自体CIK回输对转移性恶性肿瘤细胞免疫指标变化的影响

目的探讨CIK治疗前后不同时间点T细胞亚群变化对恶性肿瘤临床疗效的影响。方法采用流式细胞术对71例恶性肿瘤患者外周血T细胞亚群进行检测。结果与非转移组比较,转移组T淋巴细胞亚群绝对数值增高(P<0.01),乳腺癌肺转移(15例)Th、NK指标高于均值(35.67±5.28和25.62±7.24),增幅比率41.6%(15/36),CD4+/CD8+绝对值增幅>45%(由0.8±0.3到1.7±0.6;P<0.01)。转移组总有效率52.8%,非转移组总有效率91.4%。结论 CIK治疗对肿瘤负荷的缓解作用和提高疗效方面具有一定的临床意义。

恶性肿瘤免疫治疗策略与方案的分析探讨

免疫治疗是恶性肿瘤综合治疗的重要组成部分,恶性肿瘤的免疫治疗自一百余年前被提出以来,国内外的学者已经对其进行了深入的研究,目前已经证明肿瘤的发生发展及患者的预后与其免疫功能之间有着互为因果的联系。

肿瘤热休克蛋白70联合灵芝孢子粉对荷瘤小鼠的治疗作用

目的研究肿瘤热休克蛋白70(HSP70)与灵芝孢子粉联合运用对荷瘤小鼠的治疗作用。方法液相色谱法纯化小鼠肝癌细胞株中的HSP70,运用SDS-PAGE及Western blot对纯化产物进行定性分析,再用毛细管电泳鉴定其浓度。通过动物实验,观察HSP70与灵芝孢子粉单独应用及联合应用的抗肿瘤作用。ELISA法测免疫小鼠血清中的IFN-γ、CXCL-9、CXCL-10的水平。结果 HSP70与灵芝孢子粉联合应用较单独应用的治疗效果更明显。单独应用灵芝孢子粉能延长荷瘤小鼠的生存期限,其中1只获得长期带瘤生存,而HSP70可使40%荷瘤小鼠的肿瘤全部消退,获得长期无瘤生存,与对照组相比较差异显著(P<0.01)。联合应用组40%荷瘤小鼠的肿瘤完全消退,3只小鼠获得长期生存,其中2只为无瘤生存,且肿瘤体积及质量均较分别单独应用组差别显著(P<0.05或P<0.01),平均生存期>(84.6±7.8)d,与对照组相比差异显著(P<0.01)。两药单独应用组、联合应用组血清IFN-γ、CXCL-9、CXCL-10水平均显著高于对照组(P<0.05或P<0.01)。联合应用组血清IFN-γ、CXCL-9、CXCL-10水平较单独应用组差别显著(P<0.05或P<0.01)。结论 HSP70与灵芝孢子粉联合应用对荷瘤小鼠有明显的治疗作用,可明显抑制肿瘤进展,提高生存率。以上结果对研究人类恶性肿瘤的免疫治疗具有较为重要的借鉴意义。

肿瘤组织库存标本的质量控制

目的:通过对库存肿瘤标本的质量控制,为临床及科研提供有研究价值的标本。方法:收集已储存的组织标本,采用RT-PCR技术对其RNA、DNA和蛋白的降解进行质量检测。结果:通过对已保存的肿瘤组织标本随机质量检测,所储存的标本质量符合分子生物学实验要求。结论:本组库存肿瘤标本无组织降解。

树突细胞／细胞因子诱导的杀伤细胞治疗恶性肿瘤53例临床分析

目的 探讨DC/CIK在治疗恶性肿瘤中的作用及可能出现的副反应,为该技术的应用提供参考.方法 对53例恶性肿瘤患者DC/CIK方法 治疗,观察近期效果和副反应.结果 53例DC/CIK培养均获成功.在生物治疗方法 下观察6～8个月,血液中免疫细胞大幅增加,肿瘤标记物下降（与治疗前相比P〈0.05）.结论 生物治疗（DC/CIK）作为恶性肿瘤的新疗法,对恶性肿瘤有一定的治疗作用,副反应轻微.

