组的上述指标与mimic-NC+Hcy组,miR-195-3p-inhibitor+Hcy组的上述指标与inhibitor-NC+Hcy比较,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论 miR-195-3p通过促进Hcy诱导的肝氧化应激,从而加重肝损伤。

辅酶Q10对小鼠矽肺纤维化的作用

[背景]矽肺是危害最严重的职业病,目前无特效治疗方案。研究发现辅酶Q10可缓解氨甲蝶呤诱导的肺纤维化,但能否缓解矽肺纤维化尚无文献报道;此外,羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGCR)作为内源性合成辅酶Q10的限速酶是否在该过程中发生变化也无研究报道。[目的]探讨辅酶Q10对小鼠矽肺纤维化的影响及HMGCR在该过程中的变化。[方法]C57BL/6小鼠随机分为3组:对照组(生理盐水组)、模型组(SiO2组)、治疗组(SiO2+辅酶Q10组),每组8只。模型组、治疗组采用气管内一次性滴注0.1 m L SiO2悬液(50 mg/mL)构建小鼠矽肺模型,对照组同法滴注等体积生理盐水。治疗组术后48 h给予辅酶Q10100 mg/(kg·d)灌胃。术后60 d处死各组小鼠,行HE及天狼星红染色,观察肺组织病理改变和胶原纤维沉积情况;碱水解法检测小鼠肺组织羟脯氨酸含量;实时荧光定量PCR法检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA表达,免疫组织化学法、Western blot检测α-SMA及HMGCR蛋白表达。[结果]模型组炎症细胞浸润及纤维化程度较对照组升高,而治疗组炎症细胞浸润及纤维化程度均较模型组减轻。模型组羟脯氨酸含量为(0.65±0.06)μg/mg,较对照组[(0.54±0.05)μg/mg]升高,而治疗组羟脯氨酸含量为(0.55±0.05)μg/mg,较模型组降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组、模型组、治疗组α-SMA mRNA的相对表达量分别为24 381.85±3 301.44、31 812.66±8 335.82、21 587.55±9 489.53,模型组α-SMA mRNA表达高于对照组及治疗组(P<0.05)。模型组α-SMA蛋白、HMGCR蛋白表达均较对照组升高,而治疗组较模型组降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。[结论]辅酶Q10能够减轻小鼠矽肺纤维化并降低HMGCR表达。