宁波市气传花粉和真菌与变应性鼻炎致敏原

目的调查宁波市气传花粉和真菌的种类、数量及季节消长规律,探讨其与变应性鼻炎的关系。方法2008年5月1日至2009年4月30日在宁波市城乡各选点1处标本采集点,通过曝片与暴皿法采集气传花粉、真菌,鉴定其种属与数量。根据花粉、真菌及其季节、气候分布飘散规律,行皮肤点刺试验或鼻黏膜激发试验共1 632例,探讨它们之间的关系。结果全年观察到花粉51属(科)22 624粒,气传花粉飘散高峰期集中在3～5月和8～10月。真菌62属(种),含曝片孢子40属(种)4 655粒,曝皿真菌菌落40属(种)191个,其中22属(种)为非交叉性。1 632例变应性鼻炎患者皮肤点刺试验阳性1 045例,阳性率64.03%,其中花粉和真菌皮试阳性率30.08%。结论根据花粉、真菌飘散规律制备地域性标准化变应原检测试剂及相应的脱敏制剂,或有针对性选择进行体内或体外试验查找致敏原,对于有效防控变应性鼻炎具有重要价值。

2016—2020年宁波市某医院血培养病原菌分布与耐药性研究

目的分析2016—2020年宁波市某医院血培养中的病原菌分布和耐药情况,为临床合理使用抗菌药物提供参考。方法采用WHONET5.6软件对2016—2020年血培养分离的主要病原菌及其耐药性进行统计分析。结果共检出细菌3400株,其中G^(–)杆菌1545株(45.4%),G^(+)球菌1510株(44.4%),真菌111株(3.3%)。G^(-)杆菌以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌和洋葱伯克霍尔德菌为主,分别占总株数的21.0%、9.6%、2.7%、2.2%、1.3%。肺炎克雷伯菌分离率呈上升趋势。G^(+)球菌中以凝固酶阴性葡萄球菌为主,共867株,占25.5%。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检出率为37.3%,未出现对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药的菌株。结论宁波市某医院血流感染病原菌中G^(-)杆菌和G^(+)球菌比例相当。临床医生应重视并规范早期血培养,严格控制抗生素的使用,减少耐药细菌的感染与播散。

宁波地区医院肠球菌的临床分布及耐药研究

目的了解医院肠球菌在临床分布状况及利奈唑胺等抗菌药物对肠球菌的抗菌活性,为临床治疗肠球菌感染合理选择抗菌药物提供指导。方法对本院各种标本分离获得的肠球菌用VITEK微生物自动鉴定仪进行种的鉴定和药物敏感性试验。用WHOVET5软件对统计结果进行分析。结果三年共检出706株肠球菌,其中粪肠球菌432株占肠球菌61.2%,屎肠球菌241株占34.1%,鹑鸡肠球菌33株占4.7%。粪肠球菌对呋喃妥因、青霉素、四环素、莫西沙星、左氧氟沙星的耐药率分别为5.8%、22.2%、71.0%、16.7%和23.8%,而屎肠球菌的耐药率除四环素外均高于粪肠球菌。本组试验发现3株耐万古霉素肠球菌,耐药率为0.43%,肠球菌对利奈唑胺的敏感率为100%。结论肠球菌属细菌在医院内感染逐年增加,耐药率在不断上升,泛耐株在不断增多,本组试验检出3株耐万古霉素肠球菌(VRE)。未发现耐利奈唑胺肠球菌,利奈唑胺是目前治疗泛耐株肠球菌特别是治疗耐万古霉素肠球菌感染的最佳选择,但必须合理使用,同时要密切监测肠球菌的耐药趋势,防止耐药菌株的产生。

检验结果参考变化值建立的探讨

参考变化值为两个检验结果合计的随机变异。可通过评价个体连续检验结果差值的统计学差异,实现患者检验结果的临床监测。检验工作者应在充分认识其理论的基础上正确建立参考变化值,并指导临床应用。

