磷脂酶A_2与高血压大动脉血管重构关系初步研究

目的探讨磷酸化胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)及其上游激酶MEK与高血压大动脉血管平滑肌细胞增殖/凋亡失衡的关系,进一步探讨高血压状态下大动脉血管重构的可能机制。方法将4、16、24周龄组雄性自发性高血压大鼠(SHR)作为实验组,同周龄雄性Wistar大鼠(MKY)作为对照组,各组5只大鼠。采用免疫组化和Western blot对比分析各组动物主动脉平滑肌细胞中cPLA2以及MEK的表达。结果 (1)SHR从8周龄开始血压升高,SHR16、SHR24与同周龄WKY相比差异有统计学意义(P<0.05);(2)各周龄WKY心脏/体质量比值差异无统计学意义(P>0.05),相同周龄SHR心脏/体质量比值较高并随周龄增加心脏/体质量比值呈增高趋势,SHR心脏/体质量比值均高于同周龄对照组;(3)磷酸化cPLA2在SHR4表达率分别为11.71%、46.00%、51.59%,而同周龄WKY表达率分别为29.10%、36.00%、67.84%,随大鼠周龄增加,磷酸化cPLA2表达率逐渐增加(P<0.05);(4)随大鼠周龄增加,磷酸化MEK表达率增加(P<0.05)。结论 MEK的激活与cPLA2活性减弱可能共同参与了高血压大动脉血管重构的发生、发展。

HFABP在急性缺血心肌中的表达及在法医病理诊断中的意义

目的探讨心型脂肪酸结合蛋白(HFABP)在急性缺血心肌中的表达及在法医病理诊断中的意义。方法按条件选取心肌组织标本30例,分为对照组、冠脉狭窄组、心肌梗死组各10例。肉眼观察冠状动脉左前降支及心肌组织的变化;HE染色方法观察各组心肌组织的形态变化,免疫组织化学方法观察各组心肌组织中HFABP的表达。结果肉眼及HE染色显示:冠脉狭窄组、心肌梗死组与对照组相比左前降支狭窄程度明显。HE结果显示:心肌梗死组心肌细胞排列紊乱,部分心肌有断裂,细胞核固缩、凝集、深染,并有核碎裂、核溶解;冠脉狭窄组心肌细胞核部分固缩、凝集、碎裂,与对照组心肌细胞无明显区分。免疫组化结果显示:对照组HFABP阳性表达平均光密度值0.26±0.01,冠脉狭窄组HFABP阳性表达平均光密度值0.19±0.005,心肌梗死组HFABP阳性表达平均光密度值0.14±0.01。结论心肌梗死组HFABP的表达明显弱于冠脉狭窄组,冠脉狭窄组明显弱于对照组。急性缺血心肌中HFABP的表达量明显减少。

不同方法检测胃黏膜活检标本中幽门螺杆菌感染状况的价值

目的比较快速尿素酶法、HE染色、亚甲蓝特殊染色以及免疫组化染色法在诊断胃黏膜病变中幽门螺杆菌(helicobacter pylori,HP)感染的价值。方法收集214例行胃镜检查并行活检的病例,采用快速尿素酶法、HE染色、亚甲蓝特殊染色及免疫组化染色法分别检测胃黏膜活检组织中HP的感染状况。结果 4种方法检测胃黏膜活检组织中HP的感染率差异具有显著性,HP阳性率从低到高依次是HE染色(27.6%,59/214)、快速尿素酶法(30.8%,66/214)、免疫组化染色(54.2%,116/214)和亚甲蓝染色(57.0%,122/214),亚甲蓝染色HP检出率最高,但存在一定的假阳性(假阳性率为34.7%,34/98)。结论免疫组化染色法检测HP清楚直观,结果准确可靠,是检测胃黏膜活检标本中HP感染的最佳方法。

