药物成瘾的表观遗传学机制研究进展

药物成瘾是一种慢性、复发性脑疾病,其特点主要表现为以不计后果的强迫性用药和对药物的持续渴求。药物滥用会导致神经结构和功能可塑性的改变,造成分子、细胞和整体水平的适应性改变,从而引起个体终身行为异常。目前研究发现,表观遗传学改变导致的持续性基因表达改变是药物成瘾的重要机制。研究表明,重复暴露于滥用性药物在大脑的奖赏区域会发生表观遗传学改变,主要有以下3种调控方式:组蛋白修饰(例如乙酰化和甲基化)、DNA甲基化和非编码RNA调控。药物成瘾的表观遗传学的研究将为药物成瘾的遗传学和非遗传学的分子调控机制的理解提供新视角,并为临床药物成瘾的表观遗传学治疗研究提供新方向和新思路。本文将对近年来药物成瘾的表观遗传学研究进展作系统的综述。

M5毒蕈碱乙酰胆碱受体参与药物成瘾的研究进展

M5受体是毒蕈碱乙酰胆碱受体家族的一个新成员，是毒蕈碱乙酰胆碱受体家族（M1-M5亚型）最后一个被克隆出来的，属于G蛋白偶联受体。免疫沉淀和m RNA原位杂交实验表明M5受体在中枢神经系统中特定区域表达，包括海马、丘脑、黑质和中脑腹侧背盖区（VTA）部位）^[1，2，3]。可是和其他M受体比较，M5受体表达水平较低，

海马M_2受体调节杏仁核内谷氨酸的释放与学习记忆的研究

目的研究海马内M1和M2受体对学习记忆功能的影响及其可能机制。方法SD大鼠分为3组,分别海马内注射等体积的M1-ASODN(M1-AS组)、M2-ASODN(M2-AS组)和生理盐水(对照组),以被动逃避反应的步入潜伏期作为衡量学习记忆功能的指标,以CZE-LIFD法检测杏仁核内游离谷氨酸的浓度。结果M1-ASODN缩短步入潜伏期,为对照组的25%(P<0.01),M2-ASODN使步入潜伏期较对照组增加了75%(P<0.05)。双侧海马内注射ASODN后与对照组相比,M2-AS组杏仁核内谷氨酸的含量增加164%(P<0.01),而M1-AS组无变化(P>0.05)。结论海马内M受体参与恐惧性记忆的调节,M2受体抑制学习记忆,M1受体促进学习记忆。海马内M2受体可能通过调节杏仁核内谷氨酸含量的变化介导被动逃避反应的记忆过程。

侧脑室注射东莨菪碱对吗啡依赖大鼠戒断反应的抑制作用(英文)

目的 观察非选择性毒蕈碱 (M )受体拮抗剂东莨菪碱、选择性M1受体拮抗剂哌拉唑嗪以及选择性M2受体拮抗剂美索四氨对吗啡戒断反应的影响。方法采用吗啡依赖大鼠模型侧脑室注射上述药物 ,并用腹腔注射纳洛酮诱发戒断反应 ,记录 6 0min内戒断症状。结果 侧脑室注射东莨菪碱 (2 5 ,5 0 μg)、哌拉唑嗪 (2 0 μg)和美索四氨 (2 5 μg)可明显抑制由纳洛酮诱发戒断反应 ,东莨菪碱减轻吗啡戒断症状呈明显量效关系。结论 侧脑室注射东莨菪碱能减轻吗啡戒断反应 ,提示中枢胆碱能神经毒蕈碱 (M )受体在吗啡依赖和耐受过程中起重要作用。

国际上常见受控麻醉药品和精神药品分析检测

本项目采用放射免疫法、高效液相色谱法、高效毛细管电泳法及气相--质谱联用法建立了国际上常见受控麻醉药品和精神药品的分析检测方法,对国内常见的滥用物质海洛因、甲基苯丙胺等进行了重点研究.现可对阿片类、可卡因类、大麻类、苯丙胺类、巴比妥类、安定类等国际上常见受控麻醉药品和精神药品进行准确定性和定量分析检测.根据宁波市医学文献检索中心的相关查新咨询报告,认为:在一个实验室完整地建立一系列检测国际上常见受控麻醉药品和精神药品的方法,特别是高效毛细管电泳法检测尿液中吗啡、苯丙胺含量方法,用于海洛因、苯丙胺依赖的诊断、脱毒疗效评价及气相--质谱联用法检测收缴的滥用物质在国内处于先进水平.

