中国13个民族7个Y-STR基因座遗传关系的研究

选择具有高度遗传多态性与稳定性的7个Y-STR位点分析宁夏回族与国内17个群体之间的群体遗传关系。采用Y-STR复合扩增、ABI全自动测序仪测序方法,结合基因扫描和自动分型技术获得150名宁夏回族个体DYS19、DYS389Ⅰ、DYS389Ⅱ、DYS390、DYS391、DYS392和DYS393七个基因座的基因频率,同时还收集国内17个群体这7个基因座的基因频率数据,计算他们间的遗传距离,进行聚类分析。结果显示:宁夏回族与北京汉族、云南汉族、安徽汉族、天津汉族、湖南汉族先聚为一类,然后与福建汉族相聚,最后与其他少数民族相聚,揭示回族与汉族在遗传结构上具有很大的相似性,为回族起源和发展过程中融入了大量汉族血缘的论点提供了遗传学证据。

ERCC2单核苷酸多态性对宁夏原发性男性不育的影响

目的：探讨DNA修复基因（ERCC2）单核苷酸多态性（SNPs）rs13181、rs1618536和SNPrs1799793对宁夏原发性男性不育的影响。方法：采用病例一对照研究方法，运用MassArraySNP技术，对宁夏地区351例原发性男性不育患者[年龄22—38（31．0±4．2）岁]和327例健康生育对照人群[年龄19—42（33．04-5．9）岁]的ER—CC2SNPrs13181、m1618536和m1799793进行分型检测。结果：ERCC2SNPm13181、rs1618536和m1799793基因型频率和等位基因频率在病例组和对照组中的分布无统计学意义（P〉0．05），其中AnyG-anyA-anyA突变基因型频率在两组中分布具有统计学差异（OR=0．414，95％CI=0．176～0．970）。结论：ERCC2SNPrs13181、m1618536和rs1799793在宁夏地区男性原发性不育中存在交互作用，随着联合突变位点的增多，不育症的发病风险增加。

胰岛素启动子在肝干细胞分化研究中的应用

目的:利用报告基因监测肝干细胞向胰腺细胞的转分化潜能。方法:通过PCR从大鼠鼠尾基因组中克隆胰岛素启动子片段,构建大鼠胰岛素Ⅰ启动子调控的红色荧光蛋白报告载体(pRIP Ds Red),并利用报告载体标记的肝原始细胞系(liver epithelialprogenitor cells,LEPCs)及经逆转录病毒感染后表达MafA的肝原始细胞系(LEPCs-MafA),观察肝干细胞向胰腺细胞的转分化潜能。结果:获得胰岛素启动子调控的报告载体、报告载体标记的LEPCs及LEPCs-MafA。结论:pRIP DsRed报告载体的成功构建为研究LEPCs向胰腺细胞的转分化提供了简捷的分子工具。

宁夏回、汉族指纹模式影响的研究

目的分析宁夏回、汉族人群指纹模式各类型的分布特征。方法采用随机整体抽样方法分析宁夏回、汉族指纹样本共计614份，其中回族262人（男性129人，女性133人），汉族352人（男性206人，女性146人）。结果固定某指为弓型纹（A）后，相同的花样类型同时出现于另外9指的几率明显增高，而尺侧箕型纹（U）与斗型纹（W）的出现率则明显降低；而当固定某指为u后，u同时出现于另外9指的几率明显增高，而w的出现率相较总体样本出现率明显降低，A的出现率受影响的程度较小；当固定某指为w后，情况恰好相反。这种趋势在宁夏回、汉族以及不同性别问都存在，且无显著性差异。结论指纹的模式影响，即不同手指指端花样类型的构建及出现率彼此关联，在宁夏回族、汉族和两性别问普遍存在。

宁夏回族迟发性卟啉病一家系UROD基因突变分析

目的对宁夏地区首个回族迟发型卟啉病(PCT)家系进行uroporphyrinogen decarboxylase(UROD)基因的突变分析,以明确其分子病因。方法收集1个迟发性卟啉家系的外周血标本,用聚合酶链反应(PCR)扩增UROD基因的全部10个外显子,采用直接测序方法获得各外显子序列,并与NCBI网站公布的UROD的标准序列(NC号:000001.10)进行对比,对UROD基因的突变进行分析。结果该家系中的患者均为女性,家系成员UROD基因的10个外显子均扩增成功,与原始序列对比,未发现基因突变。结论 PCT家系UROD基因各外显子未发现突变。