硫酸右旋糖苷对人胃癌细胞腹腔种植转移和VEGF表达的影响

目的通过观察人胃癌细胞在裸鼠大网膜上的种植转移情况和测定血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达水平,探讨硫酸右旋糖苷(dextran sulfate,DS)对人胃癌细胞腹腔种植转移和VEGF表达的影响。方法采用细胞培养,建立动物模型,将108只裸鼠随机分为对照组与实验组两组,在注射胃癌细胞的同时分别注射生理盐水与DS。剖腹观察腹腔种植的癌结节数量,应用免疫组化和RT-PCR法检测VEGF蛋白及mRNA的表达。结果实验组癌结节数明显少于对照组(P<0.001),免疫组化和RT-PCR检测结果均显示实验组VEGF蛋白及mRNA的表达量明显小于对照组。结论DS可以抑制VEGF的表达并有可能通过抑制其表达降低胃癌的腹腔种植转移。

硒蛋白H减缓谷氨酸对神经细胞损伤的作用

目的探讨硒蛋白是否可以缓解谷氨酸(glutamate,Glu)对神经细胞的损伤。方法利用转入硒蛋白基因的HT-22细胞株(Sel H)和HT-22加空病毒载体细胞株(HT+V)两种细胞株作为研究对象。分别分为:HT+V对照组、HT+V Glu组、Sel H对照组和Sel H Glu组,MTT法处理Glu(4×10^(-3)mol/L)6、10、24 h后检测各组细胞的抑制率,用倒置显微镜、透射电镜观察各组细胞形态及超微结构的变化,采用氧自由基(ROS)特异性标记探针DHE对各组细胞进行标记,用荧光电子显微镜观察ROS标志物的产生。结果 Sel H转染细胞在Glu损伤6、10、24 h后生长抑制率分别为(2.9±0.023)%、(17.3±0.018)%、(20.4±0.029)%,明显低于空载体对照组(P<0.05)。倒置显微镜观察显示:HT+V Glu组细胞明显较HT+V对照组减少,细胞体积缩小,皱缩。Sel H Glu组处理后细胞数量虽比Sel H对照组数量减少,但较空载体处理组数量明显增多。透射电镜观察结果显示:与HT+V Glu组相比Sel H Glu组凋亡细胞数目减少,线粒体、内质网的损伤减轻。荧光电子显微镜观察结果显示:Sel H Glu组DHE(特异性标记ROS)染色的平均光密度值(0.024 3±0.001 6)明显低于HT+V Glu组(0.048 0±0.001 6)(P<0.05)。结论硒蛋白H可以减缓Glu导致的神经细胞损伤,硒蛋白H可能通过减少受损神经细胞ROS产生实现减缓Glu对神经细胞损伤的作用。

UCP2基因敲除小鼠在高血糖加重脑缺血损伤模型中的应用

目的在UCP2基因敲除小鼠中建立稳定的高血糖加重脑缺血再灌注损伤模型。方法 KO-UCP2小鼠腹腔注射STZ诱导高血糖。大脑中动脉栓塞(MCAO)栓塞(1h)制备缺血模型,再灌注6,24,72h后分别运用HE染色和TTC染色观察缺血后细胞形态学和组织学损伤。结果高血糖组神经功能评分明显高于正常血糖组。HE染色显示,6h I/R组神经间质疏松,部分神经元变性、坏死。24h I/R组和72h IR组,核固缩神经细胞比例增加。高血糖组的核固缩神经细胞比率明显高于相应正常血糖组。TTC染色证实高血糖可以加重缺血后梗死面积。结论在KO-UCP2小鼠中建立高血糖加重脑缺血再灌注损伤模型的成功率、稳定性都有一定的提高,为进一步明确UCP2在高血糖加重脑缺血损伤中的作用奠定了基础。

