混合式教学在系统解剖学中的应用

目的探讨混合式教学模式在系统解剖学中的应用效果。方法选取2017级临床两个班共计91人为混合式教学组,另选两班88人为传统教学组,通过分阶段多模块的考核方式和调查问卷,评价混合式教学的使用情况。结果经2检验分层分段成绩人数显示混合式教学组与传统教学组教学效果具有显著差异(P<0.05)。调查问卷所示在价值感知、质量感知和学生满意度三个方面均具有显著性差异(P<0.05),具有统计学意义。结论混合式教学在系统解剖学应用中充分调动了学生学习主动性,培养了学生创新思维,提高了学生综合素质,实现了教学相长。

宁夏无果枸杞芽提取物对老年小鼠小肠组织中FOXO1、β-catenin表达的影响

目的观察宁夏无果枸杞芽提取物(FLE)对衰老小鼠小肠上皮FOXO1、β-catenin表达的影响。方法将60只13月龄自然衰老昆明小鼠分为老年对照组和FLE低剂量组(FLE1组)、FLE中剂量组(FLE2组)、FLE高剂量组(FLE3组),每组15只;另将15只6月龄昆明小鼠做为成年对照组。FLE1组、FLE2组、FLE3组分别用质量/体积百分比为5%、10%、20%FLE灌胃,0.2 m L·10 g-1·d-1,老年对照组和成年对照组灌胃等量生理盐水,连续8周。应用PCR技术与免疫蛋白印迹技术(Western-Blot),检测小鼠小肠组织中FOXO1、β-catenin mRNA和蛋白表达。结果与成年对照组比较,老年对照组小鼠小肠组织中FOXO1、β-catenin mRNA与蛋白表达下调(P<0.05)。与老年对照组比较,FLE1、FLE2 FOXO1、β-catenin mRNA表达无明显增加(P>0.05);FLE3组的FOXO1、β-catenin mRNA和蛋白表达均上调(P<0.01)。结论高剂量FLE能够上调小肠组织中FOXO1、β-catenin mRNA和蛋白表达。

宁夏无果枸杞叶提取物对衰老小鼠海马神经细胞增殖及凋亡的影响

目的:观察宁夏无果枸杞叶提取物(FLE)对衰老小鼠脑海马区神经细胞增殖、凋亡及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和Caspase-3表达的影响。方法:13月龄C57BL/6J雄性小鼠随机分为老年对照组和FLE低剂量组(FLE1组)、FLE中剂量组(FLE2组)、FIE高剂量组(FLE3组),6月龄为成年对照组。FLE1组、FIE2组、FLE3组分别用5 mg/kg、10 mg/kg、20 mg/kg FLE灌胃,0.2 mmol/I/(10 g·d),老年及成年对照组灌胃等量生理盐水,持续8周。流式细胞术检测海马区神经细胞凋亡率,免疫荧光组织化学方法观察小鼠海马齿状回神经细胞的增殖。免疫组化SP法及WesternBlot技术检测小鼠海马区凋亡蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达,结果:流式细胞术检测结果显示,各组均检测到早期凋亡细胞,与成年对照组比较,老年对照组早期细胞凋亡率明显增多(P<0.05);FLE2组、FLE3组早期细胞凋亡率明显低于FLEl组和老年对照组(P<0.05)。免疫荧光染色结果显示:老年对照组海马齿状回神经细胞增殖率较成年对照组低(P<0.05),FLE2及FLE3组小鼠海马齿状回神经细胞增殖率较老年对照组增高(P<0.05)。免疫组化及Western Blot检测结果显示:老年对照组海马区Bcl-2蛋白的表达较成年对照组低(P<0.01);Bax、Caspase-3蛋白的表达较成年对照组高(P<0.01);FLE2及FLE3组Bcl-2蛋白的表达较老年对照组增加(P<0.01);Bax、Caspase-3蛋白的表达量较老年对照组降低(p<0.01)。结论:中、高浓度的FLE能够促进海马区神经细胞的增殖,提高凋亡蛋白Bcl-2表达,降低Bax、Caspase-3蛋白的表达,减少神经细胞的凋亡,发挥抗衰老作用。