原发性脾脏肿瘤30例诊治分析

原发性脾脏肿瘤临床上比较少见.我院自1995年1月至2010年12月在585例脾切除手术中发现原发性脾脏肿瘤30例,现将诊治结果报道如下. 1 临床资料 1.1 一般资料本组30例患者中原发性脾脏良性肿瘤22例,包括海绵状血管瘤7例,血管淋巴管瘤7例,囊状淋巴管瘤2例,单纯性囊肿2例,假性囊肿2例,毛细血管瘤1例,错构瘤1例;其中男8例,女14例,年龄18～59岁.

淋巴结外恶性淋巴瘤外周血T淋巴细胞亚群与免疫指标测定分析

目的:检测原发性淋巴结外恶性淋巴瘤(Prim ary extranodal lymphom a,PENL)患者外周血T淋巴细胞亚群比例和免疫球蛋白(Ig)水平的变化。方法:分别应用流式细胞术(FCM)和免疫速率比浊法测定T淋巴细胞亚群比例和免疫球蛋白(Ig)以及补体C3、C4含量。结果:PENL组CD3+、CD4+和CD8+明显降低(P<0.01),原发性结性恶性淋巴瘤(结性组)CD4+/CD8+比值和NK细胞比较其他两组有显著意义(P<0.01);提示PENL组、结性组中CD3+、CD4+和NK细胞与IgA、IgG、C3比较有显著的相关性(P<0.01)。结论:结外恶性淋巴瘤患者免疫功能的改变,在其发病机制中的作用不容忽视,可以作为病情进展的免疫学指标。

乳腺癌组织细胞体外对化疗药物敏感性检测结果与GST-π Topo Ⅱ表达的关系

目的:探讨乳腺癌组织细胞体外对化疗药物敏感性检测结果(ATP-TCA法)与GST-π、Topo Ⅱ表达的关系。方法:用ATP-TCA法检测45例乳腺癌标本对4种常用化疗单药表阿霉素(EPI)、紫杉醇(PTX)、多西紫杉醇(TXT)、吉西他滨(GEM)及2种联合用药表阿霉素+多西紫杉醇(EPl+TXT)和环磷酰胺+表阿霉素+5-氟尿嘧啶(CEF)的敏感性,并用免疫组化方法检测乳腺癌组织GST-π、TopoⅡ的表达。结果:ATP-TCA检测结果显示,表阿霉素、紫杉醇、多西紫杉醇、吉西他滨体外对乳腺癌细胞增殖抑制率分别为62.2%、35.6%、8.9%、15.6%;联合用药EPI+TXT、CEF的抑制率分别是77.8%、73.3%,高于单药紫杉醇、多西紫杉醇、吉西他滨,有显著性差异,P<0.01。45例乳腺癌标本中GST-π阳性表达率为44.4%(20/45),TopoⅡ阳性表达率为62.2%(28/45)。在GST-π表达阴性或Topo Ⅱ表达阳性时,表阿霉素、EPI+TXT及CEF方案对乳腺癌组织细胞增殖抑制率较高,有显著性差异,P<0.01。结论:ATP-TCA法结合GST-π、TopoⅡ的表达可用于乳腺癌化疗药物的选择。