枸杞多糖对弱精精子冻后洗涤过程中的保护作用

目的探讨在弱精精子冻后的优选过程中枸杞多糖对精子功能的影响。方法选取22例男性弱精患者,精液样本冷冻复苏后分为2组:SW组(冻后洗涤组)和SW+LBP组(冻后枸杞多糖干预洗涤组)。精液经常规冷冻后,采用非连续密度梯度法处理冻后精子,其中SW+LBP组的离心液中加入一定浓度的枸杞多糖,最终检测精子的前向运动率(PR)、存活率、正常形态率、精子DNA断裂指数(DFI)以及离心过程中2组间丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)的含量,并进行比较分析。结果 PR检测结果显示,SW+LBP组高于SW组;DFI检测结果显示,SW+LBP组显著低于SW组。MDA、ROS检测结果显示,SW+LBP组显著低于SW组。精子存活率和正常形态率结果显示,2组之间差异无统计学意义。结论枸杞多糖可以减少精子冻后优选过程中精子的氧化应激,提高弱精精子优选后的精子活力及精子功能。

简单的洗涤程序对高龄男性精子功能的影响

目的探讨辅助生殖技术过程中简单的精子洗涤程序对高龄男性精子功能的影响。方法选取2018年3月1日至6月1日在宁夏医科大学总医院生殖中心门诊就诊的男性不育患者68例,将其分为2组:低年龄组(20～<40岁,n=32)和高年龄组(40～50岁,n=36)。每份精液样本依据世界卫生组织标准检测精液的各项常规参数和精子功能,处理过程按照《世界卫生组织人类精液检查与处理实验室手册(第5版)》推荐的简单洗涤程序进行操作。分别检测精液处理前2组精液体积、精子浓度、精子活力、精子正常形态率,以及处理前后精子功能指标包括[精子DNA断裂指数(DFI)、精子线粒体膜电位(MMP)及顶体反应(AR)],并进行结果的比较、分析。结果精子常规参数结果显示,高年龄组精子正常形态率低于低年龄组,差异有统计学意义(P<0.05);但2组在精液体积、精子浓度、精子活力方面比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。2组经过简单洗涤处理后,精子DFI值均明显升高,且高年龄组升高幅度高于低年龄组;MMP值显著降低,且高年龄组的降低幅度高于低年龄组,差异均有统计学意义(P<0.05)。2组AR值经处理后显著降低,但2组间的降低幅度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论高龄对精液体积、精子浓度、精子活力无明显影响,但对精子正常形态率影响较大;在高龄组精子处理过程中精子的DFI、MMP变化较大,需要进一步优化处理洗涤过程,以减少对精子的负面影响。

染色体易位与恶性肿瘤

染色体易位是恶性肿瘤重要的分子遗传学改变之一,一方面,染色体易位可使原癌基因异常表达;另一方面,染色体易位使易位后相邻的基因融合,形成新的融合基因并表达相关产物, 可导致细胞生长和分化等生物学行为的改变,特异的易位或易位基因产物可作为肿瘤特征性标志,检测这些标志有助于肿瘤的诊断,亦可预测肿瘤患者的预后.

枸杞多糖对离心过程中弱精精子氧化应激的作用研究

目的探讨枸杞多糖对体外离心过程中弱精精子氧化应激的作用。方法按《世界卫生组织人类精液检查与处理实验手册》(2011年第五版)标准选取32份弱精症患者精子标本,每份标本各取1200μL,分为空白对照组、离心组和枸杞多糖组,各400μL。检测3组精液精子的前向运动精子百分率(PR)、存活率、正常形态、丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)、DNA断裂指数(DFI)、高DNA着色性(HDS)、精子线粒体膜电位(MMP)情况。结果枸杞多糖精子PR和存活率高于离心组,但低于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。枸杞多糖组精子正常形态率与离心组无明显差异,但低于空白对照组(P<0.05)。枸杞多糖组DFI和HDS明显低于离心组,MMP高于离心组,差异有统计学意义(P<0.05)。枸杞多糖组MDA水平与空白对照组无差异,但低于离心组(P<0.05)。枸杞多糖组ROS阳性细胞率高于空白对照组,但低于离心组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论一定浓度的枸杞多糖可以减弱弱精精子离心过程中过量的ROS对精子的氧化应激损害,从而提高精子线粒体活性,提高精子的PR和存活率,改善精子洗涤过程中的弱精精子功能和质量。