西格列汀对阿托伐他汀细胞内药物蓄积的影响及其改变OATP1B1的表达

目的证实阿托伐他汀可以通过OATP1B1进行转运,探讨西格列汀对阿托伐他汀在HEK293T细胞内药物蓄积的影响,为两药在临床的联合应用提供实验依据。方法建立OATP1B1过表达HEK293T(HEK293T^(1B1))细胞。采用MTT法检测不同浓度的阿托伐他汀和西格列汀对HEK293T细胞活力的影响;LC-MS/MS法检测阿托伐他汀单药和/或与西格列汀混合后在HEK293T^(1B1)细胞内不同时间点的浓度;免疫印迹法分析西格列汀对OATP1B1表达水平的影响。结果阿托伐他汀在20和40μmol·L^(-1)的高浓度下对HEK293T细胞有略微的抑制作用;HEK293T^(1B1)细胞对阿托伐他汀的摄取量随着孵育时间的延长相应增加,但在30~60 min时摄取量几乎不再变化。两药合用时,随着加入的西格列汀浓度的升高,阿托伐他汀在HEK293T^(1B1)细胞中的蓄积量进一步增加,差异具有统计学意义(P<0.05);免疫印迹实验的结果显示1.0μmol·L^(-1)的西格列汀对OATP1B1蛋白表达水平的上调作用最明显,在10 min时可达到高峰,20 min以后,蛋白的表达量逐渐减少。结论阿托伐他汀在肝细胞的转运水平与OATP1B1表达水平有关,而西格列汀可上调OATP1B1表达,因此两药具有潜在相互作用的可能。