枸杞多糖对胎儿卵巢组织冷冻保存的影响

背景:抗氧化剂的应用对于提高卵巢组织冻存后的活力起着很重要的作用。目的:通过观察冷冻保存的胎儿卵巢组织异种移植到裸鼠肾被膜下的发育情况,探索枸杞多糖在卵巢组织冷冻保存中的作用。方法:实验分为4组。①新鲜移植组:取材后的新鲜胎儿卵巢组织直接进行移植。②冻存对照组:冷冻保护液为基液。③β-巯基乙醇组:冷冻保护液为基液添加100μmol/Lβ-巯基乙醇。④枸杞多糖组:冷冻保护液为基液添加400mg/L枸杞多糖。对冷冻复温后的胎儿卵巢皮质块进行祼鼠的肾被膜下移植,并于移植后12周取材。结果与结论:各组在移植物的存活率上差异无显著性意义(P>0.05)。在卵泡计数上冷冻对照组最低(P<0.05)。在卵泡的存活率上,各组间差异均有显著性意义,其中以冷冻对照组最低,枸杞多糖组最高。β-巯基乙醇组和枸杞多糖组卵巢超微结构较冷冻对照组保存的好。提示400mg/L的枸杞多糖和100μmol/L的β-巯基乙醇有利于卵巢组织的冷冻保存,并可显著提高冷冻卵巢组织移植后的存活率。

宁夏无果枸杞芽提取物对慢性温和不可预见性应激小鼠学习、记忆的影响

目的:探讨宁夏无果枸杞芽提取物(fruitless lycium-sprout extracts,FLE)对成年慢性应激小鼠学习、记忆功能,血清和脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)的活性、丙二醛(MDA)含量及脑组织中神经细胞粘附分子(NCAM)表达的影响。方法:将40只成年昆明小鼠随机分为正常对照组、模型组、FLE低剂量组(FLE1组)和高剂量组(FLE2组),每组10只;采用慢性温和不可预见性应激(chronic mild unpredictable stress,CUMS)方法建立小鼠抑郁模型。在造模完成后灌胃给药,1次/d,连续灌胃6周,FLE1组、FLE2组分别用质量体积百分比为10%、20%的FLE每日0.2 ml/10 g灌胃,正常对照组及模型组灌胃等量生理盐水。用Morris水迷宫实验检测各组小鼠的学习记忆能力,黄嘌呤氧化酶法测定血清和脑组织SOD活性,硫代巴比妥酸法测定MDA水平,免疫组化染色法检测脑组织中N-CAM蛋白的表达。结果:与正常对照组比较,模型组小鼠的目标象限停留时间减少,隐藏平台象限获得时间延长,血清SOD活性降低,MDA水平提高,脑组织中N-CAM表达下调(P<0.01);与模型组比较,FLE2组的目标象限停留时间延长,隐藏平台象限获得时间缩短,血清和脑组织中SOD活性均增加,MDA含量均降低(P<0.05),脑组织中N-CAM表达均上调(P<0.001)。结论:FLE可以提高CUMS小鼠学习和记忆的能力,其机制可能与抗氧化作用有关。

局部解剖学实验教学模式探索与实践

探讨一体化多层次实验教学模式在局部解剖学教学中的效果。选择5年制临床医学生,分为实验班和对照班。在局部解剖学实验教学中,对照班应用传统教学模式,实验班实施一体化多层次教学模式。通过期末总评成绩和问卷调查的方式评价教学效果。结果显示:教改班实验成绩和理论成绩高于非教改班,一体化多层次局部解剖学实验教学模式能调动学生的学习兴趣,夯实学生的解剖学基础知识,提高学生动手操作能力及应用解剖学知识分析临床相关问题的能力,培养团队协作精神。因此,一体化多层次教学模式可有效应用于局部解剖学实验教学中。

