宁夏某三甲医院深化高质量发展内涵路径探索

公立医院高质量发展已经进入到关键期。宁夏某三甲医院在推动医院高质量发展中面临党建与业务融合不够、质量管理控制体系不健全、学科建设水平不高、运营管理体系不完善、人才培养和引进力度不够、科研转化能力不强等问题。为此,医院通过实施党建引领、质量管理、学科建设、运营管理、人才强院、薪酬深化、创新驱动和后勤服务“八项工程”,取得了较好成效,医院医疗质量和效率不断提高,诊疗服务日趋完善,运营效能进一步提升,教学科研能力不断增强,人才活力进一步激发,为区域内公立医院高质量发展提供了可借鉴的经验。

清单式管理在宁夏某多院区医院周工作要点机制中的应用研究

公立医院多院区一体化管理是“国考”与公立医院高质量发展的必然要求。公立医院如何加快分院区同质化建设,实现院区之间信息高度共享,是当前多院区医院管理过程中的热点和难点问题。本文通过宁夏某多院区医院管理实践,探讨多院区医院一体化管理面临问题与实现路径,提出通过实施清单式管理运行周工作要点机制五项内容,强化一院多区同质化管理和院区间协同配合,为推进多院区医院一体化治理提供经验借鉴。

医院制度建设与管理实践研究

制度是规范医院员工行为的重要手段和评价依据。规范的制度管理流程有助于完善医院各部门、各科室制度建设,提升制度有效性,形成医院特有的制度文化。本研究基于宁夏某三级甲等医院制度建设及管理改进工作实践,阐述制度建设存在的共性问题,总结制度修订流程基本要点和制度修订及管理实践,提出制度管理改进建议。

我国医院薪酬制度现况及发展趋势研究

目的:了解医院薪酬领域的研究热点和动态趋势,为未来医院薪酬研究方向提供参考依据。方法:以CNKI数据库为数据来源,检索出2001-2023年有关医院薪酬的文献4119篇,使用文献计量对作者、发文机构、关键词突现情况进行可视化分析。结果:医院薪酬关注度在2001-2019年逐步上升,但整体发文质量不高,发文作者和发文机构的协作程度不紧密,研究主题主要集中在5个方面,研究热点以离职倾向和薪酬福利为主。结论:需要提升发文质量,拓宽加强作者和机构之间的合作,未来还需继续因地制宜探索新的薪酬改革方法和路径,提升广大医务人员积极性。

宁夏某三甲公立医院推动医院高质量发展举措探讨

国务院办公厅2021年6月发布的《关于推动公立医院高质量发展的意见》,已成为新阶段公立医院改革发展的根本遵循。为持续深化公立医院改革发展,宁夏某三甲公立医院紧紧围绕《意见》中推动公立医院高质量发展的重点任务,结合自身现状,探讨了构建新体系、引领新趋势、提升新效能、激活新动力、建设新文化、坚持和加强党对公立医院的全面领导六个方面的有效举措,为医院实现高质量发展打下了基础。同时,可供同级同类医院借鉴。

某医院Ⅰ类切口手术患者围术期抗菌药物的预防性使用情况分析

目的:分析医院骨科Ⅰ类切口手术患者围术期抗菌药物的预防性使用情况,为临床手术患者抗菌药物的合理使用提供参考。方法:选取2019年1月—12月医院骨科4603例行Ⅰ类切口手术治疗的患者作为研究对象,采集患者的手术类型、手术时长和抗菌药物的品种选择、使用时机、用药疗程等信息,分析Ⅰ类切口手术患者围术期抗菌药物的用药特点。结果:4603例Ⅰ类切口手术患者的手术类型主要为内固定术(1433例,占31.13%),其次为关节镜手术(716例,占15.56%)、关节置换术(712例,占15.47%)、内固定取除术(696例,占15.12%)和腰椎手术(551例,占11.97%);在手术时长分布方面,4603例手术患者中手术时长≤2 h的有3304例(占71.78%),而>2~3 h和>3 h的则分别有781例(占16.97%)和506例(占10.99%);4603例患者围术期预防性使用抗菌药物的有2867例(使用率为62.29%),其中预防用药例数最多的手术类型为内固定术(1335例,占46.56%)和关节置换术(712例,占24.83%),所用最多的药物品种则为头孢唑林(1529例,占53.33%)和头孢呋辛(1080例,占37.67%);在抗菌药物的预防给药时机方面,绝大多数患者为术前0.5~1 h(2758例,占96.20%),但仍存在术前未用、术后有的情况(10例,占0.35%);在预防用药疗程方面,大多数患者的疗程<12 h(2105例,占73.42%),但有461例(占16.67%)的疗程>48 h。结论:医院骨科Ⅰ类切口手术患者抗菌药物的预防性使用率较高,但其在品种选择、给药时机、用药疗程方面存在少数不合理使用的情况,医院行政部门应加强围术期抗菌药物的管理和宣教,以提高临床抗菌药物的用药水平。