联合免疫疗法治疗小鼠肝癌移植瘤模型的研究

目的:探讨基础免疫调节、非特异性免疫治疗和特异性免疫治疗联合运用对小鼠肝癌移植瘤的治疗作用和机理。方法:细胞培养技术培育小鼠的肝癌细胞,高效液相色谱和亲和层析技术分离肿瘤HSP70、SDS-PAGE电泳和Western blot技术进行HSP70的检测,以清洁级小鼠进行治疗实验,用ELISA讲行细胞因子的分析。结果:治疗组荷瘤鼠移植瘤重量、体积均显著减小,肿瘤转移率显著降低,生存时间明显延长,与对照组相比,差别有极显著性(P<0.05或P<0.01),其中三种药物联合治疗组荷瘤鼠肿瘤均消失,无转移,均获得长期生存(>90天);治疗组血清中IFNγ-、CXCL-9、CXCL-10水平较对照组均有升高,与对照组差异显著(P<0.05或P<0.01),以三种药物联合治疗组升高尤为显著。结论:联合免疫疗法可以改善肿瘤微环境,基础免疫调节对特异性和非特异性免疫治疗有促进和增强作用,研究证明联合免疫疗法对小鼠肝癌移植瘤具良好的治疗作用,该疗法对改善免疫治疗的临床应用策略有重要参考意义。

淋巴结外恶性淋巴瘤外周血T淋巴细胞亚群与免疫指标测定分析

目的:检测原发性淋巴结外恶性淋巴瘤(primaryextranodallymphoma,PENL)患者外周血T淋巴细胞亚群比例和免疫球蛋白(Ig)水平的变化。方法:分别应用流式细胞术(FCM)和免疫速率比浊法测定T淋巴细胞亚群比例和免疫球蛋白(Ig)以及补体C3、C4含量。结果:PENL组CD3+、CD4+和CD8+明显降低(P<0.01),原发性结性恶性淋巴瘤(结性组)CD4+/CD8+比值和NK细胞比较其他两组有显著意义(P<0.01);提示PENL组、结性组中CD3+、CD4+和NK细胞与IgA、IgG、C3比较有显著的相关性(P<0.01)。结论:结外恶性淋巴瘤患者免疫功能的改变,在其发病机制中的作用不容忽视,可以作为病情进展的免疫学指标。

老年人结外恶性淋巴瘤外周血免疫指标测定分析

目的检测老年人结外恶性淋巴瘤(PENL)患者外周血T淋巴细胞亚群比例和免疫球蛋白(Ig)水平的变化。方法76例恶性淋巴瘤患者分成2组原发性结外淋巴瘤(结外组)36例,原发性结性淋巴瘤(结性组)40例,另取非淋巴瘤(炎性组)20例作为对照组。分别应用流式细胞术(FCM)和免疫速率比浊法测定T淋巴细胞亚群比例免疫球蛋白(Ig)和Ig以及C3、C4含量。结果结外组CD3+、CD4+和CD8+明显降低(P<0.01),原发性结性恶性淋巴瘤(结性组)CD4+/CD8+比值和NK细胞较其他2组差异有显著性(P<0.01);结外组、结性组中CD3+、CD4+和NK细胞与IgA、IgG、C3有显著的相关性(P<0.01)。结论PENL患者免疫功能的改变,可以作为病情进展的免疫学指标。

CpG-ODN对荷瘤鼠的治疗作用

目的探讨含CpG序列的寡脱氧核糖核苷酸(CpG-ODN)对小鼠肝癌移植瘤的治疗作用。方法体外培养小鼠肝癌细胞Hepa 1-6,建立小鼠肝癌移植瘤模型,分为生理盐水对照组和CpG-ODN治疗组,瘤旁皮下分别给予0.9%NaCl注射液、CpG-ODN治疗,测量移植瘤的大小,死亡后剥离瘤体称重并解剖观察肿瘤转移情况及生存情况。ELISA法测免疫小鼠血清中的细胞因子IFN-γ、趋化性细胞因子CXCL-9、CXCL-10的水平。结果 8次治疗后,CpG-ODN治疗组瘤重抑制率和体积抑制率分别为69.5%和75.8%,肿瘤重量及体积均显著小于生理盐水对照组(P<0.01)。CpG-ODN治疗组小鼠的生存时间显著长于对照组小鼠(P<0.01),其中两只获得长期无瘤生存。CpG-ODN治疗组血清IFN-γ、CXCL-9、CXCL-10水平均显著高于生理盐水对照组(P<0.01)。结论 CpG-ODN对肝癌移植瘤小鼠显示出良好的抑瘤效应,荷瘤小鼠生存期得到显著延长,血清中的细胞因子IFN-γ、趋化性细胞因子CXCL-9、CXCL-10的水平显著升高与其诱导的抗肿瘤免疫相关。

