宁夏城市社区中老年人群代谢综合征的流行特征

目的了解宁夏城市社区中老年人群代谢综合征(MS)的患病率及其组分的分布情况。方法采用典型抽样的流行病学调查方法进行问卷调查,并测定其身高、体重、血压、空腹血糖、血脂。结果城市社区中老年人群MS患病率为43.3%,其中男、女性患病率差异无显著性(χ2=0.04,P=0.844);回、汉族患病率差异无显著性(χ2=0.32,P=0.571)。男、女性MS的患病率不随着年龄的增长而升高(P=0.168,P=0.688)。不论是男性还是女性,MS组分的患病率都以高血压为著,空腹血糖升高次之。中老年女性血脂紊乱的患病率高于男性(P<0.05)。结论宁夏城市社区中老年人群MS患病率相对较高,应重视社区中老年人群MS的干预措施。

枸杞多糖增敏紫杉醇对人卵巢癌HO-8910PM细胞凋亡的影响和机制研究

目的探索枸杞多糖能否作为增敏剂协同增强紫杉醇对人上皮性卵巢癌HO-8910PM细胞凋亡和增殖的影响,并探讨其可能的作用机制。方法用CCK8法检测LBP、PTX单药作用细胞的半数抑制率,选取25%、50%半数抑制率浓度作为实验浓度;以流式细胞术检测细胞周期、细胞凋亡,RT-PCR和Western blot分别检测LBP、PTX协同作用后HO-8910PM细胞Survivin、Caspase-3、Bax、Bcl-2 mRNA和蛋白的表达。结果协同作用处理后,LBP协同PTX作用HO-8910细胞可见凋亡率大于单药,增益作用显著(P<0.05);LBP协同PTX作用HO-8910细胞可见G0/GI期、G2/M期细胞比例增加,对细胞周期抑制的增益作用显著;LBP协同PTX作用HO-8910细胞后可见Survivin、Bcl-2基因mRNA de蛋白表达显著减少(P<0.05),Caspase-3、Bax基因mRNA和蛋白表达量显著增多(P<0.05),均呈现浓度依赖性。结论枸杞多糖可作为协同增敏紫杉醇对HO-8910PM细胞的抗癌能力,其作用机制可能与Survivin、Bcl-2基因表达的下调,Caspase-3、Bax基因的表达上调有关。

银川市老年女性性激素及胰岛素水平与肥胖和血脂代谢的相关性研究

目的研究银川市老年女性性激素水平与肥胖以及脂质代谢的相关性。方法调查486名银川市60岁以上老年女性,按腰围分为两组,腰围≥80cm的为观察组(357人),腰围<80cm的为对照组(129人),通过调查问卷的方式收集信息和进行临床检查,测量腰围;并进行实验室检查,内容包括:甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)。雌二醇(E2)、睾酮(T)、促黄体生成素(LH)、促卵泡生成素(FSH)、胰岛素(INS)。结果 (1)486名老年女性中,肥胖检出率为73.46%;(2)观察组TG明显高于对照组(P<0.01);HDL-C明显低于对照组(P<0.01);(3)观察组女性的LH、FSH低于对照组(P<0.05),T、INS明显高于对照组(P<0.05)。结论肥胖与血脂代谢、性激素以及胰岛素分泌水平异常的发病率有关。

