硫酸右旋糖苷抑制人胃癌细胞粘附以及整合素β_1基因表达的机制研究

目的通过观察人胃癌MKN1细胞的粘附过程和测定整合素β1cDNA的表达水平,研究硫酸右旋糖苷(dextransulfate,DS)对人胃癌MKN1细胞粘附的抑制作用的机制。方法分别在培养液中加入DS或PBS对MKN1细胞进行培养,用荧光免疫细胞染色法和共聚焦显微镜对固定细胞和活细胞在培养盘上的贴壁过程及形态变化进行观察,用RT-PCR测定整合素β1的cDNA表达。结果MKN1细胞通过变形,形成伪足粘附到培养盘,并与其他细胞接触形成单细胞层。免疫染色可见整合素β1在细胞膜上有强烈的表达,并且形成整合素集落。DS抑制整合素β1的表达并使已经形成的整合素集落区域减少;使MKN1细胞的伪足缩短,表现出维持圆形的倾向。在使用DS培养4h后仍有部分细胞处于游离状态,分别收集游离细胞和贴璧细胞,用RT-PCR测定整合素β1的cDNA表达。实验组贴壁细胞和游离细胞内整合素β1的cDNA的表达水平分别减少到对照组细胞的74%和38%。结论DS对人胃癌细胞MKN1粘附过程的抑制与整合素β1表达的减弱有关。

硫酸右旋糖苷对人胃癌MKN1细胞的形态学影响

目的探讨硫酸右旋糖苷(DS)对人胃癌MKN1细胞株的形态学影响。方法用位相差显微镜、荧光免疫细胞染色法和共聚焦显微镜观察固定细胞和活细胞在培养盘上的附着过程及形态变化。结果MKN1细胞通过变形,形成伪足黏附到培养盘,并与其他细胞接触形成单细胞层。DS抑制了MKN1细胞的黏附,培养48h后仍有部分细胞处于游离状态。结论DS阻止人胃癌细胞株MKN1的黏附过程。

硫酸右旋糖苷降低人胃癌MKN1细胞的黏附及整合素β_1的表达

目的 :探讨硫酸右旋糖苷 (DS)对人胃癌MKN1细胞株的黏附抑制的机制。方法 :用荧光免疫细胞染色法和共聚焦显微镜观察固定细胞和活细胞在培养盘上的附着过程及形态变化。用Westernblotting法对整合素β 1 蛋白的表达进行分析。结果 :MKN1细胞通过变形 ,形成伪足黏附到培养盘 ,并与其他细胞接触形成单细胞层。免疫染色可见整合素 β 1在细胞膜上有强表达 ,并且形成整合素集落。DS抑制了MKN1细胞的黏附 ,培养48h后仍有部分细胞处于游离状态。DS抑制整合素 β1 的表达并减少已经形成的整合素集落区域。使用DS后 ,黏附细胞整合素β1 蛋白的表达分别减少到非治疗细胞的64 % (130ku)和57 % (110ku) ,游离细胞整合素β 1蛋白的表达分别减少到非治疗细胞的51 % (130ku)和15 % (110ku)。MKN1细胞同时还表现出维持圆形形状的倾向。结论 :DS阻止人胃癌细胞株MKN1的黏附过程与抑制整合素 β1 的表达有关。