宁夏无果枸杞芽茶对中老年人慢性习惯性便秘的影响

目的观察宁夏无果枸杞芽茶对银川市社区中老年人习惯性便秘的影响。方法抽取银川市社区中老年慢性习惯性便秘患者90例,在知情同意的前提下,分为无果枸杞芽茶组、轻泻药治疗组和对照组。治疗1周后及治疗结束后3周,对3组患者用药前后大便肛门梗阻感、大便不尽感、大便费力程度、大便频率、每次大便时间、粪便性状等便秘症状进行评分,通过比较便秘症状积分,评价无果枸杞芽茶对慢性习惯性便秘的影响。结果与对照组及与治疗前比较,无果枸杞芽茶组和轻泻药治疗组患者在用药1周后,症状积分较治疗前均有显著降低(P<0.05);无果枸杞芽茶组总有效率为90.0%,轻泻药治疗组为87%,2组比较差异无统计学意义(P>0.05);无果枸杞芽茶组在大便费力程度、大便频率、每次大便时间、粪便性状方面的积分改善优于轻泻药治疗组(P<0.05)。治疗结束后3周随访,无果枸杞芽茶组痊愈4例,显效12例,有效11例,无效3例,总有效率为90%;轻泻药物治疗组痊愈2例,显效7例,有效15例,无效6例,总有效率为80%,2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论无果枸杞芽茶可改善中老年人慢性习惯性便秘,主要改善大便性状、大便费力程度、大便频率和缩短大便时间。

FSH对胎儿卵巢组织玻璃化冻存及冻融后短时培养的影响

目的通过对FSH干预下的胎儿卵巢玻璃化冷冻及解冻后短暂培养,观察FSH对卵泡储备的影响。方法将20周流产胎儿卵巢皮质切割成体积为5mm×4mm×2mm和10mm×4mm×2mm的皮质片,在玻璃化液、解冻液和培养液中添加10μg FSH.mL-1,通过两步渗透平衡法,将卵巢皮质进行玻璃化冻存。解冻后培养4.5h,通过卵泡形态学观察、不同发育期卵泡构成比和卵泡直径观察评价玻璃化冻存和解冻后的FSH干预下的培养效果。结果①不同发育阶段卵泡构成比及卵泡直径在冻融组之间及冻融组与新鲜组之间相比差异无统计学意义;②冻融组和冻融-培养组之间相比较,培养组卵泡直径增大,差别有统计学意义(P<0.05)。结论冻融过程的FSH添加不影响人胎儿卵巢大皮质片的玻璃化冻存及早期卵泡的构成比,但是体外添加FSH培养4.5h可使一定量的原始卵泡发育至早期初级卵泡阶段。

宁夏无果枸杞芽提取物对慢性肝纤维化小鼠抗氧化能力及TNF-α和IFN-γ的影响

目的研究宁夏无果枸杞芽提取物(FLE)对慢性肝纤维化损伤小鼠血清TNF-α和IFN-γ的影响,探讨FLE抗肝纤维化的机制。方法选取25只SPF级昆明小鼠,随机分为5组,每组5只,即正常对照组、模型组、无果枸杞芽提取物低剂量治疗组、中剂量治疗组和高剂量治疗组。应用CCL4制作小鼠慢性肝纤维化损伤模型,给予不同剂量FLE干预8周。取肝组织进行HE染色,观察肝组织病理形态改变;用黄嘌呤氧化酶法测定小鼠血清SOD活性,硫代巴比妥酸法测定MDA水平,ELISA法检测血清细胞因子TNF-α和IFN-γ的含量,观察FLE对其影响。结果模型组肝纤维组织增生明显,分隔包绕正常肝小叶,形成大小不等的结节,假小叶中肝细胞索排列紊乱,小叶中央静脉缺如,纤维组织中可见明显的炎性细胞浸润,肝细胞水肿;应用FLE干预后小鼠肝细胞水肿有不同程度的减轻,肝纤维结缔组织增生均减少,汇管区炎性细胞浸润均减少。与正常对照组比较,模型对照组血清SOD活性降低,MDA含量增高(P<0.05);与模型对照组比较,FLE中、高剂量治疗组小鼠血清中SOD活性均增加,MDA水平均降低(P<0.05);ELISA法检测结果显示,FLE中、高剂量治疗组小鼠血清中TNF-α含量与模型对照组相比较,差异有统计学意义(P<0.05);FLE低、中、高剂量治疗组小鼠血清IFN-γ的浓度与模型对照组相比较,均明显降低(P<0.05)。结论 FLE中、高剂量均可改善CCL4所致肝纤维化损伤,其机制与FLE提高小鼠抗氧化能力,减轻小鼠肝脏炎症反应有关,其中以高剂量组作用最为明显。

