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分子伴侣Rer1参与人胚胎肾上皮细胞系HEK293T中hERG钾通道蛋白转运
被引量:
1
1
作者
陈邦盛
余小玲
+2 位作者
毛飞燕
廉姜芳
俞徐云
《基础医学与临床》
2021年第10期1403-1409,共7页
目的探讨分子伴侣Rer1在hERG钾通道蛋白转运中的作用机制,并进行可能恢复hERG转运异常的药物Baf A1研究。方法将A561V突变体及野生型hERG载体瞬时转染人胚胎肾上皮细胞系(HEK293T),建立野生、突变及混合转染细胞模型;运用免疫荧光、蛋...
目的探讨分子伴侣Rer1在hERG钾通道蛋白转运中的作用机制,并进行可能恢复hERG转运异常的药物Baf A1研究。方法将A561V突变体及野生型hERG载体瞬时转染人胚胎肾上皮细胞系(HEK293T),建立野生、突变及混合转染细胞模型;运用免疫荧光、蛋白免疫印迹检测hERG及Rer1的表达;采用小干扰RNA技术敲低Rer1表达后检测hERG蛋白的表达;V-ATP酶抑制剂Bafilomycin A1(Baf A1)以1 mmol/L孵育各组细胞6 h后Western blot检测hERG蛋白表达;用膜片钳对有潜在功能的混转细胞给予Baf A1孵育后测定膜电流。结果与野生组相比,A561V突变可致hERG蛋白转运缺陷并表现不同条带水平,突变组hERG蛋白的膜表达明显减少(P<0.01);Rer1在突变、混转组中表达明显下降(P<0.01),进一步敲低Rer1后可促进部分相对成熟hERG蛋白的顺向转运;此外,与对照组相比,Baf A1孵育可使野生、突变组中成熟hERG蛋白明显增加(P<0.05),混转组中未成熟hERG蛋白则显著上调(P<0.05);而在混转细胞中,Baf A1孵育可使尾电流相对密度明显增强(P<0.05)。结论Rer1参与hERG钾通道蛋白的转运,并能抑制部分异常hERG蛋白在细胞中的顺向转运,Baf A1能明显增强混转细胞的尾电流密度。
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关键词
分子伴侣
Rer1
HERG
LQTS
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题名
分子伴侣Rer1参与人胚胎肾上皮细胞系HEK293T中hERG钾通道蛋白转运
被引量:
1
1
作者
陈邦盛
余小玲
毛飞燕
廉姜芳
俞徐云
机构
宁波市
鄞州第二
医院
急救医学
中心
中国科学院大学
宁波
华美
医院
(
宁波市
第二
医院
)普外科
宁波市医疗中心李惠利医院兴宁院区心血管内科
出处
《基础医学与临床》
2021年第10期1403-1409,共7页
基金
国家自然科学基金(81870255)
浙江省自然科学基金(LY21H020001)
+1 种基金
宁波市自然科学基金(2018A610398)
宁波市鄞州区科技局项目([2017]110号)。
文摘
目的探讨分子伴侣Rer1在hERG钾通道蛋白转运中的作用机制,并进行可能恢复hERG转运异常的药物Baf A1研究。方法将A561V突变体及野生型hERG载体瞬时转染人胚胎肾上皮细胞系(HEK293T),建立野生、突变及混合转染细胞模型;运用免疫荧光、蛋白免疫印迹检测hERG及Rer1的表达;采用小干扰RNA技术敲低Rer1表达后检测hERG蛋白的表达;V-ATP酶抑制剂Bafilomycin A1(Baf A1)以1 mmol/L孵育各组细胞6 h后Western blot检测hERG蛋白表达;用膜片钳对有潜在功能的混转细胞给予Baf A1孵育后测定膜电流。结果与野生组相比,A561V突变可致hERG蛋白转运缺陷并表现不同条带水平,突变组hERG蛋白的膜表达明显减少(P<0.01);Rer1在突变、混转组中表达明显下降(P<0.01),进一步敲低Rer1后可促进部分相对成熟hERG蛋白的顺向转运;此外,与对照组相比,Baf A1孵育可使野生、突变组中成熟hERG蛋白明显增加(P<0.05),混转组中未成熟hERG蛋白则显著上调(P<0.05);而在混转细胞中,Baf A1孵育可使尾电流相对密度明显增强(P<0.05)。结论Rer1参与hERG钾通道蛋白的转运,并能抑制部分异常hERG蛋白在细胞中的顺向转运,Baf A1能明显增强混转细胞的尾电流密度。
关键词
分子伴侣
Rer1
HERG
LQTS
Keywords
chaperone
Rer1
hERG
LQTS
分类号
R54 [医药卫生—心血管疾病]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
分子伴侣Rer1参与人胚胎肾上皮细胞系HEK293T中hERG钾通道蛋白转运
陈邦盛
余小玲
毛飞燕
廉姜芳
俞徐云
《基础医学与临床》
2021
1
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