过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1β对乳腺癌干细胞干性表达的调控

背景:研究表明,过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1β(peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1beta,PGC-1β)通过PI3K/AKT/mTOR信号通路影响乳腺癌细胞的增殖、迁移及凋亡。而PGC-1β能否通过PI3K/AKT/mTOR信号通路影响乳腺癌干细胞的干性及其影响机制还不清楚。目的:探究PGC-1β对乳腺癌干细胞干性的影响及调控机制。方法:将PGC-1β空载体、过表达载体(Lv-PGC-1β)、干扰载体(Sh-PGC-1β)分别转染乳腺肿瘤MCF-7细胞,荧光显微镜观察转染效果;qRTPCR及Western blot验证慢病毒转染后PGC-1βmRNA和蛋白的相对表达。在干性培养基中分别培养未转染组、PGC-1β空载体组、PGC-1β过表达组及PGC-1β干扰组的MCF-7细胞使其成为乳腺癌干细胞,显微镜下观察并记录干细胞球体的形成过程,Western blot验证干性标志物(ABCG2、ALDH1、OCT4)、上皮-间充质转化标记物(E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin、Slug和ZEB1)及PI3K/AKT/mTOR通路核心蛋白的相对表达。结果与结论:①MCF-7贴壁细胞经干性培养基培养形成了折光性好、中间密度高的致密球干细胞;②乳腺癌干细胞干性蛋白的表达明显高于其贴壁细胞(P<0.01);③与未转染组、空载体组相比,PGC-1β过表达组乳腺癌干细胞的形成时间缩短,细胞球体数目增多、球体直径增大(P<0.01),而PGC-1β干扰组细胞球体数目减少、球体直径减小(P<0.01);④PGC-1β过表达组干性相关蛋白的表达高于未转染组、空载体组(P<0.01),上皮-间充质转化相关蛋白E-Cadherin表达低于未转染组、空载体组(P<0.01),而N-Cadherin、Vimentin、Slug和ZEB1的表达高于未转染组、空载体组(P<0.01);PI3K/AKT/mTOR相关蛋白及其磷酸化相关蛋白表达高于未转染组、空载体组(P<0.01),PGC-1β干扰组结果则与PGC-1β过表达组相反;⑤结果提示,PGC-1β能够通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路影响乳腺癌干细胞上皮-间充质转化,从而促进乳腺癌干细胞的形成及干性相关标志物的表达。

环状RNA Hsa_circ_0026352在乳腺癌中的表达及临床意义

目的探讨Hsa_circ_0026352在乳腺癌组织及外周血中的表达及其与乳腺癌患者临床特征的相关性,评价其作为乳腺癌诊断标志物的价值。方法通过人circRNA芯片筛选在乳腺癌组织中差异表达的circRNA,qRT-PCR技术验证Hsa_circ_0026352在乳腺癌组织与外周血中的相对表达,circPrimer 1.2软件绘制circRNA结构图,采用单因素t检验、ANOVA分析、曲线回归分析和ROC曲线分析Hsa_circ_0026352用于外周血诊断乳腺癌的价值。结果Hsa_circ_0026352在乳腺癌组织及外周血中显著低表达(P<0.01),在组织及外周血样本中检测乳腺癌的AUC分别为0.881和0.826(P<0.01)。Hsa_circ_0026352在乳腺癌患者外周血中的相对表达与CA153水平显著负相关(P<0.05)。其用于外周血检测ER阳性、乳腺癌分期、乳腺肿瘤转移的AUC分别为0.710(P<0.01)、0.771(P<0.01)和0.722(P<0.01)。结论Hsa_circ_0026352具备成为乳腺癌诊断分子标志物的潜力。

枸杞多糖联合紫杉醇对人上皮性卵巢癌HO-8910PM细胞增殖及凋亡的影响

目的研究枸杞多糖对紫杉醇诱导的人上皮性卵巢癌HO8910PM细胞株的增殖及细胞周期、细胞凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法将处于对数生长期人上皮性卵巢癌HO-8910PM细胞分4组:A:阴性对照组;B:阳性对照组紫杉醇(PTX)单药作用组(0.001、0.005、0.01、0.05、0.1、0.5、1μg·mL^(-1));C:枸杞多糖(LBP)作用组(50、100、150、200、250、300、350、400μg·mL^(-1));D:LBP及PTX协同作用组(LBP+PTX:50+0.01、100+0.01、50+0.05、100+0.05μg·mL^(-1))。药物干预48h后,采用CCK8检测药物干预后细胞增殖的抑制率;Hochest染色观察HO-8910PM细胞的凋亡形态变化;流式细胞术分析药物作用后对细胞周期、凋亡的影响。结果与阴性对照组比较,LBP、PTX单药作用可见人上皮性卵巢癌HO-8910PM细胞增殖抑制,抑制作用随时间、剂量的增强而增加,LBP作用48h的IC50为280μg·mL^(-1),最低起效浓度为120μg·mL^(-1),在400μg·mL^(-1)时可达到85%细胞抑制,PTX作用48h的IC50为0.005μg·mL^(-1),在0.5μg·mL^(-1)时达到100%细胞抑制。LBP协同PTX作用细胞可见增殖抑制大于单药作用之和,增益作用显著(P<0.05);流式细胞分析结果显示LBP协同PTX作用可致G0/GI期、G2/M期细胞比例增加,细胞凋亡率升高,效果均大于单药作用之和,协同作用对细胞周期抑制、诱导凋亡作用的增益作用显著(P均<0.05)。结论枸杞多糖具有抑制人上皮性卵巢癌HO-8910PM细胞增殖并促进其凋亡的作用,且枸杞多糖明显增益紫杉醇对HO-8910PM增殖抑制及诱导凋亡作用。