补阳还五汤和GM1对去细胞异种神经支架移植后神经再生和修复的实验研究

目的:探讨补阳还五汤对异种去细胞神经支架移植后神经再生及功能恢复的影响以及与GM1(mono-sialotetrahexosy 1 gangliosides)的效果比较。方法:36只健康成年SD大鼠随机分为3组:补阳还五汤(BYHWD)治疗组、GM1治疗组和生理盐水(NS)对照组。动物分别存活4、8周,不同时段各组为6只。以上3组大鼠分别以10 mm长度的兔异种去细胞神经支架桥接大鼠坐骨神经缺损。术后补阳还五汤组和生理盐水对照组分别用补阳还五汤水煎剂和生理盐水按10 ml/kg灌胃,持续1个月。GM1治疗组术后大鼠损伤侧小腿三头肌内注射GM1 0.1 ml/d;各组分别在术后第4周、8周行大体观察、测定坐骨神经运动传导速度恢复率(MNCV%)和小腿腓肠肌复合动作电位波幅恢复率(CMAP%)、移植体的神经纤维行电镜半薄切片观察记数有髓纤维的数目,免疫组织化学标记NF和S-100。结果:在同一时相点补阳还五汤组坐骨神经运动传导速度恢复率、小腿腓肠肌复合动作电位波幅恢复率(CMAP%)及移植体的有髓纤维数目均优于生理盐水对照组(P<0.05)。补阳还五汤组与GM1组比较没有显著性差异(P>0.05)。结论:应用补阳还五汤可促进异种去细胞神经支架移植后神经再生与功能恢复;补阳还五汤和GM1对异种神经支架移植后神经再生与功能恢复的效果没有显著性差异。

银杏叶提取物对大鼠脑出血后神经元保护作用的研究

目的:探讨银杏叶提取物对大鼠脑出血(ICH)周围神经元的保护作用。方法:胶原酶注入大鼠尾壳核建立ICH模型,然后将大鼠随机分为脑出血后治疗组,模型组和正常对照组。模型组和治疗组动物均于注射后6、24 h,3、7、14 d后处死。对各组大鼠进行神经功能评分;用干/湿重法测定脑组织的含水量;透射电镜观察神经元的超微结构并对线粒体进行体视学分析。结果:治疗组大鼠神经功能评分较模型组明显增加(P<0.05);模型组大鼠脑出血后24 h脑含水量开始升高,72 h达到高峰。银杏叶提取物治疗组脑含水量较模型组明显下降(P<0.05);与模型组相比治疗组神经元线粒体的数量明显增多(P<0.05);线粒体肿胀明显减轻(P<0.05)。结论:银杏叶提取物能保护神经元,促进神经功能恢复。