宁夏“互联网+医疗健康”路径建设与实践

2018年国家卫生健康委将宁夏确定为全国首个“互联网+医疗健康”示范区,通过各级各部门的共同努力,探索出适合宁夏的“互联网+医疗健康”发展路径,最终形成了可借鉴、可推广、可复制的建设经验。文章从制度规范、管理模式、科技应用、产业发展等方面介绍宁夏“互联网+医疗健康”的建设经验和取得成效,总结不足之处并提出今后的工作方向,旨在进一步促进“互联网+医疗健康”的可持续发展。

枸杞多糖通过促进胆囊癌细胞铁死亡抑制其恶性进展

目的探究枸杞多糖(LBP)通过调控细胞铁死亡对胆囊癌细胞(NOZ和SGC-996)增殖和转移的影响。方法不同剂量的LBP处理体外培养NOZ和SGC-996细胞;将细胞分为对照组(Control)、20μmol/LLBP组、40μmol/LLBP组、60μmol/LLBP组、80μmol/LLBP组、LBP+Fer-1组。用MTT法检测细胞活力;EdU法检测细胞增殖能力;Tran swell检测细胞侵袭能力;比色法检测Fe^(2+)的水平,BODIPYTM581/591C11分子探针测定活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)的水平;Westernblot检测铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)酰基辅酶a合成酶长链家族成员4(ACSL4)、β-catenin和Wnt3A蛋白表达。结果与对照组比较,40μmol/LLBP组、60μmol/LLBP组细胞活力、增殖、侵袭能力显著降低(均P<0.05),Fe^(2+)水平、ROS、MDA活性明显增加(均P<0.05),GPX4、β-catenin和Wnt3A蛋白表达显著减少,ACSL4蛋白表达明显增加(均P<0.05)。与LBP组比较,LBP+Fer-1组细胞活力、增殖、侵袭能力显著提高(均P<0.05)。结论LBP通过诱导胆囊癌细胞铁死亡进而抑制其细胞的增殖和转移。

