中医院校细胞生物学教学实践与体会

细胞生物学是医学院校一门重要的专业基础课。为了适应细胞生物学的迅猛发展,进一步提高教师的教学质量和学生的学习效果,在细胞生物学第一节课、多媒体教学、师生互动交流和实验教学等方面进行了探索与实践。

提高中医院校医学遗传学教学质量的探讨

根据多年教学实践经验,对中医院校医学遗传学课程教学中的现状进行分析,提出要从优化教学内容、采用多种教学方法、创新教学手段、教学结合临床、改革考核方法等方面入手提高医学遗传学课程的教学质量。

睾丸组织块和精原干细胞异种移植的发展及现状

精原干细胞是精子发生的前提和基础,精原干细胞的存在为男性保存和恢复生育能力提供了可能。精原干细胞和睾丸组织移植技术已经被用来研究生精细胞的增殖与分化,这项技术对恢复无精子症或睾丸肿瘤患者的生育能力等有着重要的应用前景。综述了睾丸组织块和精原干细胞的移植技术的发展、现状及在医学领域的应用前景。

褪黑素对高脂饮食小鼠睾丸Bcl-2和Bax表达的影响

目的探讨高脂血症对小鼠睾丸Bcl-2和Bax表达的影响及褪黑素(MT)的干预机制。方法将12只载脂蛋白E(ApoE)基因敲除的C57BL/6J雄性小鼠随机均分成高脂血症组、MT处理组,另以6只野生型C57BL/6J雄性小鼠作为对照组。12周后摘除眼球取血,测量血清胆固醇(CHO)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c);免疫组化法检测Bcl-2和Bax在睾丸组织的表达。结果①高脂血症组血清CHO和LDL-c均明显高于对照组(P<0.01),高脂血症模型构建成功;与高脂血症组相比,MT处理组血清LDL-c明显降低(P<0.05),CHO无明显变化。②Bcl-2和Bax在3组小鼠睾丸组织中均有表达。与对照组相比,高脂血症组Bcl-2表达下调,Bax表达上调;与高脂血症组相比,MT处理组Bcl-2表达上调,Bax表达下调(P<0.01)。结论 Bcl-2和Bax参与高脂血症引起的睾丸细胞凋亡的调控。MT可以促进Bcl-2表达,抑制Bax表达,对高脂血症引起的睾丸损伤有一定的保护作用。

高脂饮食对小鼠附睾内质网应激的影响及褪黑素的干预作用

目的探讨内质网应激在高脂饮食引起的ApoE基因敲除小鼠附睾损伤中的作用及褪黑素(MT)的干预机制。方法将12只ApoE基因敲除的C57BL/6J雄性小鼠随机分为高脂饮食组及MT处理组。高脂饮食组为ApoE基因敲除小鼠,给予高脂饮食;MT处理组给予高脂饲养外,并MT灌胃。以6只野生型C57BL/6J雄性小鼠作为对照组,给予普通饮食。饲养12w后,取附睾组织制片,HE染色观察附睾的病理学形态,免疫组化检测GRP78和CHOP的表达。结果 HE染色显示,高脂饮食组小鼠,附睾上皮细胞形态结构不清,细胞萎缩。对照组和褪黑素处理组小鼠附睾上皮细胞形态结构完整,细胞排列整齐。免疫组化显示高脂饮食组小鼠附睾中GRP78、CHOP表达增强(P<0.01)。MT处理组和高脂饮食组相比,附睾中GRP78、CHOP表达下调(P<0.01)。结论内质网应激参与高脂饮食导致的附睾损伤;MT可能通过抑制附睾内质网应激,减轻高脂饮食对小鼠附睾的损伤。

