2012-2014年安康市食品风险监测概况

调查分析安康市食品污染状况,预防食物中毒暴发流行。按照《全国食源性疾病监测工作手册》的要求采样、检测、保存菌株、网络报告。共计监测672份样品,检出致病菌50株,总检出率7.44%。检出沙门、单增李斯特菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌、大肠杆菌O157∶H7,检出率分别为0.17%、3.21%、2.87%、6.76%、0.83%;阪崎肠杆菌、致泻大肠杆菌、大肠杆菌O104∶H4、志贺氏菌均未检出。安康市食品致病菌污染状况复杂,单增李斯特菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌检出率较高,尤其应注意单增李斯特菌引起的食物中毒。

人类免疫缺陷病毒抗体阳性样本661例的蛋白免疫印迹试验带型分析

目的回顾性分析2015—2021年安康市艾滋病确证实验室661例蛋白免疫印迹试验HIV抗体阳性样本的带型,探讨蛋白免疫印迹试验(WB)带型与HIV感染与流行之间的关系。方法对2015—2021年661例蛋白免疫印迹试验HIV抗体阳性样品的带型进行整理,并使用SPSS 22.0软件进行统计分析。结果661例免疫印迹试验HIV抗体阳性的样品中,以全带和次全带为主,其中抗env基因编码的包膜蛋白抗体反应性最高率;gp160和gp120蛋白中的p55反应性率较低,为49.8%;抗gag基因编码的核心蛋白中,p39的反应性率较低,为53.6%。HIV抗体WB试验阳性结果者多为中青年,且多为男性,男女比例为2.73:1,带型p24在不同性别间的反应性率差异有统计学意义(χ^(2)=13.78,P<0.05)。带型p55,p39,p24,p17反应性率在不同年龄组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论WB条带的分布差异分析有助于总结本地区HIV流行规律与特征,为HIV防控策略的制定提供理论基础。

2012-2014年安康市流感病毒分离结果及分析

目的对安康市2012-2014年流行期流感病毒进行分离鉴定及分析,了解安康市流感流行动态,探索流行规律。方法采集流感样病例(ILI)的咽拭子标本先用real-time PCR检测,阳性标本用狗肾传代细胞(MDCK)进行病毒分离,采用血凝抑制方法(HI)进行流感病毒型别鉴定。结果 2012年10月至2014年3月共监测1所哨点医院ILI咽拭子标本905份,其中PCR阳性171份;分离出流感病毒97株,其中新甲型H1N1 62株,季节性A(H3N2)11株,B型(yamagata)24株。结论 2012-2014年流感流行季节中安康市流行的优势毒株为新甲型H1N1,12月至次年1月为流行高峰,有其他型别的交替流行。

2011年安康市健康人群麻疹抗体水平监测分析

目的全面了解安康市健康人群的麻疹免疫情况,为制定科学的预防对策提供依据。方法对全市10个县(区)按年龄随机抽样2 107名健康人为调查对象,采用酶联免疫捕获法进行麻疹IgG抗体水平监测。结果共调查2 107名健康人,其中抗体阳性者1 791人,阳性率85.00%。结论本市麻疹抗体水平维持在一个较高水平,由于不同年龄组、地域之间存在统计学差异,故而在现行免疫程序基础上应有针对性地加强一定年龄组的免疫接种工作。

安康市2013-2014年手足口病实验室检测结果分析

目的分析2013-2014年安康市手足口病的病原学特征,为该病预防提供依据。方法对安康市10个区、县送检的手足口病(HFMD)患者临床标本采用实时荧光定量PCR方法进行检测。结果共检测标本1 113份,其中489份肠道通用型病毒核酸阳性,检出率为43.94%;EV71阳性率为31.90%(156/489),Cox Al6阳性率为23.72%(116/489);其他肠道病毒阳性为44.38%(217/489)。不同性别间阳性检出率差异有统计学意义(χ2=6.62,P<0.05),5岁以下儿童为高发人群。结论 2013年和2014年HFMD主要流行病原均为其他肠道病毒,应加强手足口病病原监测,并对其他肠道病毒的进一步分型检测。

实时定量荧光PCR快速鉴定食品中单核细胞增生李斯特氏菌

目的建立实时定量荧光PCR法(real-time PCR)快速鉴定食品中的单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,LM)。方法选取2016年国家食品风险监测样本134例与模拟灭活LM样本10例,采用GB/T4789.30-2010与real-time PCR方法同步检测单核细胞增生李斯特菌。结果共检测食品134份,包括肉制品、水产品、快餐和即食食品等。共检出8株LM,检出率为5.97%。以GB/T4789.30-2010为金标准判断,real-time PCR方法检测样本中LM的灵敏度与特异度均达到100%。模拟灭活LM样本real-time PCR方法检出率为100%,标准法检出率为0%。结论本方法可以简化实验程序,减少工作量,节约检测试剂,为可能发生的食物中毒尽早提供实验依据。

血清凝集、基因测序联合检测群霍乱弧菌的应用

目的：避免霍乱弧菌检测假阳性，提高检测正确率。方法随机选取2013年1～7月，全国各省市 CDC 送往中国CDC 霍乱初筛阳性菌株14株；用 LB 营养琼脂培养12 h，挑取单菌落进行霍乱弧菌血清凝集，同时水煮模板法提取菌株的DNA。针对弧菌属16SrDNA 序列设计引物，进行弧菌16SrDNA PCR 检测，电泳观察16SrDNA 产物，将16SrDNA 阳性产物送测序公司测序，测序结果在 NCBI 网站上进行 Blast 比对，分析比较血清凝集和 Blast 比对结果。结果共选取14株菌进行实验，血清凝集阳性12株，2株未凝。经弧菌16SrDNA 扩增，电泳观察14株菌均扩增出相应的片段，说明所选菌株均为弧菌属。将14株菌的16SrDNA 阳性产物测序，并将测序结果进行 Blast 比对：2株血清未凝集菌均是哈维氏弧菌；12株血清凝集阳性的菌中，1株是需钠弧菌，其余11株是霍乱弧菌。结论血清凝集和基因测序联合检测群霍乱弧菌，可避免霍乱弧菌检测假阳性，提高检测正确率。

Real-timePCR在GB/T 4789.4-2010中的应用

通过应用Real-timePCR检测,提高沙门氏菌的检出率;同时简化实验程序,减少工作量,为可能发生的食物中毒尽早提供实验依据。选取2014、2015年国家食品风险监测标本。标准组按照GB/T 4789.4-2010进行沙门氏菌检测;实验组取GB/T 4789.4-2010中规定的第一次增菌液进行Real-timePCR,若阳性继续按照GB/T 4789.4-2010后续步骤检测,若阴性则直接报告结果。共检测370个标本,共检出沙门氏菌5株,标准组与实验组检测结果一致,符合率100%。通过应用Real-timePCR,可以为目的菌检出提供导向作用,有助于提高其检出率;对于PCRReal-timePCR阴性的标本,可提前3-4d直接报告,缩短了实验周期;由于后续只针对Real-timePCR阳性标本进行检测,减少了实验者的工作量,节约了阴性标本后续检测的实验试剂。