先天性心脏病患者皮纹波动不对称性的研究

本文采用随机整体抽样的方法分析了先天性心脏病患者129例(男性59例,女性70例)和正常对照人群133例(男性69例,女性64例)13项皮纹波动不对称性(Fluctuating asymmetry,FA)的分布特征。结果表明:(1)先天性心脏病患者组与正常对照组在13项皮纹波动不对称性指标中均未出现显著性别差异;(2)先天性心脏病患者组与正常对照组在FAⅥ(P<0.05)和FAⅦ(P<0.01)两项有显著性差异,表现为患者组明显增高,提示先天性心脏病患者在胚胎发育早期易受到环境因素影响,具有较高的发育不稳定性。

多巴胺受体基因多态性与海洛因依赖的关联性研究

目的探讨多巴胺D1受体基因-48A/G、D2受体基因Taq1A及-141 ins/del、D3受体基因Ser 9Gly、D4受体基因-521C/T 5个多态性位点与海洛因依赖的相关性。方法严格按照诊断标准,选取无亲缘关系的海洛因依赖患者304例(海洛因依赖组)及健康体检者(正常对照组)320例提取基因组DNA,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测5个多态性位点的基因型,采用SPSS 11.5软件分析各位点基因型、等位基因频率及组间差异。结果多巴胺D2受体基因Taq1A位点的基因型及等位基因频率分布在海洛因依赖组与正常对照组间差异有统计学意义(P<0.05),海洛因依赖组Taq1A位点的等位基因A1频率显著高于正常对照组(χ2=5.591,P=0.018,OR=1.314,95%CI=1.048～1.647);多巴胺D4受体基因-521C/T位点的基因型及等位基因频率分布在海洛因依赖组与正常对照组间差异有统计学意义(P<0.05),海洛因依赖组等位基因T频率显著高于正常对照组(χ2=9.663,P=0.002,OR=1.224,95%CI=0.970～1.545)。结论多巴胺D2受体基因Taq1A和多巴胺D4受体基因-521C/T位点多态性可能与海洛因依赖有关,携带有Taq1A多态性位点A1等位基因与-521C/T多态性位点T等位基因的个体可能更容易对海洛因产生依赖。

细粒棘球蚴重组抗原rEgferritin诱导宿主抗感染免疫应答的初步研究

目的初步探讨细粒棘球蚴重组铁蛋白rEgferritin免疫小鼠产生的抗细粒棘球蚴感染的免疫机制。方法 rEg-ferritin免疫ICR小鼠3次、同时设立佐剂组和对照组,第12w用细粒棘球蚴原头蚴对3组小鼠进行攻击感染,5个月后剖杀小鼠,检查各组小鼠腹腔内包囊个数,根据公式计算保护力。分别于0w,12w,32w取血,制备血清,同时取脾,制备淋巴细胞悬液。通过ELISA检测血清中的IgG及其抗体亚型、IgE及MTT;通过流式细胞仪检测脾淋巴细胞中CD4+及CD8+亚群百分比。结果 rEgferritin组小鼠血清中的IgG,IgG2a,IgG2b持续增高,与佐剂组相比具有显著性差异(P<0.01);3组IgG3无差异。rEgferritin组免疫小鼠可诱导小鼠产生85.6%的保护力抵御细粒棘球蚴原头蚴的再次感染,与对照组相比具有显著性差异(P<0.01);rEgferritin组和佐剂组CD4+T细胞和CD8+T细胞均增加,rEgferritin组CD4+T细胞增加更为明显,与佐剂组相比有显著性差异(P<0.01)。rEgferritin组脾细胞在受到rEgferritin抗原和天然抗原刺激后,细胞增殖明显。结论细粒棘球蚴重组抗原rEgferritin通过诱导宿主产生体液免疫级细胞免疫应答的方式抵御细粒棘球蚴感染的,说明rEgferritin是具有研究价值和潜力的包虫病候选疫苗分子。

冲动与多巴胺系统在毒品依赖中的作用机制

毒品依赖是严重的社会和生物医学问题。虽然研究表明毒品依赖与中枢神经系统多巴胺及其受体密切相关,但是还未阐明多巴胺系统在毒品依赖中的具体作用机制。冲动性行为是不同成瘾物质依赖者的标志性特征,最近的研究提示,冲动在可卡因依赖形成中也扮演着重要角色,但尚未见报道在其他毒品依赖发生过程中的作用机制。因此需要改进现有的研究方法和思路,对冲动性行为与多巴胺系统的联合效应进行研究。这必将为毒品依赖遗传学的具体机制提供重要依据;为药理学开发最佳的治疗药物奠定基础;为毒品依赖治疗提供新的策略。

