高效表达人源可溶性转铁蛋白受体sTfR抗原及多克隆抗体制备和应用

通过多种策略构建人源可溶性转铁蛋白受体(sTfR)抗原的高效表达体系获得足量的sTfR抗原,并免疫得到稳定的兔多克隆抗体,以此制备高灵敏度的体外检测试剂盒。首先通过筛选表达体系,最终确定以人胚胎肾细胞293(HEK293)表达体系进行sTfR抗原的表达,表达量可达0.52 mg/mL。为进一步增强sTfR表达量,优选CMV启动子及白蛋白信号肽,使抗原的表达量进一步增强至0.86 mg/mL。随后优选0.3 mg的sTfR抗原为免疫剂量,持续5次免疫新西兰兔后可获得高效价的sTfR兔多克隆抗体,该抗体耦联胶乳微球制成试剂盒后进行样本检测,其检测效果准确稳定。sTfR试剂盒及原料的开发显著降低生产成本,也为其他检测项目的试剂盒开发提供参考意义。