“多元互动教学法”在组织学与胚胎学教学中的实施与评价

组织学与胚胎学传统教学经常采用以教师为中心的“填鸭式”、“满堂灌”的教学模式。教师在教学活动中处于主导地位，学生处于知识被动灌输的支配地位。传统教学模式难以保证课程的教学效果及质量。为了改变传统授课模式的弊端，笔者在平时教学中创新使用“多元互动教学法”，“互动式”教学法就是以教师为中心的模式变为教师引导、鼓励和组织学生积极参与、师生互动、集讲解、质疑、交流、讨论、归纳等教学手段于一体的合成式教学运作模式，充分体现了以教师为主导、以学生为主体、以训练为主线、以思维为核心的一种新型教学模式。

成年大鼠脑出血后海马齿状回神经前体细胞的增殖与分化

目的：观察成年大鼠脑出血后海马齿状回神经前体细胞的增殖与分化，探讨脑出血后神经前体细胞的变化规律。方法：制作大鼠脑出血模型，5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）腹腔注射标记增殖细胞，用免疫组织化学法检测大鼠海马齿状回Br-du、神经元核抗原（NeuN）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）阳性细胞数的变化。结果：正常组和假手术组大鼠海马齿状回均有少量BrdU阳性细胞，脑出血后大鼠各时间段的BrdU阳性细胞均较正常组和假手术组增加，7d组达到峰值后逐渐下降，28d组仍高于正常组和假手术组。正常成年大鼠海马齿状回可见少量BrdU／NeuN和BrdU／GFAP双标阳性细胞，脑出血后双标阳性细胞数较正常组增加。结论：脑出血后大鼠海马齿状回神经前体细胞增殖明显，且可以向神经元和神经胶质细胞分化。

小鼠动情周期内雌孕激素波动与皮层及海马δ-亚基的突触外γ-氨基丁酸A型受体表达的相关性

目的探讨雌性小鼠动情周期不同阶段血清孕酮浓度与大脑皮质和海马中含δ-亚基的突触外γ-氨基丁酸A型受体(δGABA;Rs)表达的相关性。方法动情间期和动情期成熟卵巢周期雌性小鼠(4~6周,n=12)血清雌激素和孕酮浓度采用ELISA试剂盒检测;动情间期和动情期大脑皮层和海马中δGABA;Rs表达采用免疫组织化学方法检测。结果在动情间期,皮层和海马δGABA;Rs表达明显高于动情期,血清孕酮的浓度与δGABA;Rs的积分吸光度值成线性关系。结论动情期不同阶段孕酮的生理波动会影响δGABA;Rs在海马及皮层等特定脑区的表达,而海马神经元δGABA;Rs表达的差异会影响脑区神经元的兴奋度,从而可能影响雌性动物的行为特性。

缝隙连接蛋白43和黄体生成素受体在小鼠卵巢中的表达

目的观察小鼠卵泡发育过程中缝隙连接蛋白43(Cx43)和黄体生成素受体(LHR)在小鼠卵巢中的表达以及黄体生成素(LH)对卵巢Cx43表达的影响,为这两种分子与卵泡发育的关系提供实验依据。方法选择出生后1d、4d、7d、2周、3周、4周、6周、8周龄雌性C57小鼠共8组,每组10只,取卵巢。HE染色观察卵巢形态、卵泡发育并测量颗粒细胞体积分数。免疫组织化学和Western blotting观察卵巢组织中Cx43及LHR的表达,Western blotting检测不同浓度黄体生成素(LH)孵育后对卵巢Cx43表达的影响。结果 HE染色显示,出生1d小鼠卵巢中见原始卵泡,出生7d卵巢内出现初级卵泡,2周时出现窦前卵泡和少量窦卵泡,3周、4周时,出现较多大的窦卵泡,6~8周时出现黄体。卵泡颗粒细胞体积分数在2周后的卵巢中明显增加。Cx43表达在各阶段卵泡的颗粒细胞胞膜上,LHR表达在卵泡膜细胞、颗粒细胞及卵母细胞胞质中。Cx43和LHR出生后2周卵巢中的表达开始明显增加,并随卵泡发育表达逐渐增强,在3周、4周、6周和8周维持相对较高水平。LH体外干预可增加卵巢组织Cx43的表达。结论 Cx43和LHR在卵泡发育中发挥重要作用,LH可能通过LHR促进卵巢卵泡颗粒细胞Cx43的表达。

双氢睾酮对大鼠原代卵泡颗粒细胞抗苗勒管激素表达的影响

目的探讨双氢睾酮(DHT)对大鼠原代卵泡颗粒细胞抗苗勒管激素(AMH)表达的影响。方法从95只21 d SD雌性大鼠中提取颗粒细胞原代培养48 h后,先用HE染色检测细胞形态,卵泡刺激素受体(FSHR)细胞免疫荧光检测细胞纯度;然后根据干预方法和实验的不同,随机将细胞分为对照组(无药物干预)、10-8mol/L DHT组、10^-5mol/L DHT组,2×10^-5mol/L蛋白激酶B(Akt)抑制剂(MK-22062Hcl)组和10-8mol/L DHT+2×10^-5 mol/L MK-22062Hcl组,分别使用相应浓度的试剂干预细胞3 h。干预完成后,细胞免疫荧光染色观察AMH表达的部位和变化;Western blotting测定不同组的AMH、Akt、p-Akt蛋白表达量。结果大鼠原代卵泡颗粒细胞的纯度为93.33%±3.09%,AMH表达在大鼠原代卵泡颗粒细胞膜和细胞质中;与对照组相比,10-8 mol/L DHT和10^-5 mol/L DHT均可使颗粒细胞AMH表达增加(P<0.05),但这两个浓度的DHT对颗粒细胞AMH的表达影响差异无显著性(P>0.05);与对照组相比,10-8mol/L DHT可以使p-Akt、AMH表达升高,2×10^-5 MK-22062Hcl使AMH表达降低(P<0.05);与2×10^-5MK-22062Hcl相比,10-8mol/L DHT+2×10^-5 MK-22062Hcl处理组AMH表达升高(P<0.05)。结论DHT可以上调大鼠原代卵泡颗粒细胞AMH的表达,这种作用可能与Akt信号通路有关。