宁波地区肠杆菌科细菌碳青霉烯酶基因的检测研究

目的对宁波地区耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的耐药情况和碳青霉烯酶耐药基因进行研究了解。方法收集2010年1月至11月耐亚胺培南(IPM)、美罗培南(MEM)或厄他培南(ETP)的肠杆菌科菌株进行Hodge试验确认,对于阳性试验菌株PCR同时检测blaKPC、blaNDM-1、blaIMI-1、blaGES、blaSME、blaNmcA和blaSHV-387种基因。结果共收集到肠杆菌科细菌256株,其中耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌16株,占6.1%;采用改良Hodge试验确认阳性10株,占62.5%株。PCR检测显示10株均携带有blaKPC,其中肺炎克雷伯菌6株,产气肠杆菌2株,阴沟肠杆菌2株。结论宁波地区产blaKPC型碳青霉烯酶是肠杆菌科细菌耐碳青霉烯类药物的关键因素,其编码基因位于可转移质粒进行传播使得目前的耐药情况越来越严峻。

10种单味中药对鲍曼不动杆菌的抗菌作用和对主动外排机制抑制作用的研究

目的:研究10种单味中药对临床分离的鲍曼不动杆菌的抗菌作用和对主动外排机制的抑制作用。方法:收集2011年1月至2011年12月宁波市第一医院患者临床标本中分离到的20株鲍曼不动杆菌,按照耐药性把20株菌分为多重耐药组和敏感组,每组10株。先检测10种单味中药对鲍曼不动杆菌的抑菌作用,再分别用外排抑制剂氰氯苯腙(终浓度15 mg/L)、利血平(终浓度20 mg/L)检测四环素和氯霉素外排泵表型,抗生素MIC值比空白对照下降4倍或以上时判为外排泵表型阳性。然后用终浓度2 000g/L的10种单味中药做外排抑制剂,检测四环素和氯霉素MIC值是否比空白对照下降4倍或以上。最后对数据进行统计分析。结果:10种单味中药对鲍曼不动杆菌都有不同程度的抑菌作用,黄岑和连翘的抑菌作用最强,金银花、三叶青、大青叶、黄连、野菊花的抑菌作用稍弱;焦栀子、蒲公英、紫花地丁的抑菌作用较弱。金银花、连翘、三叶青、焦栀子、大青叶、野菊花、蒲公英这7味中药对两组菌的抑菌作用有统计学差异(P<0.05):对敏感组菌的MIC_(50)和MIC_(90)都明显低于多重耐药组,而黄连、紫花地丁、黄岑对两组菌的抑菌作用无显著差异(P>0.05)。两组鲍曼不动杆菌对四环素和氯霉素的外排泵表型阳性率高,终浓度2 000 g/L的10种单味中药对氯霉素和四环素没有外排抑制作用。重新配制并提高本试验中10种单味中药水煎液浓度至终浓度为20 000 g/L,对氯霉素和四环素仍然没有外排抑制作用。结论:中药对鲍曼不动杆菌有抑菌作用,可作为抗生素的辅助用药。主动外排机制是鲍曼不动杆菌对四环素和氯霉素耐药的一种重要机制,但在20 000 g/L的浓度下,10种单味中药对氯霉素和四环素没有外排抑制作用。

中性粒细胞CD64指数测定在肺部感染性疾病诊断中的价值

目的探讨中性粒细胞CD64指数测定在肺部感染性疾病诊断和判断抗感染疗效中的价值。方法对细菌性肺炎患者30例(其中29例经抗菌药物治疗后X线摄片和临床症状显示好转,为治疗后组)、支原体肺炎患者22例以及健康对照组30名用流式细胞仪进行中性粒细胞CD64指数测定,并行血常规、红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)测定。结果细菌性肺炎组CD64指数和CRP与健康对照组和支原体肺炎组比较,差异有统计学意义(P<0.01),与治疗后组比较差异有统计学意义(P<0.05)。CD64指数与CRP呈正相关(r=0.728,P=0.001)。CD64指数诊断细菌性肺炎的敏感性为84%、特异性为91%,CRP敏感性为89%、特异性为78%。结论CD64指数测定有助于肺部细菌感染早期诊断、鉴别诊断以及对抗感染疗效的考核。