EPO/NGF对大鼠背根节压迫性损伤的治疗作用

目的:外源EPO/NGF通过其抗痛敏作用,抗凋亡作用及对钠离子通道的影响来探索和研究其在背根神经节(DRG)慢性压迫中的治疗作用。方法:制作多节段DRG慢性压迫大鼠模型,并给予外源EPO或NGF,进行行为学检测,测量大鼠的机械痛阈值和热痛阈值,Tunnel方法原位检测组织中细胞凋亡情况,通过免疫荧光技术,RT-PCR和Western Blot技术检测c-jun,c-fos,NGF,Nav1.8的表达情况。结果:与对照组相比,模型组的大鼠从建模第1 d起痛阈就开始下降,并持续到13 d;与模型组相比,EPO/NGF治疗组的机械痛阈值和热痛阈值得以升高,DRG神经细胞的损伤和凋亡现象减轻或者恢复。NGF的表达由于受到压迫损伤而降低,在给予外源NGF或EPO治疗后表达升高,Nav1.8的表达与NGF相一致。结论:EPO和NGF在神经系统中具有一定的抗凋亡作用,镇痛作用及促进钠离子通道Nav1.8的表达,并且痛阈的降低与Nav1.8表达下降具有一定相关性。

自拟稳糖汤治疗2型糖尿病脾肾阳虚证的有效性和安全性

目的研究自拟稳糖汤治疗2型糖尿病脾肾阳虚证的有效性和安全性。方法收集2012年10月至2013年12月宁夏医科大学中医学院门诊部及附属回中医院收治的86例2型糖尿病脾肾阳虚证患者,随机分成治疗组与对照组,治疗组予自拟稳糖汤辅助糖尿病基础治疗,对照组单纯予糖尿病基础治疗,对比分析两组患者临床疗效。结果治疗组总有效率89.13%,明显优于对照组(72.50%)(P<0.05),并发现自拟稳糖汤在稳定血糖、调节脂质代谢及稳定血流动力学方面具有优势。结论自拟稳糖汤配合糖尿病基础治疗疗效显著。

灯盏花素对大鼠出血性脑损伤的保护作用

目的:探讨灯盏花素注射液对大鼠出血性脑损伤的保护作用。方法:用胶原酶和肝素混合液注入大鼠尾壳核建立脑出血(ICH)模型,然后将大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组。治疗组动物于注射灯盏花素注射液后第3、5、7 d后处死。应用Berdson评分标准对各组大鼠进行神经功能评分,应用免疫组织化学方法检测出血灶周围TNF-α和IL-8的表达,应用流式细胞术检测神经细胞凋亡率。结果:与模型组比较,治疗组大鼠神经功能评分明显增加(P<0.05);灯盏花素治疗组脑细胞的凋亡率明显减低(P<0.05);治疗组出血灶周围炎症因子TNF-α,IL-8明显减少(P<0.05);结论:灯盏花素注射液能保护神经元,促进神经功能恢复。

NO合酶阳性神经元在便秘型肠易激综合征大鼠结肠的表达

目的:探索一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元在便秘型肠易激综合征(C-IBS)大鼠结肠的分布特点及变化。方法:冷水持续灌胃15 d制作C-IBS大鼠模型。通过对大鼠大便性状和结肠内膨胀刺激后腹肌反应的观察及结肠HE染色对模型进行评价。免疫荧光组织化学和Western Blot观察NOS阳性神经元在结肠肠肌丛的分布及改变。结果:造模15 d后,模型组大鼠大便呈腊肠状的碎块,结肠的腹肌反应阈值明显降低,HE染色显示结肠粘膜层完整。免疫荧光组织化学显示,C-IBS大鼠结肠肠肌从神经元NOS表达较对照组明显增高。Western Blot结果显示,C-IBS大鼠结肠NOS的表达明显增加。结论:NO在C-IBS大鼠结肠神经元内表达增加,此异常可能与C-IBS大鼠结肠运动功能紊乱相关。

