小麦线条花叶病毒研究进展

小麦线条花叶病毒是一种重要的检疫性有害生物,能危害许多单子叶粮食作物,造成巨大的经济损失。该病毒在世界范围内分布广泛,欧洲、北美洲、大洋洲等多国均有报道发生;而在中国,2000年后鲜有相关报道。近几年,伴随麦类、玉米等粮食的大量进口,小麦线条花叶病毒随之传入的风险剧增。本文从生物学特性、发病特点、检测技术及CP蛋白功能研究进展等方面对小麦线条花叶病毒进行了系统性的概述,旨在为相关部门的检疫与监管提供科学依据。

阿维菌素在模拟水产养殖生态系统中的蓄积与消除规律

采用UPLC-MS/MS法,研究了阿维菌素泼洒用药后,该药物在水体、底泥、伊乐藻(Elodea nuttallii)和水产动物体内的蓄积与消除规律。结果显示,以6μg/L浓度单次泼洒用药后,水体中阿维菌素消解较快,其半衰期为63.8h。阿维菌素在养殖水环境中消减的同时,逐渐由水体向底泥、伊乐藻和水产动物迁移。底泥中阿维菌素峰浓度、曲线下面积和半衰期分别为1.25μg/kg、469.2μg/(kg·h)和115.5 h,说明伊乐藻中的相应值分别为8.75μg/kg、2521.7μg/(kg·h)和315.0h,说明伊乐藻对阿维菌素有明显的吸收和富集作用。该模拟系统中的异育银鲫(Carassius auratus gibelio)对阿维菌素具有明显的吸收,其血液、肾、鳃、肝和肌肉组织阿维菌素的最高浓度(C_(max))依次为50.9、45.37、21.25、15.47和11.9μg/kg;而该模拟系统中的中华绒鳌蟹(Eriocheir sinensis)仅鳃组织检出阿维菌素,其C_(max)在12h为8.08μg/kg,血淋巴、肌肉和肝胰腺等组织均未检出阿维菌素。生物富集系数F_(BC)值显示,对阿维菌素的富集浓度由高到低依次为鲫鱼、伊乐藻、中华绒鳌蟹、底泥,显示阿维菌素在不同分配相和不同生物组织的富集作用差异较大。

人工诱导花鳗鲡成熟过程中卵巢内6种性类固醇激素的含量及变化

为分析成年花鳗鲡经多次注射鲤鱼脑垂体（carp pituitary extract,CPE,每周12 mg/kg）和人绒毛膜促性腺激素（h CG,每周300 IU/kg）后,卵巢发育成熟过程中6种性类固醇激素的含量及变化,实验采用超高效液相色谱—串联质谱（UPLC/MS/MS）联用方法对花鳗鲡性腺内这6种类固醇激素进行研究。结果发现,睾酮（testosterone,T）、孕酮（progesterone,P）、雌二醇（estradiol-17β,E2）、雌三醇（estriol,E3）、17α,20β-二羟基-4-孕烯-3-酮（17α,20β-dihydroxy-4-pregnen-3-one,DHP）、17α-羟基孕酮（17α-hydroxyprogesterone,17α-OHP）在x Bridge C18色谱柱上得到良好分离,在0～200 ng/m L的范围内线性相关系数均大于0.99,检测限为0.1～0.5 ng/g,回收率为89.00%～94.83%,相对标准差均小于20%;注射外源激素后,6种性类固醇激素在花鳗鲡卵巢中的含量及变化情况如下：第2次注射后,T、P、E2、E3、DHP、17α-OHP的含量分别为（0.27±0.05）、（0.64±0.05）、0、（1.17±0.19）、0、0 ng/g;第9次注射后,T、P、E2、E3、DHP、17α-OHP的含量分别为（0.73±0.13）、（1.28±0.38）、（1.27±0.27）、（0.83±0.14）、（1.50±0.59）、（0.43±0.25）ng/g;第16次注射后,T、P、E2、E3、DHP、17α-OHP的含量分别为（1.17±0.14）、（2.23±0.51）、（5.59±0.96）、（2.46±0.70）、（2.29±0.65）、（4.56±0.74）ng/g。对照组中均未检测到雌二醇和雌三醇。研究表明,雌二醇和雌三醇是花鳗鲡性腺发育的关键因素;随着性腺发育,花鳗鲡卵巢中6种性类固醇激素的含量整体呈逐步增加的趋势。另一方面,UPLC/MS/MS法能同时定量测定这6种性类固醇激素,具有灵敏、高回收率、稳定的优势。