胃癌转移淋巴结中的多基因蛋白联合检测

目的 研究胃癌转淋巴结中原癌基因PCNA、CerbB - 2、bcl- 2和抑癌基因p1 6检测的四种基因蛋白表达水平,探讨其在胃癌转移淋巴结中的临床意义。方法 应用免疫组化法检测36例胃癌转移淋巴结中PCNA、C -erbB - 2、bcl- 2和p1 6的基因蛋白表达。结果 PCNA、C -erbB- 2和bcl- 2在胃窦部癌转移淋巴结中N1站表达率高于N2、N3站,在各类型胃癌转移淋巴结中N2、N3站表达率呈降低趋势,p1 6在N3站表达率呈上升趋势。黏液腺癌转移淋巴结中p1 6表达率最低。结论 联合基因蛋白检测胃癌转移淋巴结可以作为判断术后转移状况和预后的重要参考指标。

胃癌围手术期处理的临床分析与探讨

胃癌的科学、规范治疗是提高治疗效果的关键，本文根据国内外的最新进展和笔者的体会，对进展期胃癌的新辅助治疗、术前术中处理、手术方法、术后辅助治疗进行了论述，提出合理的综合治疗和科学的处理是提高胃癌患者长期生存率和生活质量的关键，免疫调节治疗对防止胃癌术后复发有一定的作用。

ATP-TCA法对胃癌常用化疗药物体外作用的评价

胃癌是最常见的消化系统恶性肿瘤,位列全球第四大常见肿瘤,占全球癌症死亡原因的第二位.术前、术后化疗是胃癌的重要辅助治疗方式.近年来,各大制药企业不断研发新的抗癌药物,临床上肿瘤化疗的应用更加广泛合理,化疗药物在以手术为主的综合治疗中占有重要地位.术前化疗可使原发癌缩小,为手术切除创造有利条件,降低肿瘤细胞活力,消灭微波转移灶,提高综合治疗后患者的长期生存率.但化疗药物的选择和确定尚缺乏统一的标准,存在盲目性、随意性,无效药物可对人体造成损害,从而降低患者的生存质量.基于三磷酸腺苷生物荧光法（ATP-TCA）检测肿瘤体外的药物敏感性,是近年发展起来的对恶性肿瘤具有较高可评估率的方法,其有助于临床医师确定化疗药物组合及制定个体化化疗方案,减少治疗开支,降低药物的不良反应,提高化疗的有效率.本研究采用此方法对85例胃癌标本进行检测,比较7种常用化疗药物和3种联合化疗方案的敏感性,以期为临床胃癌化疗提供参考依据.

乳腺癌组织中SKA2 mRNA和蛋白的表达水平及其与临床病理特征的相关性

目的探讨乳腺癌组织中纺锤体和动粒相关蛋白2(SKA2)mRNA和蛋白的表达水平,并分析其与临床病理特征的相关性。方法收集新鲜乳腺癌及癌旁冷冻组织标本40对,采用实时荧光定量PCR法检测SKA2 mRNA表达水平;选取乳腺癌石蜡包埋标本160例,采用免疫组化染色法检测SKA2蛋白表达水平,并分析SKA2蛋白表达水平与患者年龄、肿瘤大小、TNM分期、组织学分级、病理分型、分子分型及淋巴结转移状况等临床病理特征的相关性。结果乳腺癌组织中SK2 mRNA表达水平明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。SKA2 mRNA在乳腺癌中的高表达率为70.0%。SKA2蛋白表达与患者TNM分期和淋巴结是否转移均有关(均P<0.01),而与患者年龄、肿瘤大小、组织学分级、病理分型、分子分型均无关(均P>0.05)。结论SKA2蛋白在乳腺癌中的高表达与TNM分期和淋巴结转移密切相关;SKA2可作为反映乳腺癌转移的一个重要指标。