过表达环状RNA孤儿核受体4A1(circNR4A1/Hsa-circ-0026352)抑制MCF-7乳腺癌细胞增殖并促进其凋亡

目的环状RNA Hsa-circ-0026352(circNR4A1)在乳腺癌患者组织、外周血、细胞系中的相对表达及其对细胞增殖、凋亡的影响。方法通过人circRNA芯片筛选在乳腺癌组织及癌旁组织中差异表达的circRNA,通过实时定量PCR验证circNR4A1在15对乳腺癌组织及癌旁正常组织、40例患者及40例健康人群外周血以及MCF-7、HCC-1937、MDA-MB-231、T-47D人乳腺癌细胞及MCF-10A人乳腺上皮细胞的表达。使用circPrimer 1.2软件绘制circRNA结构图,使用环状RNA交互作用组(Circular RNA interactome)数据库预测circRNA结合的miRNA和RNA-蛋白结合位点,通过京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库进行circRNA生物学功能预测。构建circNR4A1过表达载体并转染MCF-7细胞,采用CCK-8法和克隆形成实验检测乳腺癌细胞增殖、Hoechst33258染色结合流式细胞技术检测细胞凋亡和细胞周期,实时定量PCR检测癌细胞丝裂原激活蛋白激酶激酶/细胞外信号调节激酶(MEK/ERK)信号通路因子K-RAS、MEK、ERK,凋亡相关基因B细胞白血病/淋巴瘤因子2(Bcl2)、B细胞白血病/淋巴瘤因子2关联凋亡因子X(BAX)、B细胞白血病/淋巴瘤因子2细胞死亡激活子(BAD)、胱天蛋白酶3(caspase-3)等mRNA水平,Western blot法检测MEK、ERK、Bcl2、BAD、caspase-3蛋白水平。结果circNR4A1(Hsa-circ-0026352)在乳腺癌组织、外周血、乳腺癌细胞系中表达显著低于癌旁组织、健康人群外周血、人乳腺上皮细胞。在MCF-7细胞中过表达circNR4A1能够抑制癌细胞增殖,促进细胞凋亡,阻滞细胞周期于G1/S期,并抑制MEK、ERK、Bcl2蛋白表达,促进BAD、caspase-3蛋白表达。结论circNR4A1/Hsa-circ-0026352在乳腺癌细胞中低表达,过表达circNR4A1能够显著抑制MCF-7细胞增殖,诱导细胞凋亡。

Netrin-1及其受体DCC基因在6种结直肠癌细胞中的表达差异及意义

目的:研究Netrin-1、DCC基因在6株不同类型和来源的体外培养结直肠癌细胞mRNA及蛋白水平的表达差异。方法:CCK8检测6株不同来源结直肠肿瘤细胞的生长曲线,以正常肠上皮细胞NCM460为对照;Real-Time PCR和Western blot分别检测Netrin-1、DCC基因在6株结直肠癌细胞内的mRNA和蛋白水平的表达。结果:与对照组相比,结直肠肿瘤细胞株可见DCC、Netrin-1基因及蛋白的异常表达;DCC表达在6株结直肠肿瘤细胞株中均表达下调,其中SW620、LOVO、LS174T细胞株内DCC表达下调差异显著,有统计学意义(P<0.05);Netrin-1在6株结直肠肿瘤细胞株中均表达上调,其中SW620、LOVO、LS174T细胞株内Netrin-1表达上调差异显著,有统计学意义(P<0.05);6株结直肠肿瘤细胞株之间DCC、Netrin-1也存在差异表达。结论:DCC、Netrin-1在结直肠肿瘤内异常表达,与肿瘤的发展和转移相关,DCC和Netrin-1在同一细胞株内表达呈负相关,DCC蛋白的下调和失活可能与Netrin-1有关。

