整合素α5的表达下调抑制肝癌Bel-7404细胞的增殖、侵袭及转移

目的分析整合素α5(ITGA5)与肝癌分级及肝癌患者总体生存率之间的关系,进一步研究整合素ITGA5基因沉默后对人肝癌Bel-7404细胞增殖、侵袭迁移能力的影响及其作用机制探讨。方法(1)利用UALCAN分析ITGA5在肝癌组织及正常组织中的表达,以及在不同分级肝癌组织中的表达及其差异统计;通过GEPIA在线分析ITGA5表达量与肝癌患者生存情况的关系。(2)培养前期已经构建的ITGA5沉默细胞系,采用Western blot方法检测ITGA5蛋白水平的表达,以鉴定ITGA5基因沉默的效果。(3)采用平板克隆形成实验、Transwell等实验方法检测ITGA5基因沉默后Bel-7404细胞的增殖、侵袭迁移能力的变化。(4)通过Oncomine癌标本数据库分析肝癌组织及对照组织中ITGA5与PI3K表达及分析其相关性。结果(1)ITGA5在肝癌中的表达显著高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05);在不同肝癌分级中,Grade 1的ITGA5表达量显著低于Grade 2,Grade 2的ITGA5表达量显著低于Grade 3,差异均有统计学意义(P<0.05)。ITGA5高表达组的总体生存率(OS)显著低于低表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)Western blot鉴定ITGA5基因沉默组的蛋白质表达水平比空白、阴性对照组明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。(3)平板克隆形成实验结果显示,基因沉默组比空白、阴性对照组的克隆形成率降低,差异具有统计学意义(P<0.05);Transwell结果显示,基因沉默组细胞穿膜数均比空白及阴性对照组显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。(4)ITGA5和PI3K在肝癌组织中高表达且呈正相关,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论ITGA5与肝癌进展及肝癌患者预后密切相关,其表达下调抑制肝癌细胞的增殖、侵袭迁移;ITGA5可能通过调控PI3K信号通路促进促进肝癌增殖及转移。