HSP70-PCs的抗肿瘤作用

热休克蛋白（heat shock protein，HSP）由Ritossa在1962年研究果蝇唾液腺染色体时首先发现，是一类广泛存在于自然界生物体内、具有重要生理功能且高度保守的蛋白质。在正常细胞中有少量表达，约占细胞总蛋白的5％-10％，当细胞处于高温、感染、创伤、缺氧及恶性肿瘤等应激状态下，

灵芝提取物在肿瘤免疫治疗中的调节作用

目的将灵芝提取物与肿瘤免疫制剂联合运用,探讨灵芝提取物在肿瘤免疫治疗中的调节作用。方法纯化Hepa 1-6细胞的肿瘤热休克蛋白70多肽复合物(HSP70-PCs),SDS-PAGE及Western-blot对产物进行鉴定。将Hepa 1-6细胞浓度调整为4×107/ml,按0.1 ml/只接种于C57BL/6j小鼠背部皮下建立实验模型。随机将模型分为PBS对照组、灵芝提取物组(L组)、HSP70-PCs组(H组)、CpG-ODN组(C组)、灵芝提取物联合HSP70-PCs组(L+H组)和灵芝提取物联合CpG-ODN组(L+C组),每组10只。L组、L+C组、L+H组于建模的第7天开始予灵芝提取物按4 g/kg体重灌胃,1次/d,直至实验组小鼠死亡或实验结束;C组和L+C组予瘤旁皮下注射CpG-ODN 100μg/只,每周2次,共8次;H组和L+H组予瘤体对侧背部皮下注射HSP70-PCs 10μg/只,每周1次,共4次。对照组予皮下注射灭菌PBS液0.1 ml/只,每周1次,共4次。定时测量瘤体大小,记录肿瘤生长情况、有无转移灶及生存时间。ELISA法检测实验鼠血清CXCL-9、CXCL-10、IFN-γ水平。运用SPSS 16.0软件进行数据处理。结果灵芝提取物联合CpG-ODN或HSP70-PCs可以诱导抑瘤作用,肿瘤体积、质量、肿瘤转移率及生存期限与单独使用HSP70-PCs或CpG-ODN比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);灵芝提取物联合CpGODN或HSP70-PCs可以提高荷瘤小鼠血清中CXCL-9、CXCL-10和IFN-γ水平,与二者单独使用组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论灵芝提取物可通过诱导Th1型细胞因子表达来发挥免疫调节作用,对肿瘤免疫治疗有增强作用。

二甲双胍对乳腺癌细胞株的抑制作用

本实验旨在观察二甲双胍对乳腺癌细胞株MCF-7、MDA-MB-231的影响，探讨其抗肿瘤的作用及其机制。

乳腺癌体外化疗敏感性的检测与P-糖蛋白、谷胱甘肽S转移酶-π及TopoⅡ表达的关系

目的 探讨乳腺癌体外化疗敏感性的检测（ATP-TCA法）与P-糖蛋白（P-gp）、谷胱甘肽S转移酶-π（GST-π）及TopoisomeraseⅡ（TopoⅡ）表达的关系.方法 用ATP-TCA法检测52例乳腺癌标本对4种单药的敏感性,并用免疫组织化学方法检测其P-糖蛋白、GST-π及TopoⅡ的表达.结果表阿霉素、紫杉醇、吉西他滨、多西他赛的有效率分别为63.4%、40.4%、21.1%、13.4%.P-糖蛋白、GST-π及TopoⅡ表达率分别为3 8.5%、44.2%及63-5%.表阿霉素在P-糖蛋白、GST-π阴性表达及TopoⅡ阳性表达时有效率较高.4种药物同时耐药的可能性在P-糖蛋白阳性表达者为60.0%（12/20）,高于阴性表达者9.4%（3/32）.结论 ATP-TCA法结合P-gp、GST-π及TopoⅡ的表达可用于乳腺癌化疗药物的选择.P-gp与乳腺癌多药耐药有关.