人胎盘间充质干细胞的分离与鉴定

目的从生产后胎盘中提取胎盘间充质干细胞,并对其进行干细胞特性鉴定。方法采用酶直接消化法从胎盘组织中提取间充质干细胞,并利用流式细胞术及染色体核型分析技术鉴定其干细胞特性。结果成功获得胎盘间充质干细胞,培养48h后即可见贴壁细胞,形态为成纤维细胞样,漩涡状生长,传代过程中细胞形态和特性未见明显变化,经细胞表面分子及染色体核型分析,证明其具备干细胞特性。结论用酶直接消化法所获得的胎盘间充质干细胞具备干细胞特性,可以作为临床干细胞治疗的种子细胞。

CD133^+结直肠肿瘤干细胞中ABC转运蛋白的表达

目的探讨CD133+结直肠肿瘤干细胞表面ABC转运蛋白的表达。方法运用流式细胞仪(FACS)分析结直肠肿瘤细胞中CD133的表达,通过实时荧光定量PCR分析9种常见ABC转运蛋白在结直肠肿瘤细胞及正常组织细胞中的表达情况,并筛选出在肿瘤组织中高表达的ABC转运蛋白做免疫荧光分析,观察CD133+细胞中ABC转运蛋白的表达。结果有(2.59±1.26)%的结直肠肿瘤细胞表达CD133表面标记,在9种ABC转运蛋白中,MRP1在结直肠肿瘤细胞中表达显著高于正常组织细胞,共聚焦显微分析后证明CD133+细胞为主要MRP1表达细胞。结论 MRP1为结直肠肿瘤中主要表达的ABC转运蛋白,并且这一转运蛋白集中表达在CD133+肿瘤细胞中。

体外分步诱导人母体来源胎盘间充质细胞分化为胰岛素分泌细胞

目的建立体外诱导人母体来源胎盘间充质细胞分化为胰岛素分泌细胞的分步诱导分化体系。方法分离纯化人母体来源胎盘间充质细胞,体外扩增后进行分步诱导分化,收获的胰岛素分泌细胞分别行免疫细胞化学和ELISA检测,并通过葡萄糖刺激的胰岛素释放试验(GSIS)评价其体外功能。结果分离纯化的人母体来源胎盘间充质细胞经培养及六步诱导分化后最终可形成胰岛素分泌细胞。免疫细胞化学检测诱导后细胞GLP-1、PDX-1和C-Peptide染色为阳性,ELISA结果显示该诱导细胞培养上清中胰岛素有较高的表达。诱导后的胰岛素分泌细胞在低糖和高糖刺激下的胰岛素释放量分别为(20.42±1.58)μIU/mL和(65.1±7.43)μI-U/mL(P<0.01)。结论通过建立体外人母体来源胎盘间充质细胞分化为胰岛素分泌细胞的分步诱导分化体系,获得具有一定胰岛素分泌能力的细胞,为胰岛移植的细胞来源提供了更有效的新途径。