2型糖尿病肾病患者正五聚蛋白3和超敏C反应蛋白及γ-谷氨酰转移酶的检测及其临床意义

目的探讨2型糖尿病患者血清正五聚蛋白3(PTX3)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)及γ-谷氨酰转移酶(GGT)的表达及其临床意义。方法选取2011年6月—2012年2月宁波市第一医院门诊和住院的2型糖尿病患者131例,根据尿清蛋白排泄率(UAER)将患者分成3组:正常蛋白尿组(UAER<30 mg/24 h,46例)、微量蛋白尿组(UAER 30～300 mg/24 h,43例)和临床蛋白尿组(UAER>300 mg/24 h,42例);另选取同期同院体检健康者30例作为对照组。分别检测并比较4组受试者血清PTX3、hs-CRP、GGT水平。非正态分布资料以〔中位数(四分位数间距)〕表示,多组间比较采用Kruskal-Wallis检验,两组间比较采用Mann-Whitney U检验。结果 4组受试者血清PTX3、hs-CRP、GGT水平比较,差异均有统计学意义(P<0.01);其中正常蛋白尿组血清PTX3水平高于对照组(P<0.05),正常蛋白尿组、微量蛋白尿组、临床蛋白尿组血清PTX3、hs-CRP、GGT水平依次升高,组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,PTX3、hs-CRP、GGT均与UAER呈正相关(r值分别为0.667、0.633和0.365,P均<0.01)。结论 2型糖尿病患者血清PTX3、hs-CRP和GGT水平显著高于健康者,且随着肾损害程度的加重而升高。故检测这3个指标对2型糖尿病患者早期肾损害具有诊断价值。

产气肠杆菌连续分离株的耐药性及β-内酰胺类抗生素耐药机制的研究

目的探讨临床连续分离的产气肠杆菌耐药性及耐碳青霉烯类药物菌株对β-内酰胺类药物耐药的主要机制。方法用Vitek2-Compact仪对临床连续分离的240株产气肠杆菌进行鉴定和常规药敏试验,并筛选出耐碳青霉烯类药物的菌株;用琼脂稀释法测定其对碳青霉烯类药物的MIC值;用改良的三维试验方法分别检测耐药菌株的ESBLs与AmpC酶;改良Hodge试验法检测碳青霉烯酶;用PCR扩增法检测3种β-内酰胺酶的耐药基因;结果 240株产气肠杆菌对23种常用抗生素的耐药率在3.8%-100%之间,最高为头孢西丁（100%）、最低为亚胺培南（3.8%）;筛选出10株耐碳青霉烯类产气肠杆菌;三维试验10株菌ESBLs及AmpC酶均为阳性,Hodge试验阳性7株。PCR结果示,携带blaKPC基因7株;携带blaCTXM基因7株,携带blaSHV基因2株;携带blaDHA基因6株,携带blaACT/MIR型ampC基因4株;16SrRNA基因定量确定ampC基因的表达增加的3株。结论产气肠杆菌对临床常用抗菌药物具有较高的耐药性,其主要耐药机制为产碳青霉烯酶、ESBLs与AmpC酶。

