乳酸菌的高密度培养及发酵剂保藏技术的初步研究

对1株经分离筛选得到的榨菜低盐腌制优良乳酸菌H17进行高密度培养性能研究,以细胞光密度(OD600)为指标,考察了高密度细胞培养的培养基条件、缓冲剂或中和剂对细胞生长的影响;由优化条件得到的培养物作发酵剂,比较了保藏条件对发酵活性的影响,筛选了冷冻保护剂及其合适的浓度。结果表明,选择基础培养基加5%蕃茄汁、培养温度30℃和Na2CO3为中和剂的条件下培养16h后乳酸菌活菌数最高达到1.14×1010CFU/mL;在生长稳定前期收获菌体,进行冷激处理,以5%蔗糖谷氨酸钠为冷冻保护剂,可提高乳酸菌冻干保存的存活率,达到64.1%。

应用16SrDNA克隆文库法分析雪菜低盐腌制过程微生物群落的多样性

雪菜低盐腌制保藏对资源节约,减少含盐废水排放及蔬菜营养保持等具有重要意义。应用构建的16S rDNA克隆文库方法,研究低盐腌制雪菜在不同发酵时期的细菌多样性及主要指标的变化情况。结果表明,整个腌制体系微生物种类丰富,主要分为2大类:肠杆菌目(Enterobacteriales)和乳杆菌目(Lactobacillales)。随着腌制发酵时间的不同,5个不同时期环境中细菌群落组成存在较大的差异。腌制初期阶段,主要优势菌群为肠杆菌目中的肠杆菌属和欧文菌属;发酵中、后期主要优势菌群发生改变,主要为乳杆菌目中的乳杆菌属,其中植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)起主导作用。此外,雪菜腌制过程中乳酸菌数量及pH也相应地发生变化。

榨菜低盐腌制过程的微生物群落结构与动态分析

采用平板菌落计数法及PCR-SSCP(单链构象多态性)方法,分析低盐榨菜腌制过程中微生物群落结构及数量的变化情况;对通过SSCP方法得到的图谱中11条优势条带序列进行比对,结果表明,在榨菜腌制发酵初期,肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)为主要的优势菌群;随着腌制环境条件的变化,出现植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)和短乳杆菌(Lactobacillus brevis);在腌制保存后期起主导作用的微生物为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)和Lactobacillus versmoldensis;榨菜腌制保藏过程中pH值始终呈下降趋势,乳酸菌数量经历了一个先急速上升后逐渐趋缓,并稳定在一定数量的过程。对优化条件下制得的不同阶段的高品质低盐腌制榨菜样品进行微生物结构及分布分析,证实了不同乳酸菌的作用。

乳酸菌高抗氧化活性菌株的筛选及鉴定

乳酸菌的抗氧化性已得到体内体外试验的证实。从4种食物样品中初步筛选得到20株乳酸菌菌株。以VC作阳性对照,超氧阴离子自由基清除率及抗脂质过氧化率为指标复筛,得到2株优良菌株H15和H17;经16S rDNA序列分析鉴定及鼠李糖发酵试验,得出H15为戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus),H17为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。通过乳酸菌菌悬液及无细胞提取物的抗氧化性能比较研究,推测出乳酸菌的抗氧化性能是因其不同且相对独立的抗氧化机制所致;乳酸菌菌体表面的某些成分同样具有一定的抗氧化性,然而这些物质的抗氧化性能随菌体及自由基的不同而不同。

乳酸菌低盐腌制榨菜脆性与果胶含量的关系研究

目的:研究乳酸菌低盐腌制的榨菜的脆性与果胶含量的关系。方法:采用间-羟基联苯法检测半乳糖醛酸含量,从而间接得到腌制榨菜醇不溶物(AIS)中果胶含量的变化。结果:乳酸菌控制榨菜低盐腌制过程,且正常发酵保藏过程中总果胶含量趋于稳定,总果胶(干基)质量分数维持在2%左右,而水溶性果胶(WSP)和热水溶性果胶(HWSP)分别达到17%和35%,六偏磷酸钠溶解性果胶(HXSP)下降至22%。在软化至腐烂过程中,总果胶含量显著下降,同时水溶性果胶组分增加,六偏磷酸钠溶解性果胶下降明显。结论:可根据腌制榨菜醇不溶物(AIS)中果胶组分含量的变化来监测低盐腌菜脆性变化。

月桂酸单甘油酯微乳液抑菌机理初探

测定了月桂酸单甘油酯微乳液(ME)菌株S1的最低抑菌浓度,同时对ME作用下菌株S1的生长曲线、电导率、核酸物质泄漏率、菌体电镜扫描图和钠盐耐受性进行研究,探讨ME的抑菌机理。结果表明,ME能够有效抑制菌株S1的生长和延长生长延滞期,其最小抑制质量浓度为125μg/mL。ME作用于菌株S1后,菌悬液相对电导率和核酸物质泄漏率均显著增大,钠盐耐受性降低。扫描电镜结果显示:菌体细胞结构被破坏,表面出现缢痕,部分细胞干瘪变形。综合不同因素的影响情况,推测膜通透性的改变是ME导致菌株S1死亡的主要原因。

降解畜禽废物光合细菌的筛选及其代谢特性

目的:从自然界中分离光合细菌,对其代谢氮磷硫的特性进行初步研究,为其在畜禽废物净化等应用奠定基础。方法:采用厌氧培养法富集、半固体试管法和双层平板法选择性筛选光合细菌,得到了3株光合细菌分别记为psb-L、psb-H和psb-S。在富集培养基中分别添加KH2 PO4、Na2 S和以KNO3作唯一无机氮源进行培养,研究试验菌株对氮、磷、硫化合物的代谢能力。结果:在设计的培养基中,3株光合细菌psb-L、psb-H和psb-S都能生长;经培养4d后对磷酸盐的代谢率分别为15.80%、13.49%和13.01%;经培养6d后对硫化物的代谢率分别为46.58%、32.88%和39.18%;培养17d后对硝酸盐的代谢率分别达到96.38%、89.31%和90.04%;为进一步应用于畜禽废物发酵提供参考依据。