药浴暴露下阿维菌素在异育银鲫体内蓄积和消除规律

采用UPLC-MS/MS法研究了2μg·L-1三次连续水体药浴和6μg·L-1一次性水体药浴条件下阿维菌素在水体中消除、在异育银鲫(Carassius auratus gibelio)体内蓄积和消除变化规律。结果显示,两种药浴暴露方式下阿维菌素在水体中消除呈一级指数衰退消除,消除半衰期(t1/2)均为63 h,240 h时浓度下降到0.5μg·L-1以下。阿维菌素在异育银鲫血浆和肌肉中的含量均呈先升高后下降的趋势,血浆中药物浓度远高于肌肉中的含量。2μg·L-1连续三次药浴组和6μg·L-1一次药浴组血药峰浓度(Cmax)分别为34.97、66.62μg·L-1,其曲线下面积(AUC0-t)分别为9 871.2μg·L-1·h和18 119.6μg·L-1·h;两组药浴肌肉中达峰浓度分别4.42μg·kg-1和15.80μg·kg-1,其AUC0-t分别为641.9μg·kg-1·h和4 271.0μg·kg-1·h。与2μg·L-1连续三次药浴组相比,6μg·L-1一次药浴组阿维菌素在血浆和肌肉中的蓄积作用更加显著。以10μg·kg-1作为阿维菌素在异育银鲫肌肉中最大残留限量,选择95%的置信区间计算异育银鲫肌肉组织中休药期,本研究中2μg·L-1连续三次药浴组肌肉的休药期为295.4 h,6μg·L-1一次药浴组肌肉的休药期为454.5 h。

转基因番木瓜GM YK品系的LAMP检测

应用环介导等温扩增技术建立一种快速灵敏的转基因番木瓜GM YK品系检测方法。针对转基因番木瓜GM YK品系外源基因与内源基因结合处序列设计1组特异性引物,利用SYBR Green荧光PCR仪实时监测扩增过程,对反应体系进行优化。用优化后的反应体系检测LAMP方法的灵敏性、特异性,并对市售番木瓜进行检测。LAMP检测方法反应速度快,在60 min内即可完成扩增,检测结果易于观察,通过肉眼观察染色情况即可分辨,该方法灵敏度高,检测限可达到5.78 pg,并且具有良好的特异性。LAMP检测方法可快速、灵敏、特异的检测转基因番木瓜GM YK品系,并适用于基层和现场检测。

智能蚊媒传染病应急管理系统开发与应用

目的旨在加强宁波口岸新发或再发蚊媒传染病及其媒介生物监测与预防控制工作,为国际卫生港的创建奠定坚实的基础。方法利用SQLite Expert Professional 2.3等工具开发出智能EMS-MDV应急管理系统。结果通过本系统实时浏览宁波口岸2006年-2012年蚊媒传染病登革热、疟疾、流行性乙型脑炎历史资料,充分掌握当地蚊种组成、空间动态分布、带毒率概况、典型分类识别等信息。结论通过EMS-MDV管理系统及时探究当地蚊媒传染病暴发流行与媒介生物致病机制以及内在沟联,从而增强该地区新发或再发蚊媒传染病预警预测能力,开创宁波口岸蚊媒传染病及其传播媒介应急防控新局面。

人工诱导日本鳗鲡成熟过程中血清及性腺内类固醇激素含量的变化

为分析日本鳗鲡(Anguilla japonica)经过多次注射鲤鱼脑垂体和人绒毛膜促性腺激素后,血清及性腺组织中性类固醇激素的含量及变化,采用超高效液相色谱-串联质谱联用(UPLC-MS/MS)对血清内6种类固醇激素[睾酮(Testosterone,T)、17α-羟基孕酮(17α-hydroxyprogesterone,17α-OHP)、17α,20β-二羟基-4-孕烯-3-酮(17α,20β-dihydroxy-4-pregnen-3-one,DHP)、雌酮(estrone,E_1)、雌二醇(estradiol-17β,E_2)、雌三醇(estriol,E_3)]以及性腺中4种类固醇激素(T、DHP、E_2、E_3)进行研究。结果表明,血清及性腺组织样品平均回收率分别为86.9%~98%、75.6%~88.1%;方法检出限(S/N>10)分别为0.1 ng/g、0.1 ng/m L。对样品进行测定,结果表明,随着日本鳗鲡性腺发育,实验组日本鳗鲡血清及性腺中类固醇激素的含量呈逐步增加的趋势,其中,实验组日本鳗鲡血清中除E_3(难产时含量最高)外,其他5种类固醇激素均在产卵时含量最高;实验组日本鳗鲡性腺内E_2及DHP在难产时含量最高。对照组日本鳗鲡血清内E_1、E_3以及性腺内E_2、E_3在整个实验周期均未检测到。应用本方法对日本鳗鲡血清及性腺内类固醇激素进行定量分析,具有灵敏、高回收率、准确、稳定等特点,研究结果不仅对日本鳗鲡性腺发育过程中性类固醇激素的研究有了初步的认识,更对其他硬骨鱼类性腺发育过程中体内激素变化的研究具有重要参考意义。