小鼠卵巢玻璃化冻存过程中FSH干预对VEGF及VEGFR-2表达的影响

目的通过在玻璃化冻存不同时段给予小鼠卵巢组织重组人促卵泡刺激素(rFSH)干预,观察rFSH对VEGF以及VEGFR-2表达的影响,探索卵巢玻璃化冻存过程中最佳的FSH保护途径。方法将4周龄C57BL/6J小鼠卵巢分为新鲜对照组(FCG)、玻璃化冻存对照组(VCG)、0.3IU.mL-1FSH干预玻璃化冻存组,包括全程添加FSH组(OG-FSH)、冻存前添加FSH组(BG-FSH)以及冻存后添加FSH组(AG-FSH)。通过形态学技术观察正常卵泡百分比;采用免疫组织化学技术观察卵巢不同细胞VEGF以及VEGFR-2的表达;通过Western-blot方法观察并分析不同玻璃化冻存时段的FSH干预对卵巢VEGF以及VEGFR-2蛋白表达量的影响。结果正常卵泡百分比、VEGF及VEGFR免疫组织化学和Western-blot检测结果组间比较差异均有统计学意义。其中,OG-FSH组各项检测指标均高于其他各组(P<0.05),且BG-FSH、AG-FSH组与FCG相似,高于VCG组(P<0.05)。结论玻璃化冻存全程添加FSH干预有利于提高正常卵泡数,以及VEGF、VEGFR-2蛋白的表达。

小鼠卵巢自体及异体移植前的尿促性素体外干预对卵泡存活的影响

目的探讨卵巢移植前采用尿促性素(menotrophin)体外干预对小鼠半卵巢移植后卵泡存活的影响。方法 ICR雌性小白鼠随机分为5组:(1)新鲜卵巢组织自体移植组(新鲜自体移植组),卵巢摘除后直接移植至自体肾被膜下;(2)自体移植干预组,卵巢摘除后先在含尿促性素液体中体外培养3h,之后移植至自体肾被膜下;(3)自体移植无干预组,卵巢摘除后在不含尿促性素的液体中体外培养3h,之后移植至自体肾被膜下;(4)异体移植干预组,卵巢摘除后在含尿促性素的液体中体外培养3h,之后移植至异体肾被膜下;(5)去势对照组。术后72h观察移植物存活率与移植物内正常卵泡计数,术后1个月观察各组动物的动情周期恢复情况、移植物的发育情况,测定血清卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)和雌二醇水平。结果移植后72h,新鲜自体移植组和自体移植干预组存活卵泡数明显高于自体移植无干预组与异体移植干预组(均为P<0.01)。新鲜自体移植组、自体移植干预组和自体移植无干预组动物的动情周期恢复率均为100%,明显高于异体移植干预组的67%(均为P<0.05)。动情周期恢复所需时间以新鲜自体移植组和自体移植干预组最短。自体移植干预组的卵泡数多于自体移植无干预组,但均低于新鲜自体移植组。与去势对照组比较,其他4组的FSH值均较低(均为P<0.01),雌二醇值均较高(均为P<0.01),其中新鲜自体移植组和自体移植干预组的雌二醇水平高于自体移植无干预组和异体移植干预组(均为P<0.01)。结论对移植卵巢给予尿促性素体外培养可提高移植后的卵泡存活率,是提高卵巢移植效果的有效途径。

