胃癌细胞基质金属蛋白酶-2、9的表达及对细胞迁移的影响

目的研究基质金属蛋白酶-2、9(matrix metalloproteinase-2、9,MMP-2、9)在胃癌细胞株HGC-27和SGC-7901的表达及对细胞迁徙转移的影响。方法采用Real-time PCR检测MMP-2、9 mRNA的含量;以ELISA检测培养上清液中MMP-2、9的相对浓度;通过明胶酶谱法测定培养上清液中的MMP-2、9比活。用Transwell小室迁徙实验、同质黏附和异质黏附实验比较两株细胞体外迁徙黏附能力。结果HGC-27中MMP-2和MMP-9 mRNA含量高于SGC-7901。HGC-27上清液MMP-2、9相对浓度均高于SGC-7901,且MMP-2比活高于SGC-7901,两株细胞MMP-9比活相近。HGC-27穿膜细胞数和异质黏附细胞数高于SGC-7901,同质黏附细胞数低于SGC-7901,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论迁徙和异质黏附能力较强、同质黏附能力较弱的胃癌细胞HGC-27的MMP-2、9表达较强,提示MMP-2、9高表达可能促进胃癌细胞迁徙转移。

毒热平注射液对吞噬细胞系Ana-1核因子-κB的影响

目的:研究毒热平注射液对流感病毒感染的小鼠腹腔巨噬细胞株Ana-1细胞核因子-κB(NF-κB)活性的影响。方法:用100TCID50流感病毒亚甲型鼠肺适应株A/FM/1/47(H1N1)感染小鼠腹腔巨噬细胞株Ana-1后换用10mg/L和1mg/L浓度含药维持液继续培养,分别于12h和24h弃细胞上清液并收集细胞,提取巨噬细胞RNA和核蛋白,进行实时定量PCR反应(RT-PCR)和Western blot实验,动态测定毒热平注射液对病毒感染前后巨噬细胞Toll样受体7(TLR7)、髓样分化因子88(MyD88)mRNA和NF-κBp65mRNA及其蛋白表达水平的影响。结果:毒热平注射液可剂量依赖性地下调病毒感染巨噬细胞TLR7、MyD88mRNA的表达、NF-κBp65mRNA及其蛋白表达水平。结论:毒热平注射液能通过调节MyD88依赖的信号传导通路下调细胞核因子-κB活性发挥抗病毒感染作用。

毒热平注射液对巨噬细胞TIR信号通路的影响

目的:研究毒热平注射液对流感病毒感染的小鼠腹腔巨噬细胞株Ana-1细胞TIR(Toll/IL-1 receptors)信号传导通路的影响。方法:用100 TCID50流感病毒亚甲型鼠肺适应株A/FM/1/47(H1N1)感染小鼠腹腔巨噬细胞株Ana-1后换用10,1 mg.L-1含药维持液继续培养,分别于12,24 h弃细胞上清液并收集细胞,提取巨噬细胞RNA,进行实时定量PCR反应(RT-PCR),动态测定毒热平注射液对病毒感染前后巨噬细胞TIR信号传导通路中各信号蛋白:Toll样受体7(TLR7)、髓样分化因子88(MyD88),IL-1受体相关激酶4(IRAK4)、肿瘤坏死因子相关激酶6(TRAF6)和核因子κB(NF-κB)mRNA表达水平的影响。结果:毒热平注射液可剂量依赖性地下调病毒感染巨噬细胞TLR7,MyD88,IRAK4,TRAF6,NF-κB mRNA的表达水平。结论:毒热平注射液能通过调节TIR信号传导通路各信号蛋白的活性发挥抗病毒感染作用。