枸杞多糖通过下调PD-L1表达抑制胆囊癌细胞增殖、侵袭及免疫逃逸的实验研究

目的探讨枸杞多糖(LBP)对胆囊癌细胞增殖、侵袭以及免疫逃逸的影响。方法QBC939和SGC-996胆囊癌细胞分为LBP组、Control组、LBP+pcDNA组和LBP+PD-L1组;将外周血单个核细胞(PBMCs)与植物血凝素(PHA)共孵育,记为PHA组,未共孵育的PBMCs记为NC组;上述各组QBC939和SGC-996细胞分别与PBMCs共孵育,分为PHA+Control组、PHA+LBP组、PHA+LBP+pcDNA组和PHA+LBP+PD-L1组。CCK-8、流式细胞术和Transwell实验分别检测细胞增殖、凋亡及侵袭能力;收集健康捐献者的外周血,采用Ficoll-Conray密度梯度法分离PBMCs,ELISA试剂盒检测PHA诱导的PBMCs中IFN-γ的释放。qPCR和Western blotting法检测程序性死亡配体1(PD-L1)的表达量。结果相较于Control组,LBP组QBC939和SGC-996细胞增殖(48.00±8.00 vs.100±9.17;39.67±4.51 vs.100±7.00)及侵袭(61.33±8.63 vs.110.33±12.50;51.00±8.00 vs.118.67±14.01)受到抑制,细胞凋亡率升高〔(21.10±2.03)%vs.(6.67±1.31)%;(24.30±2.11)%vs.(6.20±1.60)%〕,差异有统计学意义(P<0.05)。此外,与PHA组比较,PHA+Control组IFN-γ含量降低(2.37±0.15 vs.0.76±0.12,3.11±0.25 vs.1.04±0.19);相较于PHA+Control组,PHA+LBP组IFN-γ含量升高(1.84±0.12 vs.0.76±0.12,2.52±0.20 vs.1.04±0.19)。与Control组比较,LBP组QBC939或SGC-996细胞中PD-L1 mRNA(1.00±0.07 vs.0.30±0.08,1.00±0.09 vs.0.21±0.07)以及蛋白(1.00±0.11 vs.0.47±0.08,1.00±0.08 vs.0.32±0.07)含量显著降低(P<0.05)。相较于LBP+pcDNA组,LBP+PD-L1组QBC939或SGC-996细胞细胞活力增强〔(48.33±7.02)%vs.(86.00±6.56)%;(40.33±7.02)%vs.(79.33±7.03)%〕,细胞凋亡率降低〔(20.36±3.01)%vs.(13.30±2.01)%;(24.50±1.93)%vs.(14.30±1.77)%〕,以及细胞侵袭增强(56.67±10.01 vs.90.33±9.61;48.33±9.61 vs.95.67±9.50;P<0.05);与PHA+LPB+pcDNA组比较,PHA+LPB+PD-L1组PAH诱导的PBMCs IFN-γ释放显著降低(1.86±0.16 vs.0.77±0.12,P<0.05)。结论枸杞多糖通过下调PD-L1的表达抑制胆囊癌细胞增殖,侵袭以及免疫逃逸。

内镜夹闭乳头成形术在内镜逆行胰胆管造影术中的应用

目的探讨内镜夹闭乳头成形术在内镜逆行胰胆管造影术(ERCP)中的临床应用价值。方法选取2021年11月-2022年11月该院行ERCP的患者62例。随机行内镜乳头夹闭成形术32例,成功30例。分为两组,内镜夹闭乳头成形术成功组(A组,n=30)和十二指肠乳头未夹闭组(B组,n=30)。比较两组患者的近期并发症和远期并发症发生率。结果内镜夹闭乳头成形术的成功率为93.8%(30/32)。两组患者术后胰腺炎、术后出血和术后胆管炎的发生率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);两组患者均无十二指肠穿孔病例。两组患者1年内胆管炎发病率和胆总管结石复发率比较,差异均无统计学意义(P>0.05),但A组胆管炎发生率+结石复发率明显低于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论内镜夹闭乳头成形术对内镜下乳头括约肌大球囊扩张术(EPLBD)后乳头的夹闭成形成功率高,手术安全,可减少远期胆管炎的发生,降低结石复发率。

血清缺氧诱导因子1α与IgA肾病肾间质病变及其预后关系的研究

目的探讨血清缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)与原发性IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)肾间质病变及其预后的关系。方法回顾性分析宁夏回族自治区人民医院(宁夏医科大学附属自治区人民医院)2017年8月至2021年8月明确诊断为IgAN的142例患者临床资料,依据血清HIF-1α水平,以肾间质病变的严重程度分为两组,肾小管间质病变比例≤25%为肾间质病变轻组,>25%为肾间质病变重组。比较两组患者的指标差异,并将两组差异有统计学意义的指标进行多因素分析;将血清HIF-1α与肾病进展的危险因素指标进行相关分析。结果两组患者性别、24 h尿蛋白定量、体重指数、血清白蛋白、低密度脂蛋白胆固醇、三酰甘油、高血压等资料比较,差异均无统计学意义(P>0.05);肾间质病变重组患者年龄[(44.45±9.65)岁比(38.36±11.09)岁]、血肌酐[(116.28±44.75)μmol/L比(84.82±42.06)μmol/L]、血尿酸[(389.03±104.57)μmol/L比(353.39±90.01)μmol/L]、血清HIF-1α[(213.53±68.86)pg/L比(141.13±60.61)pg/L]高于肾间质病变轻组(P<0.05),而血红蛋白[(124.11±28.24)g/L比(134.18±22.07)g/L]低于肾间质病变轻组(P<0.05)。多因素分析提示血清HIF^(-1)α与年龄是肾间质病变的危险因素。血清HIF-1α与血肌酐呈正相关(r=0.465,P<0.05),与24 h尿蛋白定量呈正相关(r=-0.420,P<0.05),与血尿酸呈正相关(r=-0.217,P<0.05),与血红蛋白呈负相关(r=-0.284,P=0.003)。血清HIF-1α的受试者工作特征曲线分析提示曲线下面积为0.760(P<0.001),血清HIF-1α诊断肾功能异常的临界点为201.50 pg/L,尤登指数为0.44。结论血清HIF-1α与IgAN肾间质病变相关,同时与IgAN进展的危险因素有相关性,临床上可以关注血清HIF-1α水平以判断IgAN的预后。