细粒棘球绦虫(中国大陆株)亲肌肉抗原重组蛋白诱导小鼠免疫应答的研究

目的研究细粒棘球绦虫(中国大陆株)重组亲肌肉抗原(rEg.myophilin)的免疫保护作用及其机制,为包虫病分子疫苗的研制提供新的候选分子。方法 (1)选取111只ICR小鼠随机分为A、B对照组和C实验组,分别于皮下注射PBS、PBS+佐剂和PBS+佐剂+候选疫苗,之后分别用同样的试剂进行两次加强免疫;(2)用Eg原头蚴进行攻击感染,感染后25周剖杀小鼠,检获棘球蚴包囊,计算免疫保护力;(3)按不同的时间点分批次对小鼠采血、取脾,用ELISA法测定血清中IgG及其亚型和IgE水平,并检测其细胞因子IFN-γ、IL-4和IL-10水平。结果 rEg.myophilin能诱导小鼠产生≥86.11%的免疫保护力;免疫小鼠血清IgG、IgG1、IgG2a、IgE和细胞因子IFN-γ、IL-4水平均增高,对照组攻击感染后IL-10增高,实验组未增高。结论 rEg.myophilin免疫后IgG及其亚类IgG1和IgE介导的体液免疫在抗细粒棘球蚴感染过程中发挥重要作用。IL-4在IgE亚型类别转换中起关键作用,这一机制可能直接影响IgE参与的嗜酸性粒细胞相关的抗寄生虫感染。

银川回族人群亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与高血压和同型半胱氨酸水平的相关性

目的探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)rs1801133和rs1801131基因多态性与银川回族人群高血压和血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平的相关性。方法选择2016年1月至2017年12月,宁夏医科大学总医院被诊断为原发性高血压的回族患者770例,回族血压正常对照1299人作为研究对象,平均年龄45.73岁,收集研究对象基本资料,检测Hcy、血脂、空腹血糖、尿酸等指标。应用基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱分析技术(MassArray system)对样本进行基因分型。结果高血压组MTHFRrs1801133的CC、CT、TT 3种基因型频率和C、T两种等位基因频率与血压正常组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。高血压组MTHFRrs1801131的AA、AC、CC 3种基因型频率和A、C两种等位基因频率与血压正常组比较,差异有统计学差异(P<0.05)。MTHFRrs1801133不同基因型间血压、Hcy水平差异有统计学意义(P<0.01),TT和CT基因型Hcy和血压水平高于CC基因型[收缩压:(131.0±18.4),(130.1±19.3)比(127.3±18.0)mm Hg,舒张压:(82.4±12.9),(81.2±13.2)比(79.8±12.1)mm Hg,Hcy:(16.47±5.39),(13.22±3.92)比(7.21±3.09)μmol/L,均P<0.01]。rs1801131各基因型间Hcy水平差异有统计学意义(P<0.01),血压差异无统计学意义(P>0.05)。Logistic回归分析显示,在校正了性别、年龄、体质量指数(BMI)、尿酸及Hcy后MTHFRrs1801133不同基因型与高血压有相关性(TT比CC基因型:OR=3.709,95%CI2.534～5.218,P<0.001),但是rs1801131不同基因型与血压无相关性(P>0.05)。结论 MTHFRrs1801133基因多态性与银川回族人群高血压发病有关,rs1801131与高血压发病无关。