利用siRNA靶向沉默Jeko-1细胞survivin mRNA基因的实验研究

本研究旨在探讨Survivin基因在淋巴瘤细胞中的生物学作用,为将来以Survivin为靶点治疗套细胞淋巴瘤提供实验室证据。体外化学合成针对survivin mRNA基因的siRNA片段,通过DMRIE-C转染Jeko-1细胞,以无关siRNA、未转染的细胞为对照,采用RT-PCR和Western blot方法检测siRNA的抑制效果,利用流式细胞术检测细胞的凋亡率,用CCK-8法检测转染24、48、72 h对细胞增殖的影响。结果表明,与未转染的空白组相比,siRNA转染Jeko-1细胞后24、48、72 h survivin mRNA的相对表达量分别为0.49±0.03、0.38±0.02和0.17±0.02;细胞增殖抑制率分别为(31.2±2.1)%、(43.3±3.4)%和(52.6±2.5)%;细胞凋亡率分别为(6.3±0.5)%、(13.5±1.1)%和(23.6±1.6)%;survivin蛋白表达水平逐步减低。结论:靶向survivin的siRNA能在体外特异性下调目的基因survivin mRNA和蛋白的表达,表现出抑制Jeko-1细胞增殖和促使其凋亡的生物学效应,survivin基因有望成为淋巴瘤治疗的一个药物靶点。

可移动遗传元件:耐药基因的载体

细菌通过各种可移动遗传元件(质粒、转座子、整合子、噬菌体、插入序列共同区等),以基因水平转移的方式从其它细菌获得外源性耐药基因,整合在自身基因组上而产生获得性耐药。本文主要阐述各种可移动遗传元件介导获得性耐药的机制,理解可移动遗传元件在耐药性发展和传播上的作用,是设计和执行干预方法来减少细菌感染威胁的前提条件。本文还介绍了一种新发现的可移动遗传元件:基因转移因子,它与细菌耐药基因水平转移的关系值得研究。

2种CCK-8试剂最佳实验条件比较

在细胞学实验中，MTT（噻唑蓝）比色法常用于细胞毒性、细胞活性和细胞增殖的检测。因MTT法具有简便、经济、安全等特点，而被广泛使用，但其操作较繁琐，需加入二甲基亚砜（DMSO）溶解甲腆颗粒，且往往因溶解不全而对实验结果造成影响，为克服MTT法的不足，近年来出现了另外一些检测试剂，如XTr试剂、MTS试剂，国外研发出了1种新型的检测方法CCK-8（cellcountingkit-8），其原理为活细胞线粒体脱氢酶转化的黄色结晶为高度水溶性，

妊娠糖尿病代谢特征与产后糖代谢异常关系分析

目的研究妊娠糖尿病（GDM）患者临床代谢特征与产后早期持续糖代谢异常之间的关系。方法选取孕24～36周妊娠糖尿病患者63例，同期糖代谢正常孕妇30例作对照。分别测定两组空腹及75g葡萄糖负荷后血糖、胰岛素和血游离脂肪酸水平（FFA），同时测定空腹状态下血超敏C反应蛋白（Hs-CRP）、血脂谱、糖化血红蛋白等指标，计算孕前体重指数、新稳态模型胰岛素抵抗指数（HOMA2-IR）、新稳态模型胰岛B细胞功能指数（HOMA2-％B）、早期胰岛素分泌指数（△130／AG30）、早期FFA降低比率（△FFA30／△FFA0）、FFA曲线下面积（AUCFFA），并记录糖尿病家族史；同时于产后6～8周，对所有妊娠糖尿病患者再次行75g葡萄糖负荷试验以判定产后糖代谢情况，并分为正常对照组（NC）、产后糖调节正常组（NGR）和产后糖调节异常组（AGR）。结果17例GDM患者于产后6～8周仍持续存在糖代谢异常。占总随访例数的29％。对比NC组和NGR组孕期各项临床代谢指标，显示AGR组有明显升高的孕前BMI、HbA1C、空腹血糖、Hs-CRP。3组间血脂谱及糖尿病家族史分布的差异无统计学意义。AGR组胰岛素抵抗明显升高、13细胞功能减退。AGR组空腹、OGTT2h后血FFA及AUCFFA明显高于NC组和NGR组。NC组的△FFA30／AFFA0为25％，高于NGR组的18％和AGR组的15％（均P〈0．05）。Logistic回归分析显示：孕前BMI升高、AUCFFA升高和HOMA2一％B下降是妊娠糖尿病患者产后持续血糖异常的危险因素。结论有相当部分的GDM患者产后持续存在糖代谢异常。孕前BMI、胰岛B细胞功能缺陷和血FFA水平升高可能是GDM患者产后持续血糖升高的主要危险因素。