深度学习重建算法联合低管电压在头颈部CT血管成像中的应用

目的探讨深度学习图像重建(DLIR)算法联合低管电压(70 kVp)在头颈部CT血管成像中的应用价值。资料与方法回顾性收集2021年11月—2022年11月宁夏回族自治区人民医院行头颈部CT血管成像检查的40例患者,管电压70 kVp,管电流智能调控SmartmA模式。对原始数据进行自适应统计迭代重建(ASiR-V60%、ASiR-V90%)及DLIR(DLIR-L、DLIR-M、DLIR-H),比较不同算法及水平重建图像的主观及客观评价指标。结果颈部及颅内动脉不同水平ASiR-V及DLIR重建图像CT值差异均无统计学意义(P>0.05)。随着ASIR-V及DLIR重建水平增加,颈部及颅内图像噪声均减低,DLIR-H与ASiRV60%差异均有统计学意义(P<0.05),分别减低24.30%、29.42%;颈部及颅内图像信噪比(SNR)、对比噪声比(CNR)均升高,DLIR-H重建图像SNR、CNR最高。颈总动脉分叉部、颈内动脉C4段、椎动脉V4段SNR、CNR与ASiR-V60%差异均有统计学意义(P<0.05),SNR分别提高55.60%、43.90%、44.66%,CNR分别提高55.57%、44.24%、45.10%;大脑中动脉SNR、CNR较ASiR-V60%提高45.39%、45.89%,差异有统计学意义(P<0.05)。ASiR-V90%主观评分较ASiR-V60%降低,差异无统计学意义(P>0.05)。DLIR主观评分随重建水平升高而升高,DLIR-H较DLIR-M、DLIR-L差异有统计学意义(P均<0.05),DLIR-H及DLIR-M的主观评分高于ASiR-V60%与ASiR-V90%,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论在低管电压头颈部CT血管成像中,与ASiR-V相比,DLIR可以进一步降低图像噪声,提升图像质量和诊断信心,其中DLIR-H表现最佳。

PI⁃RADS v2.1联合PSAD对前列腺显著癌的诊断价值

目的:探讨前列腺影像报告与数据系统2.1版(PI⁃RADS v2.1)联合临床指标对前列腺显著癌(csPCa)的诊断价值。方法:回顾性收集2022年1月至2022年12月在宁夏回族自治区人民医院行前列腺多参数磁共振成像(mp⁃MRI)检查,病理证实为csPCa患者47例,非前列腺显著癌(non⁃csPCa)患者53例。收集临床指标,包括年龄、前列腺特异性抗原(PSA)、游离PSA/总PSA(fPSA/tPSA)、前列腺特异性抗原密度(PSAD)及前列腺体积(PV)。应用PI⁃RADS v2.1评分对mp⁃MRI前列腺病变进行评估。采用线性加权Kappa检验对评分者间的一致性进行评估。采用Spearman相关性分析法对PI⁃RADS v2.1评分与前列腺Gleason评分之间的相关性进行分析。根据病理结果将患者分为csPCa组和non⁃csPCa组,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析两组间存在显著差异的各指标对csPCa的诊断效能。结果:PI⁃RADS v2.1评分与Gleason评分之间存在良好的相关性(r=0.714,P<0.01)。csPCa组与non⁃csPCa组间PSA、fPSA/tPSA、PSAD、PV及PI⁃RADS V2.1评分差异均具有统计学意义(均P<0.05),年龄差异不具有统计学意义(P=0.05)。ROC曲线分析显示:PSA、fPSA/tPSA、PSAD、PV及PI⁃RADS V2.1评分的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.75、0.67、0.78、0.63及0.84;PSAD联合PI⁃RADS V2.1评分的AUC为0.91。结论:PI⁃RADS V 2.1评分联合PSAD有助于进一步提高csPCa的诊断效能,在一定程度上避免患者漏诊以及不必要的穿刺。