Eg.ferritin抗血清介导的体外杀伤细粒棘绦虫原头节作用的观察

目的体外观察细粒棘球绦虫重组铁蛋白(Eg.ferritin)抗血清对细粒棘球蚴原头节(PSC)的杀伤作用。方法用纯化的Eg.ferritin免疫新西兰家兔制备抗血清,以不同浓度的抗血清与细粒棘球绦虫原头蚴体外共培养,光镜观察培养不同时间点细粒棘球原头节的变化,透射电子显微镜观察原头节超微结构的改变。结果抗血清组的原头蚴的死亡率及破坏程度与抗血清的浓度呈正相关,与对照组相比,抗血清对原头节有杀伤作用(P<0.01)。在20%抗血清组中,原头节内部被大量空泡及髓样结构代替或无结构。结论细粒棘球蚴重组铁蛋白抗体对细粒棘球绦虫有明显的杀伤作用。

无精子症患者的染色体核型、Y染色体微缺失分析及诊断

目的观察无精子症患者的异常染色体核型及Y染色体微缺失情况,并探讨诊断方法。方法采用染色体G显带及多重聚合酶链反应技术(PCR-RFLP)对96例无精子症患者(观察组)和40例正常生育者(对照组)进行外周血染色体核型分析及Y染色体基因检测,采用放射免疫诊断技术检测血清性激素,采用经皮附睾穿刺精子抽吸术(PESA)/经皮睾丸穿刺精子抽吸术(TESA)进行睾丸精子学检查。结果观察组染色体核型异常者27例(占28.1%)、对照组2例;观察组共检出Y染色体AZF基因微缺失7例,其中AZFc缺失5例、AZFb+c缺失1例、AZFa+b+c缺失1例,对照组未检测到AZF缺失。观察组42例接受PESA/TESA,其中26例显微镜下可见精子(有精子组)、16例镜下未见精子(无精子组,术后组织病理学检查证实无精子);与有精子组相比,无精子组血清FSH及LH水平升高、T水平降低,P均<0.01。结论无精子症患者多表现为染色体核型异常和Y染色体基因AZF微缺失,遗传学分析和血清性激素水平检测有助于无精子症的诊断。

线粒体DNA np16189和np16223多态性与乳腺癌相关性研究

目的探讨mtDNA(mitochondrial DNA,mtDNA)np16189和np16223多态性及其单倍型与乳腺癌的相关性。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restricted fragment lengthpolymorphism,PCR-RFLP)技术对195例乳腺癌患者和196例正常对照的mtDNA np16189和np16223基因型进行检测,计算基因型频率,应用SHEsis软件构建单倍型,利用χ2和OR(Odds ratio)检验分析各位点及其单倍型与乳腺癌的相关性。结果 mtDNA np16189和np16223基因型频率及两者构建的单倍型频率在两组中的分布差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 mtDNA np16189和np16223多态性可能与乳腺癌无相关性。

HLA-G基因14bp插入/缺失多态性与不明原因复发性流产患者相关性的病例对照研究

目的探讨HLA-G基因3'非翻译区14bp插入/缺失多态性与不明原因复发性流产患者的相关性。方法选择343名不明原因复发性流产患者,按照不同流产次数分为流产2次组(n=152),流产3次组(n=132),流产4次及以上组(n=59);268名正常妊娠妇女作为健康对照组。采用聚合酶链反应(PCR)及8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离技术检测HLA-G基因14bp插入/缺失多态性位点在不明原因复发性流产患者及正常妊娠组中的基因型频率分布。结果 HLA-G基因14bp插入/缺失多态性位点的基因型频率分布在流产4次及以上组与正常妊娠组差异有统计学意义(χ2=6.941,P=0.031),流产4次及以上组+14bp等位基因频率分布显著高于正常妊娠组(χ2=4.956,P=0.026,OR=1.573,95%CI:1.054～2.349)。结论 HLA-G 14 bp缺失多态性在维持正常的妊娠中可能有重要作用。

肿瘤坏死因子α和白细胞介素6基因启动子区多态性与精神分裂症的相关性研究

目的探讨肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factora，TNF-α）基因启动子区-308G／A、-857C／T和-1031T／C位点，白细胞介素6（interleukin-6）基因启动子-174G／C和-572C／G多态性与精神分裂症发生的相关性。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析方法检测346例精神分裂症患者、323名健康对照各个多态性位点的基因型，采用SPSS13．0进行统计学分析。结果TNF-α基因-857C／T位点的基因型及等位基因频率分布在精神分裂症组与正常对照组均存在统计学意义（P〈0．05），其中，-857T的等位基因的频率在精神分裂症组均显著高于对照组（χ^2=9．414，P=0．002，OR=1．511，95％CI：1．160～1．969）。-857C／T位点不同基因型患者之间的阳性和阴性症状量表总分及阴性症状差异存在显著性，且TT基因型的分值显著高于CC基因型（P〈0．05）。结论TNF-α基因-857C／T位点可能与精神分裂症的发病存在关联，其中，-857T等位基因可能是易感基因，并且-857C／T位点与阳性和阴性症状量表评分中阴性症状存在关联。