社区年龄>55岁人群非酒精性脂肪性肝病合并代谢综合征的现况分析

目的 分析社区年龄>55岁人群非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)合并代谢综合征(MS)的现况和危险因素。方法采用方便抽样方法,入选城市社区年龄>55岁人群1046例。将所有研究对象分为4组,即单纯NAFLD组、单纯MS组、NAFLD合并MS组及正常对照组,比较各组间血清学指标及临床指标的差异,并采用非条件Logistic回归分析NAFLD合并MS的危险因素。结果NAFLD合并MS组的空腹血糖[(7.62±2.09)比(6.99±1.56)mmol/L]、三酰甘油[(2.44±0.99)比(2.15±0.82)mmol/L]、载脂蛋白A1(apoA1)[(1.28±0.20)比(1.25±0.18)g/L]、丙氨酸氨基转移酶(ALT)[(32.67±18.89)比(23.09±15.93)U/L]、天冬氨酸氨基转移酶(AST)[(32.18±9.47)比(28.49±8.09)U/L]、γ谷氨酰转肽酶(GGT)[(31.78±16.12)比(24.52±13.77)U/L]、腰围、臀围高于单纯MS组(均P<0.05);NAFLD合并MS组的空腹血糖[(7.62±2.09)比(5.96±1.31)mmol/L]、总胆固醇[(5.07±1.00)比(4.45±1.00)mmol/L]、三酰甘油[(2.44±0.99)比(1.82±0.98)mmol/L]、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)[(3.33±0.70)比(3.05±0.65)mmol/L]、载脂蛋白B(apoB)[(1.07±0.21)比(0.99±0.22)g/L]、ALT[(32.67±18.89)比(27.70±17.29)U/L]、GGT[(31.78±16.12)比(27.29±15.04)U/L]、收缩压[(155.6±19.4)比(143.2±21.2)mm Hg]、舒张压[(90.8±11.6)比(86.1±10.2)mm Hg]、腰围[(95.7±8.0)比(93.4±9.0)cm]高于单纯NAFLD组,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)低于单纯NAFLD组(均P<0.05)。多分类Logistic回归分析结果显示,空腹血糖(OR=60.59,95%CI19.59~187.39)、三酰甘油(OR=390.86,95%CI 97.68~1563.97)、体质量指数(BMI)(OR=179.41,95%CI 45.07~714.17)和高血压(OR=449.47,95%CI 106.83~1891.08)与NAFLD合并MS显著相关。结论 NAFLD合并MS患者机体代谢组分紊乱比单纯NAFLD、MS患者更加严重,空腹血糖、三酰甘油、BMI和血压增高与NAFLD合并MS独立相关。

脊柱结核患者椎间盘病灶组织中环状RNA表达的初步筛选和功能分析

目的利用基因芯片技术筛选脊柱结核患者椎间盘病灶组织中差异表达的环状RNA(circRNA)并分析其在脊柱结核发生发展中可能的分子作用机制。方法选取2019年1月至2020年12月就诊于宁夏医科大学总医院脊柱骨科手术治疗的脊柱结核患者3例作为实验组,腰椎间盘退变手术治疗的患者3例作为对照组,收集术中切除的间盘组织,利用Arraystar Human circRNA Array V2芯片检测并采用独立样本t检验进行数据分析筛选出两组差异表达的circRNA;用生物信息学软件预测差异circRNA可能靶向作用的微小RNA(miRNA);对差异表达的circRNA分子的亲本基因进行基因本体(GO)生物学过程富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果脊柱结核患者的间盘病灶组织中差异表达的circRNA(差异倍数>2,P<0.05)共有1 396条,其中有757种表达上调,639种表达下调;hsacirc0031968、hsacirc0001806、hsacirc0077607、hsacirc0071312、hsacirc0062683表达显著上调;hsacirc0004183、hsacirc0000367、hsacirc0000691、hsacirc0006220、hsacirc0043278表达显著下调;对所有差异表达的circRNA的亲本基因进行GO分析发现其主要参与细胞蛋白分解代谢、三磷酸鸟苷(GTP)酶结合、组蛋白修饰、转录因子结合、蛋白激酶激活等过程;经KEGG通路分析发现其主要富集在内质网中的蛋白质加工、细胞凋亡、蛋白水解、环鸟苷酸-蛋白激酶G、腺苷酸活化蛋白激酶、EB病毒感染等信号通路。结论脊柱结核患者椎间盘病灶组织中差异表达的circRNA可能与脊柱结核的发生和发展密切相关。