EGFR和Ca^(2+)在外源性EGF刺激大鼠A型精原细胞增殖中的作用

目的探究表皮生长因子受体(EGFR)和Ca2+在表皮生长因子(EGF)引起的大鼠A型精原细胞增殖中的作用。方法选用9 d龄的SD大鼠,使用Percoll不连续密度梯度分离纯化精原干细胞;实验一:将细胞分为对照组、AG1478组、EGF组和EGF+AG1478组,观察EGFR在EGF促A型精原细胞增殖中的作用;实验二:将细胞分为对照组、Ca2+鳌合剂(BAPTA)组、EGF组、EGF+BAPTA组,观察细胞内游离Ca2+在EGF促A型精原细胞增殖中的作用;实验三:将细胞分为对照组、EGF组和EGF+AG1478组,采用Fura-2/AM负载法检测细胞内游离的Ca2+浓度。结果外源性的EGF明显促进了A型精原细胞的增殖;AG1478和BAPTA明显减弱了EGF对细胞的促增殖作用。结论 EGF通过与EGFR特异性结合提高胞内Ca2+浓度对A型精原细胞增殖起促进作用。

表皮生长因子对精原干细胞的作用机理

为了探究表皮生长因子(EGF)对体外培养的精原干细胞增殖的调控作用及其作用机制.应用不连续Percoll梯度液和选择性贴壁法分离纯化精原干细胞,c-kit细胞免疫组化鉴定细胞,MTT法研究EGF对精原干细胞增殖的效应,再加入JAK-STAT信号通路特异性抑制剂AG490,探究EGF对精原干细胞增殖作用的可能机制.c-kit细胞免疫组化结果显示分离得到细胞为精原干细胞;MTT结果显示各实验组比对照组细胞数量均有显著增多(P<0.01);与对照组相比,加入AG490组的活细胞数有显著下降(P<0.01).实验结果表明EGF能够促进精原干细胞的增殖,并且可以通过JAK-STAT信号通路起作用.

黄芪注射液对大鼠精原干细胞增殖作用的影响

目的:研究黄芪注射液对体外培养的精原干细胞增殖过程中所起的调控作用;建立完善的精原干细胞体外培养体系,为精原干细胞的体外大量扩增提供技术和方法,为治疗男性不育等提供相关技术。方法:选用9日龄的SD大鼠睾丸,应用不连续Percoll梯度液分离纯化精原干细胞,并应用选择性贴壁法进一步纯化精原干细胞;细胞计数法研究不同浓度(0、5、10、20、50、100 g/L)黄芪注射液对精原干细胞增殖的效应;MTT法研究不同浓度黄芪注射液对精原干细胞增殖的效应。结果:细胞计数法结果显示,与对照组相比,黄芪注射液对精原干细胞有增殖作用(P(0.01)。MTT结果也显示实验组比对照组细胞数量均显著增多(P(0.01)。结论:黄芪注射液能够促进精原干细胞的增殖。

精原干细胞移植治疗男性不育症的伦理学问题

精原干细胞是精子发生的起始,精原干细胞既能分化产生成熟精子又具有自我更新能力以维持自身数量的恒定。精原干细胞移植技术应用于治疗男性不育症,只需将一定数量的供体干细胞植入到受体睾丸的精曲小管内,就能重新建立生精功能。显然,精原干细胞移植在治疗男性不育症有广阔的前景,同时使传统的道德伦理面临着前所未有的困惑。

表皮生长因子对大鼠精原干细胞的影响

研究表皮生长因子(EGF)对体外培养的精原干细胞自我更新、增殖过程中所起的调控作用;建立完善的精原干细胞体外培养体系,为精原干细胞的体外大量扩增提供技术和方法,为治疗男性不育等提供相关技术。通过研究证明EGF能够促进精原干细胞的增殖,EGF受体的活化对EGF促进精原干细胞增殖起重要作用。

表皮生长因子对精原干细胞的作用研究

应用不连续Percoll梯度液和选择性贴壁法分离纯化精原干细胞;c-kit细胞免疫组化鉴定细胞类型;MTT法研究EGF对精原干细胞增殖的效应;加入MAPK-ERK信号通路特异性抑制剂PD98059,探讨EGF对精原干细胞增殖作用的可能机制。证明:1)c-kit细胞免疫组化结果显示分离得到细胞为精原干细胞;2)MTT结果显示各实验组比对照组细胞数量均有显著增多(p<0.01),且20 ng/mL剂量组的增殖作用最明显;3)与对照组相比,加入PD98095组的活细胞数有显著下降(p<0.01)。结论:EGF能够促进精原干细胞的增殖,并且可以通过MAPK-ERK信号通路起作用。