HPV DNA分型联合“三阶梯”技术对子宫颈癌前病变诊断及预后判断的价值

目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)DNA分型联合"三阶梯"技术[即HPV阳性+液基薄层细胞检测(TCT)→阴道镜检查→宫颈组织病理学诊断]在大样本宫颈癌普查中的应用价值。方法选取进行宫颈癌普查的妇女9 033例为实验组,按照宫颈癌"三阶梯"筛查方案,首先进行高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)DNA检查,阳性者进行分流处理:对HPV16亚型、HPV18亚型阳性者或者年龄超过45岁者进行TCT检查+阴道镜检查→宫颈组织病理学诊断,对其他阳性者进行随访。另选取对照组2 448例,进行HR-HPV DNA+TCT检查→阴道镜检查→宫颈组织病理学诊断。结果实验组HR-HPV DNA阳性率7.82%(706/9 033),TCT检查+阴道镜检查阳性365例,宫颈组织病理学诊断阳性119例;对照组HPV阳性及TCT≥未明确诊断意义的不典型鳞状上皮细胞/不典型腺细胞(ASCUS/AGUS)2.57%(63/2 448),阴道镜检查63例,行宫颈组织病理学诊断39例。2个组行宫颈组织病理学诊断高度鳞状上皮内病变(HSIL)和宫颈癌检出率:实验组0.17%(15/9 033),对照组0.16%(4/2 448),2个组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HPV DNA分型联合"三阶梯"技术在大样本人群的宫颈癌普查中是一种简便、经济和方便分流管理HPV阳性者的方法,值得推广。

非高发地区地中海贫血孕妇临床特点分析

目的:探索非高发地区地中海贫血孕妇的特点,减少中间型及重型地中海贫血患儿的出生。方法:回顾性分析宁波市第一医院2015年3月至2016年4月诊断的235例地中海贫血孕妇,采用XN-9000全自动血细胞分析仪进行血常规检测,采用HYDRASYS血红蛋白电泳仪进行血红蛋白电泳检测,利用荧光PCR熔解曲线法检测常见的3种缺失型和3种非缺失型α型地中海贫血以及21种突变的β型地中海贫血。结果:235例地中海贫血孕妇中β地中海贫血占大多数,其次为α地中海贫血和复合型地中海贫血。大多数孕妇处于轻度贫血状态,表现为小细胞性贫血,但合并缺铁性贫血(IDA)者少见。二胎孕妇比例明显升高,α地中海贫血和β地中海贫血中比例接近1/3,复合型地中海贫血中占75%。血红蛋白电泳中出现HbF的多见于β地中海贫血,且在本籍孕妇中多见。血红蛋白异构体易见于α型地中海贫血孕妇,且均为非本籍孕妇。α型地中海贫血孕妇中无论本籍孕妇还是非本籍孕妇均以--sea基因型最多,β型地中海贫血孕妇中,本籍孕妇及父母一方为本籍孕妇均以IVS-II-654基因型最多,占55.38%,而非本籍孕妇中以CD41-42、IVS-II-654和CD17这3种基因型最多,占30%。结论:地中海贫血孕妇在非高发地区并不少见,并且有自身独有的特点,需引起重视。对该类孕妇配偶需进行地中海贫血基因检测,及时对高危胎儿行进一步遗传学检查,避免中间型及重型地中海贫血胎儿出生。