NMDA型谷氨酸受体NR3亚基与药物依赖相关研究进展

NMDA受体是一类门控离子通道型谷氨酸受体,参与调节中枢神经系统的多种重要功能：如神经元生长发育、神经可塑性及学习记忆等。NMDA受体是异多聚体,由核心亚基NR1结合强化亚基NR2及（或）调节亚基NR3组成。NR1亚基形成离子通道。

γ-氨基丁酸能系统在药物成瘾中的作用研究进展

药物成瘾是一种慢性和复发性的脑部疾病。长期药物滥用影响脑部诸多神经系统,尤其是与奖赏、动机、学习记忆和自控等行为有关的神经环路,导致强烈、不可控的药物渴求和与之相关的强迫性觅药行为。γ-氨基丁酸(γ-amino-butylic acid,GABA)能系统是脑内主要中枢神经系统,参与生物体多种生理功能,其功能失调可能与精神分裂症、抑郁症、癫痫、痴呆及其他记忆障碍等神经精神疾病有关。目前越来越多的研究表明,GABA能系统在药物成瘾和复吸过程中有重要作用,其不仅可以调节多巴胺系统还可以调节谷氨酸能系统功能。本文中较系统地阐述了GABA能系统在药物成瘾过程中的作用研究进展,为临床药物成瘾和复吸的治疗提供重要的理论依据和新思路。

M受体对吗啡戒断大鼠脊髓和脑干NMDA受体基因表达及中脑导水管周围灰质中谷氨酸释放的调节

应用鞘内注射反义寡脱氧核苷酸技术和RT-PCR反应,观察毒蕈碱型乙酰胆碱受体(muscarinic acetylcholine receptor,M)对吗啡依赖大鼠脊髓和脑干NMDA受体NR1A和NR2A mRNA表达和中脑导水管周围灰质区(periaqueductal grey,PAG)中谷氨酸释放的影响。结果显示,吗啡依赖大鼠脊髓NR1A和NR2AmRNA表达明显升高,而脑干中NR1A和NR2AmRNA表达没有显著变化;注射纳洛酮后1 h,吗啡戒断大鼠脊髓和脑干中NR1A和NR2A表达显著高于依赖组,经NMDA受体拈抗剂MK801(0.125 mg/kg,i.p.)、M受体拮抗剂东莨菪碱(0.5 mg/kg,i.p.)、M.受体拮抗剂呱伦西平(10 mg/kg,i.p.)和NOS抑制剂L-NAME(10 mg/kg,i.p.)处理后,脊髓和脑干中NR1A和NR2A基因表达都较戒断组明显减少。在纳洛酮激发前24 h鞘内注射NR1A和M2受体的反义寡脱氧核苷酸(4 μg/只),戒断症状评分值及脊髓和脑干的NR1AmRNA的表达均较对照组明显减少。吗啡依赖大鼠在纳洛酮注射前24 h鞘内注射M2受体反义寡脱氧核苷酸(4μg/只),可以明显减少PAG内透析液中谷氨酸含量。上述结果提示:NMDA受体的基因表达和谷氨酸释放参与吗啡成断过程,而这种表达受到M受体的调节。

吗啡依赖及戒断大鼠脊髓和脑干中一氧化氮合酶基因的表达

目的 观察吗啡依赖或吗啡戒断大鼠脊髓和脑干中一氧化氮合酶 (NOS)基因表达的变化。方法 以 β actin为内参照 ,用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)测定NOSmRNA的表达水平。结果 吗啡依赖大鼠脊髓和脑干NOS表达水平较正常对照大鼠降低 ,纳洛酮 ( 4mg·kg-1,ip)激发大鼠吗啡戒断症状 1h后脊髓和脑干中NOS表达水平明显升高 ,戒断 2h和 4h后NOS基因表达较 1h组减少。NOS抑制剂L N 硝基精氨酸甲酯 (L NAME ,10mg·kg-1)处理后大鼠吗啡戒断症状减少 ,同时脊髓和脑干的NOS基因表达水平较戒断 1h组明显降低。甲基东莨菪碱 ( 0 5mg·kg-1)处理组脊髓和脑干中NOS表达水平较戒断 1h组明显降低 ;选择性毒蕈碱受体M1拮抗剂 pirenzepine( 10mg·kg-1)处理组动物脊髓中NOS表达水平较戒断 1h组降低 ,而脑干中NOS表达水平没有改变 ;NMDA受体拮抗剂MK 80 1( 0 12 5mg·kg-1)处理后脊髓和脑干中NOS表达水平较戒断 1h组没有差异。结论 吗啡慢性处理后脊髓和脑干中NOSmR NA水平降低 。

