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DDR2血管内皮细胞条件性基因敲除小鼠的复制、鉴定及表型分析
被引量:
1
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作者
王婷婷
卜歆
+5 位作者
李金奎
王娜
邱意开
岳振生
苏金
张淑雅
《中国现代医学杂志》
CAS
2019年第21期1-6,共6页
目的应用Cre/LoxP系统复制盘状结构域受体2(DDR2)在血管内皮细胞可诱导性条件性基因敲除小鼠模型DDR2i EC(DDR2flox/flox,Cdh5-Cre/ERT2),并分析其在肝脏中的表型。方法复制DDR2打靶载体,通过电转入小鼠胚胎干细胞(ES细胞)打靶,通过聚...
目的应用Cre/LoxP系统复制盘状结构域受体2(DDR2)在血管内皮细胞可诱导性条件性基因敲除小鼠模型DDR2i EC(DDR2flox/flox,Cdh5-Cre/ERT2),并分析其在肝脏中的表型。方法复制DDR2打靶载体,通过电转入小鼠胚胎干细胞(ES细胞)打靶,通过聚合酶链反应(PCR)+脱氧核糖核酸(DNA)印迹法鉴定筛选阳性ES细胞,将阳性的ES细胞注射到C57BL/6N小鼠囊胚,移植入受体小鼠子宫以获得嵌合体小鼠。将得到的嵌合体小鼠与C57BL/6N小鼠回交得到F0杂合子,F0代杂合小鼠自交筛选获得F1代DDR2flox/flox小鼠,该小鼠与Cdh5-Cre/ERT2小鼠杂交,通过子代自交获得DDR2在血管内皮细胞可诱导性条件性基因敲除(DDR2flox/flox,Cdh5-Cre/ERT2)小鼠。他莫昔芬诱导血管内皮细胞上DDR2基因敲除,对小鼠进行表型分析。结果获得DDR2血管内皮细胞可诱导性条件性基因敲除小鼠DDR2i EC(DDR2flox/flox,Cdh5-Cre/ERT2),DDR2i EC小鼠出生时符合孟德尔遗传定律,发育良好,他莫昔芬诱导敲除小鼠血管内皮细胞DDR2基因表达后,小鼠出现自发性肝纤维化及黄体血管新生障碍等表型。结论成功复制DDR2血管内皮细胞可诱导性条件性基因敲除小鼠模型。血管内皮细胞DDR2缺失能导致自发性肝纤维化。
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关键词
肝纤维化
胶原盘状结构域受体2
血管内皮细胞
基因敲除技术
Cre/LoxP
下载PDF
职称材料
题名
DDR2血管内皮细胞条件性基因敲除小鼠的复制、鉴定及表型分析
被引量:
1
1
作者
王婷婷
卜歆
李金奎
王娜
邱意开
岳振生
苏金
张淑雅
机构
宁夏
医科
大学
基础
医学院
生育力
保持
教育部
重点
实验室
(
生物
化学
与分子生物学
系
)
空军军医
大学
基础
医学院
生物
化学与
分子生物
教研室
宁夏
医科
大学
总医院急诊科
出处
《中国现代医学杂志》
CAS
2019年第21期1-6,共6页
基金
教育部春晖计划项目(No:Z2016053)
国家自然科学基金(No:31560290,81702845)
文摘
目的应用Cre/LoxP系统复制盘状结构域受体2(DDR2)在血管内皮细胞可诱导性条件性基因敲除小鼠模型DDR2i EC(DDR2flox/flox,Cdh5-Cre/ERT2),并分析其在肝脏中的表型。方法复制DDR2打靶载体,通过电转入小鼠胚胎干细胞(ES细胞)打靶,通过聚合酶链反应(PCR)+脱氧核糖核酸(DNA)印迹法鉴定筛选阳性ES细胞,将阳性的ES细胞注射到C57BL/6N小鼠囊胚,移植入受体小鼠子宫以获得嵌合体小鼠。将得到的嵌合体小鼠与C57BL/6N小鼠回交得到F0杂合子,F0代杂合小鼠自交筛选获得F1代DDR2flox/flox小鼠,该小鼠与Cdh5-Cre/ERT2小鼠杂交,通过子代自交获得DDR2在血管内皮细胞可诱导性条件性基因敲除(DDR2flox/flox,Cdh5-Cre/ERT2)小鼠。他莫昔芬诱导血管内皮细胞上DDR2基因敲除,对小鼠进行表型分析。结果获得DDR2血管内皮细胞可诱导性条件性基因敲除小鼠DDR2i EC(DDR2flox/flox,Cdh5-Cre/ERT2),DDR2i EC小鼠出生时符合孟德尔遗传定律,发育良好,他莫昔芬诱导敲除小鼠血管内皮细胞DDR2基因表达后,小鼠出现自发性肝纤维化及黄体血管新生障碍等表型。结论成功复制DDR2血管内皮细胞可诱导性条件性基因敲除小鼠模型。血管内皮细胞DDR2缺失能导致自发性肝纤维化。
关键词
肝纤维化
胶原盘状结构域受体2
血管内皮细胞
基因敲除技术
Cre/LoxP
Keywords
liver cirrhosis
discoidin domain receptor 2
endothelial cells
gene knockout techniques
Cre/LoxP
分类号
R394.3 [医药卫生—医学遗传学]
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职称材料
题名
作者
出处
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被引量
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1
DDR2血管内皮细胞条件性基因敲除小鼠的复制、鉴定及表型分析
王婷婷
卜歆
李金奎
王娜
邱意开
岳振生
苏金
张淑雅
《中国现代医学杂志》
CAS
2019
1
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