小白菊内酯对地塞米松诱导的成骨细胞增殖和分化的影响

目的探讨小白菊内酯(parthenolide,PTL)对地塞米松(dexamethasone,Dex)诱导的成骨细胞(MC3T3-E1)成骨分化及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法用浓度为2.5~80μmol/L的小白菊内酯与地塞米松共同处理MC3T3-E1细胞,CCK-8法检测细胞增殖活性;将MC3T3-E1细胞分为对照组(Control组)、地塞米松组(Dex组)、小白菊内酯低、中、高浓度组(PTL-L组、PTL-M组、PTL-H组)、小白菊内酯高浓度+Wnt抑制剂组(PTL-H+DKK1组),碱性磷酸酶(ALP)染色检测细胞ALP活性,茜素红S染色观察细胞矿化结节形成;Western blot检测细胞Runt相关转录因子2(RUNX2)、骨钙素(OCN)、骨形成蛋白2(BMP2)、细胞周期蛋白Cyclin D1及Wnt/β-catenin通路相关蛋白表达水平。结果浓度为2.5~80μmol/L的小白菊内酯可促进地塞米松诱导的MC3T3-E1细胞增殖,选择小白菊内酯浓度为5.0、10.0、20.0μmol/L进行后续实验;与Control组相比,Dex组ALP活性显著降低,矿化结节减少,RUNX2、OCN、BMP2、Cyclin D1、Wnt3a、β-catenin蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与Dex组比较,PTL-L组、PTL-M组、PTL-H组ALP活性、矿化结节数依次升高,RUNX2、OCN、BMP2、Cyclin D1、Wnt3a、β-catenin蛋白表达水平依次升高(P<0.05);与PTL-H组比较,PTL-H+DKK1组ALP活性与矿化结节显著降低,UNX2、OCN、BMP2、Cyclin D1、Wnt3a、β-catenin蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论小白菊内酯通过激活Wnt/β-catenin信号通路,减轻地塞米松对成骨细胞增殖与分化的抑制作用。