大海马ACE抑制肽制备及其抗氧化能力的测定

为了从大海马蛋白中制备出ACE抑制肽及分析肽的抗氧化能力,本文通过比较小分子肽与ACE间的关系对蛋白酶进行了选择,筛选出木瓜蛋白酶作为海马蛋白的水解酶。然后,在单因素实验基础上采用响应面法对木瓜蛋白酶制备ACE抑制肽的关键参数进行了优化,结果为酶底比(E/S)为5%、时间7.5 h、p H7.7、温度59℃,测得其水解度为20.41%±0.12%,ACEIPs的IC_(50)值为1.897±0.072 mg/m L。经Sephadex G-15分离纯化后,得到五个组分,其中第三个组分(PH-I3)、第4个组分(PH-I4)和第5个组分(PH-I5)的活性最好,IC_(50)分别为0.896、0.982、0.814 mg/m L;并对这五个组分进行了抗氧化实验,各组分均能显著的清除DPPH自由基、羟基自由基,具备与Fe2+的螯合能力。所以,由PH-I制备的ACE抑制肽同时具有降血压和抗氧化的功能,在功能性食品开发中具有重要的意义。

大海马ACE抑制肽的制备及其理化性质分析

以分子质量>20 ku的海马蛋白组分(PH-I)为原料,用木瓜蛋白酶酶解,制备具有降血压活性的ACE抑制肽(PH-Ie),分析比较PH-Ie和纯化后PH-I3的物理性质和体外各因素对其活性的影响。在p H 2.0~10.0时,PH-Ie和PH-I3的氮溶解指数都大于90%;PH-Ie和PH-I3的乳化能力小于PH-I,而PH-I的乳化稳定性强于PH-Ie和PH-I3;PH-I的起泡性和起泡稳定性都强于PH-Ie和PH-I3;PH-Ie和PH-I3的抗氧化能力优于PHI。在温度≤100℃时,PH-I3的ACE活性保持率没有发生变化,PH-Ie的ACE活性在85℃以上时略有升高;PH-I3在中性和碱性的条件下具有良好的稳定性,而PH-Ie在中性条件下具有良好稳定性。葡萄糖对PH-Ie和PH-I3的ACE活性的影响大于蔗糖,且褐变程度随着葡萄糖含量的升高而增大,Na Cl对PH-I3活性影响不明显,对PH-Ie活性影响显著。Al3+和Mg2+对PH-Ie的活性具有促进作用,K+和Zn2+具有明显抑制作用;Zn2+能够显著抑制PH-I3的活性。模拟胃肠消化道的消化过程可知,PH-I3属于真抑制型肽,PH-Ie属于前提型肽。