Neuroform Atlas支架在宽颈颅内动脉瘤的应用价值

目的探讨颅内宽颈动脉瘤栓塞治疗中Neuroform Atlas支架的临床应用价值。方法回顾性分析52例宽颈动脉瘤患者的临床资料,均在Neuroform Atlas支架的辅助下成功完成介入栓塞手术治疗。采用Raymond Roy分级评估动脉瘤栓塞情况,改良Rankin量表(Modified Rankin Scale,mRS)评分评估患者预后,对术后并发症与动脉瘤复发进行总结结果在52例宽颈动脉瘤患者中,动脉瘤位于大脑中动脉6例,前交通动脉14例,后交通动脉22例,大脑前动脉2例,基底动脉尖2例,椎动脉V4段2例,眼动脉段4例。40例破裂动脉瘤,12例未破裂动脉瘤。术后脑梗死2例,脑梗死合并出血2例,围手术期未见其他明显的介入相关并发症。术后即刻造影显示动脉瘤完全闭塞40例、瘤颈残留6例、瘤体小部分残瘤6例;随访6~12个月,动脉瘤完全闭塞46例,瘤颈残留4例,瘤体小部分残留2例。mRS评分在出院时:0分38例,1分10例,2分2例,3分2例;随访6~12个月,mRS评分0分46例,1分4例,2分2例。结论宽颈动脉瘤患者使用Neuroform Atlas支架辅助弹簧圈栓塞,具有手术成功率高、并发症低等优点,但需进一步跟踪观察其远期效果。

圆锥角膜患者角膜交联术后角膜光密度的变化

目的:观察圆锥角膜患者行角膜交联术后角膜光密度的变化规律。方法:采用回顾性研究。选取2020-04/2022-04在宁夏眼科医院确诊为进展期圆锥角膜并行角膜交联术的患者32例43眼。Pentacam分析系统将角膜分为前层(前120μm)、中层及后层(后60μm),并依据直径划分为直径0-2、2-6、6-10、10-12 mm及全直径范围五个区域,测量不同范围的角膜光密度。比较术前,术后1、3、6 mo角膜光密度的变化。结果:纳入患者术前和术后6 mo裸眼视力和最佳矫正视力及眼压比较均有差异(均P<0.05),角膜内皮细胞比较无差异(P=0.477)。在角膜前层、中层、全层的直径0-2、2-6、6-10 mm及全直径范围内,角膜光密度术后1 mo时到达峰值,术后3 mo与6 mo有所下降,但仍比术前高。角膜光密度在前层及全层范围内与Kmax正相关(r=0.164,P=0.016;r=0.152,P=0.023)。结论:角膜光密度在角膜交联术后1 mo时达到峰值,随后开始逐步下降,术后6 mo趋于稳定。

