硼替佐米对急性单核细胞白血病细胞株SHI-1诱导凋亡作用及其对Bcl2l12、Bcl-2和Bax基因表达影响

本研究探讨蛋白酶抑制剂硼替佐米对急性单核细胞白血病细胞株SHI-1增殖和凋亡的影响及Bcl2l12、Bcl-2和Bax基因在其中的作用。用MTT比色法观察硼替佐米对SHI-1细胞的生长抑制作用,用Annexin-V标记、线粒体跨膜电位(Δψm)和DNA凝胶电泳分析细胞凋亡,用RT-PCR方法检测0、6,12和24小时Bcl2l12、Bcl-2和Bax基因表达。结果表明,硼替佐米呈时间和剂量依赖性抑制SHI-1细胞生长,24小时和48小时半数抑制浓度分别为54.13 nmol/L和5.45 nmol/L;硼替佐米能够诱导SHI-1细胞凋亡,在6小时Annexin-V阳性细胞就开始增高并呈时间依赖性,Δψm减低,形态学可见明显细胞核凝聚、固缩和碎裂,DNA凝胶电泳显示DNA片段化;RT-PCR显示,Bcl2l12表达增高,Bcl-2表达减低,但Bax表达无明显改变。结论:硼替佐米抑制SHI-1细胞增殖,并可能通过上调Bcl2l12基因和下调Bcl-2基因,使线粒体膜电位下降而促使SHI-1细胞发生凋亡。

成人循环内皮祖细胞的性别差异和雌二醇的体外动员作用

目的:探讨成人循环内皮祖细胞(EPCs)数量及功能的性别差异、女性月经周期对其的影响和雌二醇的体外动员作用。方法:选择月经周期正常的健康女性和年龄匹配的同等条件男性各10名,男性1次采血,女性在月经周期内3个性激素变化阶段(卵泡初期、排卵前期和黄体中期)分别采血。用流式细胞仪计数循环CD34^+/CD133^+/含有激酶插入结构域的受体(KDR)^+的EPCs数量,放射免疫法测定雌二醇水平;经体外培养7 d,计数EPCs,并观察其黏附能力;分别通过跨膜迁移实验和增殖实验观察不同浓度雌二醇的影响。结果:女性组循环EPCs数量明显高于男性组(P<0.01),月经周期内排卵前期和黄体中期明显高于卵泡初期(P<0.05)。经体外培养测定EPCs功能,男性与女性无明显差异。较高浓度的雌二醇(≥1×10^(-9)mol/L)能显著增强EPCs的跨膜迁移能力和增殖能力(P<0.05)。结论:成人循环EPCs数量存在性别差异并且受女性月经周期影响,雌二醇对EPCs的动员有重要作用。

慢性阻塞性肺疾病患者 Th17／Treg 细胞失衡与肺功能相关性研究

目的研究慢性阻塞性肺疾病（ COPD）患者Th17细胞和Treg细胞介导的免疫应答变化及免疫失衡与肺功能下降程度的可能内在联系。方法选择2009年1月-2012年12月在本院门诊及住院治疗的COPD中重度、极重度患者和肺功能正常的吸烟者及不吸烟的正常对照者作为研究对象，分别测定肺功能，并采集外周血和诱导痰。采用流式细胞仪技术测定外周血中Th17细胞和Treg细胞比例，ELISA方法测定血清及诱导痰上清液相关细胞因子，荧光定量 PCR方法测定相应的转录因子ROR-γt 和Foxp3表达水平，并分析Th17/Treg细胞平衡与肺功能下降程度的相关性。结果与肺功能正常组和正常对照组相比，COPD患者外周血Th17细胞比例、相关细胞因子IL-1β、IL-6、IL-17 A、TGF-β及转录因子ROR-γt表达水平升高，且重度和极重度患者升高更加明显；而Treg细胞比例、细胞因子IL-10及转录因子Foxp3表达水平则明显降低。诱导痰上清液相关细胞因子变化趋势与外周血Th17和Treg细胞的变化趋势一致。 Th17/Treg细胞比值与FEV1、FVC和FEV1/FVC呈显著负相关。结论 Th17/Treg细胞平衡失调与COPD患者的肺功能下降密切相关，可能参与了COPD的疾病进展过程。

免疫磁珠与DNA倍体检测肿瘤患者外周血中癌细胞的初步临床应用

DNA异倍体是恶性肿瘤的重要标志之一，检测外周血中肿瘤DNA异倍体为无创性肿瘤诊断开辟了一条新途径。流式细胞术（FCM）-DNA倍体分析技术具有特异性强的优点，但该方法在外周血中检测的阳性率不高。本研究先用免疫磁珠（IMB）阴性分选富集癌细胞，后用FCM-DNA倍体检测外周血中癌细胞，现报告如下。