Th1/Th2类细胞因子的变化对急性免疫性肝损伤的影响研究

目的探讨Th1/Th2类细胞因子的变化对ConA诱导的急性免疫性肝损伤的机制,以及脾脏对急性免疫性肝损伤的影响作用。方法将Balb/c小鼠随机分为两组:正常对照组,肝损伤组。正常对照组尾静脉注射等量生理盐水,肝损伤组尾静脉注射12.5mg/Kg ConA一次。各组分别于ConA注射后8h,24h,72h取材,进行下列研究:①HE染色观察各组小鼠肝脏病理学改变。②经眼球取血,收集血清测ALT和AST。③收集各组小鼠血清及新鲜肝、脾组织(各100mg),获取肝、脾组织裂解液。用多参数细胞因子检测技术即FlowCytomix技术,通过流氏细胞仪对荧光素PE信号强度的检测,实现对各组小鼠血清、肝组织、脾组织内多种Th1/Th2类因子的定性定量分析。结果①HE染色:正常对照组肝组织结构正常。肝损伤组8h时表现为急性肝损伤表现,24h时可见大片坏死灶,72h时肝损伤缓解。②血清ALT和AST检测:正常对照组3个时间点内无明显升高,肝损伤组3个时间段内ALT和AST均高于正常对照组,有显著性差异。③Th1/Th2细胞因子检测结果:肝脏:肝损伤组8h时Th1和Th2类细胞因子均明显升高,与正常对照组比较有显著性差异,24h后开始下降,降至正常水平或正常水平以下,呈明显下降趋势。血清:肝损伤组Th1,Th2类细胞因子8h均升高,24h后逐步降低。脾脏:肝损伤组Th1,Th2类细胞因子8h时均升高,与正常对照组比较,有显著性差异,24h时明显降低。结论①ConA诱导的急性免疫性肝损伤主要是由Th1类细胞、巨噬细胞和Th2类细胞分泌的炎性因子所造成。②脾脏通过Th1/Th2类细胞因子的分泌对急性免疫性肝损伤起到免疫调控作用。

含BMSCs的ANX移植联合G-CSF修复大鼠坐骨神经缺损的实验研究

目的:探讨复合骨髓基质细胞(BMSCs)的脱细胞异种神经移植体(ANX)移植及联合应用粒细胞集落刺激因子(G-CSF)修复大鼠坐骨神经缺损的效果。方法:将大鼠BMSCs种植到ANX内复合培养,制备大鼠坐骨神经10 mm缺损模型,SD大鼠随机分为4组(n=10):ANX移植组、ANX移植联合应用G-CSF组、复合BMSCs的ANX移植组和复合BMSCs的ANX移植联合应用G-CSF组。术后8周,行坐骨神经功能指数(SFI)和电生理检测;应用免疫荧光染色和实时荧光定量PCR检测再生神经内神经丝和神经营养因子的表达。结果:含BMSCs的ANX移植联合应用G-CSF组SFI、神经传导速度、再生纤维相对密度增高(P<0.05),神经营养因子表达增加(P<0.05)。结论:含BMSCs的ANX移植联合应用G-CSF可显著促进周围神经再生。

S100β对炎症条件下嗅鞘细胞的作用及机制

目的:明确S100β对干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)诱导的炎症条件下嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)的作用,并探讨其发挥作用的机制。方法:将采用改良差速贴壁联合胰酶限时消化3 min法纯化培养的大鼠OECs分为空白对照组、炎症模型组、S100β组等3组,每组种板1×106/ml;空白对照组采用常规培养体系培养OECs,炎症模型组采用重组IFN-γ诱导炎症建立OECs体外炎症模型,S100β组在炎症模型组基础上加入S100β蛋白进行干预;采用免疫荧光染色进行OECs鉴定及纯度分析;利用MTT法检测OECs的增殖情况并筛选IFN-γ诱导OECs炎症模型的适宜浓度;利用TUNEL染色法判断各组OECs的凋亡状况;采用Real-Time PCR检测各组OECs表达炎症相关因子i NOS、IL-1β、TNF-α的mRNA水平。根据以上结果,判断在炎症环境中S100β对OECs的影响及可能机制。结果:采用改良方法原代培养的大鼠OECs能够获得80%纯度;与5 ng/ml的浓度相比,10 ng/ml的IFN-γ对OECs的抑制率更高,凋亡细胞更多;与炎症模型组比较,S100β干预组细胞增殖能力升高,凋亡细胞减少;炎症相关因子i NOS、IL-1β以及TNF-α的基因表达水平下降。结论:S100β可以下调IFN-γ激活的炎症因子i NOS、IL-1β和TNF-α的基因表达水平,提示S100β可能是通过抑制炎症因子的表达从而减少了OECs凋亡的发生。本研究结果为深入研究S100β联合嗅鞘细胞移植对周围神经损伤的修复作用奠定了基础。