加味四君子汤联合美沙酮治疗海洛因成瘾临床观察

目的观察加味四君子汤联合美沙酮对海洛因依赖脱毒治疗临床疗效。方法将60例海洛因成瘾患者随机分为联合组(30例)和对照组(30例),联合组在美沙酮脱毒治疗基础上加用加味四君子汤,对照组用美沙酮配合给予安慰剂脱毒治疗。使用汉密顿焦虑量表评价每组治疗前后的戒断症状指标。结果联合组戒断症状指标[(3.16±2.12)分]较治疗前有明显的改善,且与对照组[(4.64±2.91)分]比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论在标准美沙酮脱毒治疗基础上加用加味四君子汤可改善海洛因依赖者戒断症状,提高临床脱毒效果。

海洛因依赖者在第9、10和11号染色体上的易感基因位点的分析

目的··:筛查海洛因依赖者在第9、10和11号染色体上的易感基因的位点。方法·· :对10例海洛因依赖者和其正常同胞对照者的第9、10和11号染色体进行以短串联重复序列(STR)为遗传标记的基因扫描分析。结果·· :D9S286 ,D9S167 ,D9S164和D10S208 ,D10S196 ,D10S185 ,D10S1693位点的等位基因在海洛因依赖组和其正常同胞对照组之间分布有显著性差异 (P<0.05),其它STR位点的等位基因在海洛因依赖组和其正常同胞对照组之间分布没有显著性差异 (P>0.05)。结论··:9号染色体上D9S286,D9S167 ,D9S164位点和10号染色体上D10S208 ,D10S196 ,D10S185 ,D10S1693位点附近可能存在海洛因依赖的易感基因。

补肾方对吗啡依赖大鼠胶质细胞源性神经营养因子表达的影响

目的：观察补肾方六味地黄汤和金匮肾气汤对大鼠吗啡戒断症状的影响，以及对胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)的调节。方法：逐日递增吗啡剂量建立大鼠吗啡依赖模型。戒断症状评分根据纳洛酮注射后1h内的各项症状的分值。RT-PCR方法检测GDNF及其受体的mRNA表达。

中脑腹侧被盖区注射M_5受体反义寡核苷酸抑制海洛因敏化大鼠伏隔核和海马中FosB表达

目的探讨M5毒蕈碱受体亚型对海洛因诱导的大鼠行为敏化以及敏化后大脑伏隔核(NAc)和海马中FosB蛋白表达的影响。方法建立海洛因诱导的大鼠行为敏化模型,测定大鼠的自主活动量(locomotor activity,LA),观察M5毒蕈碱受体反义寡核苷酸(M5AS-ONs)对行为敏化表达的影响。用免疫组化法测定大鼠 NAc及海马齿状回(DG)FosB蛋白表达。结果海洛因处理组与盐水处理组相比,大鼠在1小时内的LA显著增加,表明这些大鼠已稳定建立了海洛因诱导的敏化。中脑腹侧被盖区(VTA)中注射M5AS-ONs能抑制大鼠海洛因行为敏化的表达。海洛因诱导的行为敏化大鼠中NAc及DG中的FosB免疫反应阳性神经元的表达增加,而在VTA内注射M5AS-ONs能明显抑制NAc及DG中FosB阳性神经元表达的增加;但VTA中注射有义寡核苷酸(M5S-ONs)不能明显抑制大鼠行为敏化的表达,也不能抑制海洛因敏化大鼠NAc和DG中FosB蛋白的表达。结论阻断VTA中M5毒蕈碱受体可抑制海洛因诱导的行为敏化的表达,其机制可能和抑制大脑NAc和DG神经元中FosB蛋白的激活有关。M5毒蕈碱受体可作为改变海洛因行为学效应的有效药理学靶点之一。

鞘内注射m受体和GDNF反义寡核苷酸对吗啡戒断大鼠蓝斑c-FOS表达的影响

目的：观察鞘内注射毒蕈碱型乙酰胆碱(m)受体和胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)反义寡核苷酸对吗啡戒断大鼠蓝斑区内(LC)c-FOS阳性神经元表达的影响。方法：建立大鼠吗啡依赖模型，应用反义寡核苷酸技术和免疫组化方法观察c-FOS阳性神经元的表达。