痛风患者血清中IL-37、IL-1β及IL-18水平检测及其相关性研究

目的:通过检测痛风患者不同阶段血清中白细胞介素(IL)-37、IL-1β及IL-18水平,探讨IL-37在痛风发病中的作用。方法:采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定20例初发痛风患者(痛风组,急性发作期和完全缓解期)、20例高尿酸血症患者(高尿酸血症组)及20例健康志愿者(健康对照组)血清中IL-37、IL-1β及IL-18的水平,比较痛风组患者急性发作期和完全缓解期各指标的表达差异,以及痛风组患者急性发作期及完全缓解期与其他两组各指标的表达差异;同时分析急性发作期患者IL-37水平与血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)、IL-1β和IL-18水平的相关性。结果:痛风组患者急性发作期的IL-1β和IL-18水平均显著高于完全缓解期,差异具有统计学意义(P<0.05);而IL-37的水平仅略高于完全缓解期,差异无统计学意义(P>0.05)。痛风组患者急性发作期IL-37、IL-1β及IL-18水平均高于高尿酸血症组和健康对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05);而完全缓解期仅IL-37水平高于高尿酸血症组和健康对照组(P<0.05)。痛风组患者急性发作期的IL-37水平与其ESR、CRP、IL-1β、IL-18水平呈正相关(均P<0.01)。结论:IL-37可能作为一个抑炎因子参与了痛风的炎症反应过程。

血正五聚蛋白3、尿α_1微球蛋白与免疫球蛋白G对糖尿病肾病早期诊断的价值

目的探讨2型糖尿病患者血正五聚蛋白3(PTX3)、尿αl微球蛋白(αlMG)与免疫球蛋白G(IgG)在糖尿病肾病早期诊断中的意义。方法 2型糖尿病患者85例,根据尿白蛋白排泄率(UAER)分成正常蛋白尿组、微量蛋白尿组与临床蛋白尿组,分别检测三组PTX3、αlMG与IgG。结果微量白蛋白尿组PTX3、αlMG与IgG水平显著高于正常白蛋白尿组,差异有统计学意义(P<0.05)。临床白蛋白尿组PTX3、αlMG与IgG水平显著高于正常白蛋白尿组与微量白蛋白尿组,差异有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,PTX3与尿微量白蛋白(mAlb)、αlMG、IgG均呈正相关(P<0.01)。结论 PTX3、αlMG与IgG水平的检测对2型糖尿病患者早期肾损害具有诊断价值,单独mAlb检测诊断糖尿病肾病存在局限性。

泌尿生殖道支原体感染现状及抗菌药物活性研究

目的了解当前泌尿生殖道支原体感染情况及抗菌药物抗菌活性,为临床合理应用抗菌药物提供依据。方法采用生物梅里埃公司产品MycoplasmaIST试剂盒对5725例患者的分泌物、前列腺液、羊水等标本进行支原体培养、鉴定和药物敏感试验。结果3年来共检测5725例标本,检出支原体2315株(不包括重复株),阳性检出率达40.4%,其中男性检出960株,构成比为41.5%,女性检出1355株,构成比为58.5%。2315株支原体中,解脲脲原体感染1858株,占总数的80.3%,人型支原体感染77例,只占3.3%,混合型感染占380例,占16.4%。药敏结果显示,原始霉素、交沙霉素、强力霉素对支原体均有很强的抗药活性。耐药率分别为0.37%、0.73%和1.29%。对四环素、红霉素、克拉霉素、阿奇霉素的耐药率分别是0.33%、33.7%、32.4%和22.4%。支原体对环丙沙星、氧氟沙星的耐药率明显增高,其耐药率分别是68.1%和51.8%。结论泌尿生殖道支原体感染逐年上升。支原体耐药率在不断增加,特别是喹诺酮类抗菌药物,耐药率明显增加。原始霉素、交沙霉素、强力霉素是目前治疗支原体感染理想药物。监测支原体感染及抗菌药物的耐药趋势,对流行病学调查、临床合理应用抗菌药物及降低抗菌药物耐药率具有非常重要的意义。