小干扰RNA对前列腺癌表皮生长因子受体及其胞内效应蛋白表达的影响

目的应用RNA小干扰（SiRNA）技术影响表皮生长因子受体（EGFR）及其胞内效应蛋白水平的表达，观察其对激素非依赖前列腺癌细胞在体外以及在实验裸鼠模型体内的生长情况的影响。方法筛选出最有效的EGFRSiRNA，采用慢病毒为载体，转染激素非依赖前列腺癌细胞（HIPC）PC．3，MTT法检测细胞生长抑制情况，荧光实时定量PCR和Western印迹法检测细胞EGFR及其胞内效应蛋白Akt和MAPK的表达水平和磷酸化程度。同时，建市HIPC裸鼠模型，瘤体内注射EGFRSiRNA，观察肿瘤生长情况。结果慢病毒为载体的EGFRSiRNA对PC-3细胞转染率可稳定在75％，并显著抑制PC-3细胞牛长率，仅为40％～50％，其作用可能为沉默细胞EGFRmRNA及其蛋白的表达，抑制效率〉90％（P〈0．01）；而且，Akt和MAPK表达水平和磷酸化均明显降低，表达抑制率分别为76．49％和47．15％，P〈0．05。，与对照组比较，EGFRSiRNA体内抑瘤率为34．83％，P〈0．05。结论慢病毒介导的靶向EGFRSiRNAu，以在体内外显著抑制HIPC生长，其机制可能是沉默EGFR表达，进而抑制胞内效应蛋白的作用，后者叮作为未来靶向治疗的目标。

供者TIMP-2和IGFBP7对移植术后受者肾功能延迟的预测价值

目的探讨供者血清和移植肾灌洗液中金属蛋白酶组织抑制物-2(TIMP-2)和胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP7)水平对心脏死亡供者供肾移植术后移植物功能延迟(DGF)的发生是否有预测价值。方法收集宁波市医疗中心李惠利医院2018年1月至2020年10月心脏死亡的肾移植供者33例以及对应的受者33例,留取供者术前血清和移植肾灌洗液标本,测定TIMP-2和IGFBP7的水平。根据肾移植术后是否发生DGF分为DGF组7例和非DGF组26例,将测定的指标进行分析。正态分布计量资料组间比较采用独立样本t检验,正态分布计数资料组间比较采用χ^(2)检验,非正态分布计量资料组间比较采用Mann-Whitney检验(秩和检验),应用受试者工作特征(ROC)曲线及曲线下面积(AUC)评价指标的诊断效能。结果DGF组的灌洗液TIMP-2、灌洗液TIMP-2与IGFBP7的乘积(TIMP-2×IGFBP7)、血清IGFBP7、血清TIMP-2与IGFBP7的乘积(TIMP-2×IGFBP7)均高于非DGF组(P值均<0.05)。灌洗液TIMP-2、灌洗液TIMP-2×IGFBP7、血清IGFBP7、血清TIMP-2×IGFBP7诊断DGF的AUC分别为0.753(95%CI 0.546~0.959)、0.747(95%CI 0.510~0.984)、0.824(95%CI 0.615~1.000)、0.852(95%CI 0.660~1.000)。结论供者血清IGFBP7、供者血清TIMP-2×IGFBP7、灌洗液TIMP-2、灌洗液TIMP-2×IGFBP7可用于预测肾移植术后早期DGF的发生,其中血清TIMP-2×IGFBP7的诊断效能较高,是肾移植术后DGF的良好预测指标。

TIMP-2和IGFBP7对DCD肾移植术后肾功能延迟恢复的预测价值

目的:探讨心脏死亡器官捐献(DCD)肾移植术后患者血清金属蛋白酶组织抑制物-2(TIMP-2)和胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP7)对术后肾功能延迟恢复(DGF)的预测价值。方法:采用前瞻性研究设计,选取2018年1月至2020年10月宁波大学附属李惠利医院收治的DCD肾移植患者。纳入标准:①数据资料完整;②术后早期未发生影响移植肾功能的严重并发症。排除标准:①数据资料不完整;②患者不能或不愿配合研究;③术后早期发生影响移植肾功能的严重并发症。用ELASE法定量检测患者肾移植术后6、12、24、48、72 h以及术后7 d的血清TIMP-2和IGFBP7水平,监测同期及术后21 d血肌酐值。根据DGF的发生情况,分析不同时间点TIMP-2和IGFBP7测量值以及二者乘积(TIMP-2×IGFBP7)对肾移植术后发生DGF的预测能力。采用受试者工作特征(ROC)曲线和曲线下面积(AUC)评价TIMP-2和IGFBP7对DGF的诊断效能。结果:共纳入33例患者,DGF组7例(21.2%),非DGF组26例(78.8%),两组的性别(男/女:3/4例与10/16例)、年龄[48(34~56)岁与45(23~61)岁]、供体肾小球滤过率[98.5(15.8~132.5)ml/(min·1.73m 2)与79.1(60.6~102.5)ml/(min·1.73m 2)]、术前肌酐[1114.0(731.4~1293.0)μmol/L与858.4(657.6~1051.9)μmol/L]、术前尿素氮[15.0(13.2~19.6)mmol/L与17.3(13.6~20.9)mmol/L]、术前白蛋白[43.5(38.5~45.3)mmol/L与41.2(37.5~46.1)mmol/L]、透析方式(血透/腹透:3/4例与9/17例)、术中热缺血时间[6(5~7)min与5(4~6)min]差异均无统计学意义(P>0.05)。DGF组血清IGFBP7、TIMP-2×IGFBP7值在各个时间点均高于非DGF组(F=15.753,P=0.040;F=13.000,P=0.024),而两组间血清TIMP-2差异无统计学意义(F=1.157,P=0.075)。对DGF的诊断价值,血清IGFBP7在术后48 h的AUC为0.863(95%CI 0.696~1.000,P=0.004),以5.97 ng/ml为界值时,敏感性为85.7%,特异性为80.8%;TIMP-2×IGFBP7在术后48 h的AUC为0.819(95%CI 0.641~0.996,P=0.011),以62.06(ng/ml)2为界值时,敏感性为71.4%,特异性为80.8%;两者的AUC比较差异无统计学意义(P>0.05)。DGF组术后7 d血清IGFBP7与肌酐动态变化曲线存在差异,且术后7 d血清IGFBP7与术后21 d肌酐值成正相关(r=0.808,P<0.05)。结论:血清IGFBP7和TIMP-2×IGFBP7能够较准确、敏感地早期预测DCD供肾术后DGF的发生,预测价值随时间变化,以术后48 h和术后7 d最有价值。血清TIMP-2无预测价值。