IgG1类抗IgE Fc单克隆抗体抑制人肥大细胞脱颗粒作用研究

目的探究IgG1类抗IgE Fc单克隆抗体对人肥大细胞脱颗粒作用的影响。方法采用骨髓杂交瘤技术制备IgG1类大鼠抗人IgE Fc单克隆抗体,ELISA法鉴定杂交瘤细胞分泌的特异性抗体亚类;进一步体外培养人LAD2肥大细胞,分别以Compound 48/80、Compound 48/80+hum-IgE-Fc、Compound 48/80+anti-IgE-Fc mAb、Compound 48/80+IgE-Fc+anti-IgE-Fc mAb致敏LAD2肥大细胞48 h,Compound 48/80刺激45 min后甲苯胺蓝染色,收各组上清液,用ELISA检测HIS和TPS的释放浓度,Western blot检测各组TPS和CD32b分子表达水平。结果成功制备2株分泌IgG1类Anti-IgE-Fc mAb的杂交瘤细胞株,与对照组相比,Compound 48/80促进LAD2细胞脱颗粒效应,HIS和TPS的释放浓度明显增加(P<0.05),且肥大细胞TPS蛋白表达上调。Compound 48/80+hum-IgE-Fc及Compound 48/80+anti-IgE-Fc mAb组较Compound48/80组LAD2细胞颗粒释放浓度HIS和TPS及CD32b蛋白差异无统计学意义(P>0.05);Compound48/80联合hum-IgE-Fc和anti-IgE-Fc mAb时显著抑制肥大细胞脱颗粒反应,同时肥大细胞TPS蛋白表达下调,表面抑制性分子CD32b表达上调(P<0.05)。结论IgG1类大鼠抗人IgE Fc单克隆抗体在游离IgE-Fc存在时可抑制人肥大细胞脱颗粒,这种作用可能主要由CD32b介导。