骨科脊柱不同类型Ⅰ类切口手术围术期预防性应用抗菌药物680例分析

目的分析骨科脊柱不同类型Ⅰ类切口手术围术期预防性应用抗菌药物的情况,为临床应用与管理提供参考。方法采用回顾性调查研究,调取2019年1—12月宁夏回族自治区某三级甲等医院骨科脊柱Ⅰ类切口手术病例680例,分析患者手术类型、手术时间、抗菌药物预防性使用率、品种选择、给药时机及疗程。结果680例病例中,手术时间≤2 h的病例360例,占比为52.94%;手术时间>3 h的病例198例,占比为29.12%。预防性使用抗菌药物476例,预防性使用率为70.00%。围术期预防性应用抗菌药物主要分布在各类融合术、各类内固定术及装置植入术、各类病灶切除及活检术,合计占比为93.06%。预防性应用抗菌药物主要选用头孢唑林296例(62.19%)、头孢呋辛132例(27.73%)。术前0.5~1 h内给药450例,占比为94.54%。疗程≤24 h的病例占比为59.67%,>48 h的病例占比为28.99%。结论该院骨科脊柱不同类型Ⅰ类切口手术围术期预防性应用抗菌药物基本合理,但仍存在一些问题,有待进一步规范化管理,提高合理用药水平。

基于FAERS数据库的咪达唑仑不良反应信号挖掘

目的 基于美国FDA不良反应报告系统(FAERS)数据库,挖掘咪达唑仑不良事件(ADE)风险信号,为临床安全用药提供参考。方法 利用OpenVigil软件进行数据提取和查询FAERS ADE报告系统,检索2001年1月1—2023年9月30日咪达唑仑ADE报告,采用国际医学用语词典(MedDRA)系统器官分类(SOC)和首选术语(PT)进行分类,采用报告比值比法(ROR)、比例报告比值比法(PRR)进行数据挖掘。结果 共收集咪达唑仑ADE报告2 187份,严重ADE发生率为33.65%。共挖掘出ADE信号137个,涉及17个SOC。筛选同时符合2种算法,并排除无关信号,最终获得ADE信号113个,涉及14个SOC。未在我国现有药品说明书中提及的信号有15个,包括代谢性酸中毒、循环性虚脱、肝性脑病及肠缺血等。结论 对咪达唑仑真实世界ADE数据挖掘和分析,有助于汇总常见ADE,发现新的潜在风险信号,为临床提供合理、安全用药依据。

针刀调控软骨细胞自噬维持骨关节炎软骨细胞的稳态

背景:针刀是治疗骨关节炎的有效方法,临床疗效肯定,但具体机制尚未明确。目的:探讨针刀调控软骨细胞自噬维持骨关节炎软骨细胞稳态的作用。方法:采用随机数字表法将28只新西兰兔分为对照组、骨关节炎组、针刀组和透明质酸组,每组7只,后3组保持左后肢过伸位采用石膏绷带固定6周建立膝骨关节炎模型,建模成功后,对照组与骨关节炎组不进行任何治疗,针刀组给予针刀治疗(15 min/次,1次/周),透明质酸组膝关节腔内注射透明质酸钠溶液(1次/周),均连续治疗5周。末次治疗后第2天,采用DR片观察兔膝关节宏观结构,透射电镜观察软骨细胞超微结构,Tunel染色检测软骨细胞凋亡,Western blot检测PI3K/Akt/mTOR通路及自噬相关蛋白表达。结果与结论:(1)DR片显示,骨关节炎组兔膝关节间隙变窄、周围骨赘形成;相较于骨关节炎组,透明质酸组、针刀组兔膝关节间隙增宽,周围骨赘减少;(2)透射电镜下可见骨关节炎组兔膝关节软骨细胞内自噬体数量减少,细胞核皱缩、核膜破裂,细胞器形态不完整、细胞呈现明显死亡趋向;相较于骨关节炎组,透明质酸组与针刀组自噬体明显增加,细胞核核膜完整,细胞生存状态良好;(3)Tunel染色结果显示,相较于骨关节炎组,透明质酸组、针刀组凋亡软骨细胞明显减少;(4)Western blot检测结果显示,与对照组比较,骨关节炎组Beclin1、Cath D和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达降低(P <0.05),p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR蛋白表达升高(P <0.05);与骨关节炎组比较,透明质酸组和针刀组Beclin1、Cath D和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达升高(P <0.05),p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR蛋白表达降低(P <0.05);(5)结果表明,针刀可通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路传导来提高软骨细胞自噬水平,维持软骨细胞稳态,最终延缓软骨退变。