5-羟色胺受体基因多态性位点与海洛因依赖的关联性研究

目的：5-HT（5-hydroxytryptamine,5-HT）参与了多种中枢神经活动的生理过程,其功能异常可以影响很多行为障碍,已有研究显示,5-HT水平与多种精神疾病密切相关。5-HT受体及其转运体基因在海洛因依赖发生发展中起到了重要的作用,是海洛因依赖的主要候选基因。探讨5羟色胺2A受体（Serotonin 2A receptor,HTR2A）基因启动子区-1438A/G（rs6311）、外显子区102T/C（rs6313）与5羟色胺1B受体（Serotonin 1B receptor,HTR1B）基因外显子区861G/C（rs6296）3个单核苷酸多态性和海洛因依赖的关联性分析。方法：严格按照诊断标准,选取无亲缘关系的海洛因依赖个体616例及健康个体600例提取基因组DNA,采用PCR-RFLP方法检测rs6311、rs6313和rs6296 3个SNPs位点的基因型频率,采用SPSS16.0软件分析各位点等位基因、基因型频率在病例-对照组间差异。结果：HTR2A基因rs6311和HTR1B基因rs6296位点的等位基因及基因型频率分布在2组间存在统计学差异（P〈0.05）,病例组rs6311位点的等位基因A频率显著高于对照组（X2=5.436,P=0.020,OR=1.208,CI=1.031~1.417）,rs6296位点的等位基因C频率显著高于对照组（X2=12.116,P=0.000,OR=1.329,CI=1.132~1.560）。连锁不平衡检验结果显示,HTR2A基因rs6311、rs6313位点处于不连锁状态,D＇〈0.5。结论：HTR2A基因rs6311和HTR1B基因rs6296多态性可能与海洛因成瘾有关,携带有rs6311 A等位基因与rs6296 C等位基因的人可能更容易对海洛因产生依赖。我们的研究为海洛因依赖易感人群筛选及药物靶向治疗提供了理论依据。

细粒棘球蚴重组蛋白14-3-3和Eg10免疫差异的初步研究

表达纯化细粒棘球蚴重组蛋白14-3-3(rEg14-3-3)和Eg10(rEg10),分别免疫小鼠,8w后进行细粒棘球蚴原头蚴攻击感染.计算免疫保护力,检测脾组织中CD4+T、CD8+T细胞亚群以及T细胞增殖情况.实验结果表明,rEg14-3-3免疫组小鼠具有85.3%抵抗细粒棘球绦虫感染的能力,而rEg10免疫组小鼠与对照组小鼠相比无免疫保护力;与PBS对照组相比,只有rEg 14-3-3免疫组的CD4+T细胞亚群的分布有明显差异,且rEg 14-3-3抗原能诱导淋巴细胞显著增殖.因此rEgl4-3-3蛋白能抑制细粒棘球蚴的生长,诱导小鼠产生高水平的免疫保护力,可作为疫苗候选分子.

多巴胺D4受体基因启动子区多态性与精神分裂症的相关性

目的:探讨多巴胺D4受体(Dopamine D4 receptor,DRD4)基因启动子区的3个功能多态性与精神分裂症是否存在相关性。方法:严格按照诊断标准,选取无亲缘关系的精神分裂症患者220例,健康对照组200例提取基因组DNA,采用聚合酶链反应及等位基因特异性扩增技术检测DRD4基因启动子区-521C/T、-616C/G和-1240L/S3个功能位点的基因型,采用Haplo View 4.0及SPSS11.5软件分析各位点基因型、等位基因频率及组间差异。结果:DRD4基因-1240L/S的基因型及等位基因频率分布在精神分裂症与正常对照组存在显著性差异(p<0.05)。DRD4基因启动子区-521C/T和-616C/G位点的基因型及等位基因频率分布在精神分裂症组与正常对照组无统计学差异(p>0.05)。结论:DRD4基因-1240L/S多态性与精神分裂症相关联,携带有-1240L/S多态性位点L等位基因的个体可能更容易患精神分裂症。