miR-27a-3p激活MAPK信号通路促进人增生性瘢痕成纤维细胞的增殖

背景:目前多项研究证实了丝裂原活化蛋白激酶信号通路参与了细胞的增殖过程,且miRNA参与增生性瘢痕的发生发展,因此深入探讨了miR-27a-3p和丝裂原活化蛋白激酶信号通路在病理性瘢痕形成中的作用。目的:探究miR-27a-3p通过丝裂原活化蛋白激酶信号通路对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响。方法:收集皮肤标本并分别分离出原代成纤维细胞,倒置显微镜观察原代细胞,免疫荧光予以验证;采用qRT-PCR检测miR-27a-3p在组织中的相对表达水平;利用数据库预测miR-27a-3p的靶基因,再将预测的靶基因进行基因本体功能富集分析及京都基因与基因组百科全书生物通路富集分析;设置分组为:空白对照组、阴性对照组、miR-27a-3p过表达组、miR-27a-3p抑制组、miR-27a-3p过表达+p38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂组、miR-27a-3p过表达+细胞外信号调节蛋白激酶抑制剂组、miR-27a-3p过表达+c-Jun氨基末端激酶抑制剂组,Western blot检测细胞外调节蛋白激酶、c-Jun氨基末端激酶和p38激酶总量及其磷酸化水平,采用CCK-8法和EdU检测细胞增殖情况。结果与结论:①与正常皮肤成纤维细胞相比,增生性瘢痕成纤维细胞的增殖活性更强(P<0.05),增殖速度也更快(P<0.001);②与正常皮肤相比,miR-27a-3p在增生性瘢痕中呈高表达(P<0.001);③与阴性对照组相比,过表达miR-27a-3p能促进细胞的增殖活性(P<0.001)和增殖水平(P<0.001);④与阴性对照组相比,敲低miR-27a-3p能抑制细胞的增殖活性(P<0.05)和增殖水平(P<0.001);⑤与阴性对照组相比,过表达miR-27a-3p促进细胞外调节蛋白激酶、c-Jun氨基末端激酶和p38丝裂原活化蛋白激酶的磷酸化水平(P<0.05);与阴性对照组相比,敲减miR-27a-3p能抑制细胞外调节蛋白激酶、c-Jun氨基末端激酶和p38丝裂原活化蛋白激酶的磷酸化水平(P<0.05);⑥与miR-27a-3p过表达组相比,细胞外调节蛋白激酶、c-Jun氨基末端激酶和p38丝裂原活化蛋白激酶的特异性抑制剂可逆转miR-27a-3p对成纤维细胞的增殖活性(P<0.01)和增殖水平(P<0.001);⑦提示miR-27a-3p通过激活丝裂原活化蛋白激酶信号通路促进人增生性瘢痕成纤维细胞的增殖。

Ras同源基因家族成员A/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶信号转导通路在膝骨性关节炎软骨组织中的表达及意义

目的:探究Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶(ROCK)信号转导通路在膝骨性关节炎软骨组织中的表达及意义。方法:将取自因原发性膝骨性关节炎(KOA)行全膝关节置换术(TKA)去除的30例患者的膝关节软骨组织设为观察组,将同期行下肢离断术去除的25例患者的膝关节软骨组织设为对照组。比较两组标本外观形态,HE染色、番红O-固绿染色、电镜扫描结果。通过免疫组织化学(IHC)染色、免疫印迹(Western blot)及实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测RhoA和ROCK蛋白及mRNA的表达变化。结果:观察组股骨髁软骨表面粗糙,缺损明显,呈溃疡状,染色不均匀,潮线不完整。对照组软骨面光滑平整,组织分层明显,颜色均匀。电镜扫描结果显示,观察组软骨组织毁损严重,结构不清;对照组表面光洁,软骨间质均匀。与对照组比较,观察组关节软骨组织中RhoA、ROCK蛋白及mRNA表达量高于对照组(均P<0.05)。结论:RhoA/ROCK信号转导通路中的RhoA、ROCK蛋白及mRNA在KOA患者关节软骨组织中表达明显高于行下肢离断术患者,提示RhoA/ROCK信号转导通路与KOA软骨退变具有相关性,可能对KOA的发生与发展起到了重要作用。