中医针刺治疗出血性脑卒中临床研究述评

通过对近年来国内外关于出血性脑卒中的发病机制和临床治疗相关研究的学习、总结,从针刺有效刺激量以及针刺方法等不同方面进行综合讨论,探讨中医针刺疗法对出血性脑卒中临床后遗症的疗效概况和诊疗思路,探讨中医针刺疗法的可行性以及有效性。

212例初诊肺癌中医证候分布特点

目的用聚类分析方法探求初诊肺癌的中医证候规律。方法采用病案回顾法,记录212例肺癌患者的基本情况和相关中医证候,建立信息数据库,并对其中医症状进行系统聚类分析。结果纳入统计分析的肺癌中医症状为83条,频数高的前10位分别是咳嗽、痰少、痰质黏稠、痰白、纳呆、胸闷、苔白腻、痰中带血、面色白、气促;筛选出频率≥10%及部分频率<10%但对诊断有意义的44个症状作为基础变量进行聚类分析,得出痰热阻肺证、痰湿蕴肺证、气滞湿阻证、肺脾气虚证、瘀阻肺络证5类中医证候。结论聚类分析能从客观角度进行肺癌中医证候分类,并初步确立各证候的诊断要点,为肺癌的辨证论治提供理论基础。

桃红四物汤保护2型糖尿病模型大鼠血管损伤的实验研究

目的观察桃红四物汤对2型糖尿病模型大鼠胸主动脉的保护作用,并探究其作用机制。方法采用高糖高脂饲料联合链脲佐菌素复制2型糖尿病大鼠模型,桃红四物汤连续干预模型大鼠8周,观察模型大鼠胸主动脉的病理学变化,Western blot法检测胸主动脉核因子κB(nuclear factorκB,NF-κB)蛋白表达,RTqPCR技术检测单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein 1,MCP-1)和血管细胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule 1,VCAM-1)mRNA表达,ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的含量。结果桃红四物汤可显著改善模型大鼠胸主动脉损伤;显著抑制模型大鼠胸主动脉NF-κBp65蛋白和MCP-1、VCAM-1mRNA的表达(P<0.05),显著降低血清TNF-α、TGF-β1的含量(P<0.05)。结论桃红四物汤可有效保护模型大鼠胸主动脉病理损伤,其作用机制与干预NF-κB信号通路,抑制MCP-1、VCAM-1、TNF-α和TGF-β1表达有关。

正交试验优化霍山米斛总多糖提取工艺

目的建立霍山米斛总多糖的最佳提取工艺。方法依据2015年版《中华人民共和国药典》第一部中铁皮石斛多糖测定方法,通过单因素考察及正交试验研究提取温度、提取次数、提取时间、料液比对霍山米斛总多糖提取率的影响,采用苯酚-硫酸法测定其多糖含量。结果霍山米斛的最佳提取工艺为:提取温度为100℃,提取2次,每次提取2h,料液比为1∶800(g/mL)。结论所优选的工艺简单、方便、准确,适用于霍山米斛总多糖的提取。

不同栽培基质对霍山米斛总多糖含量的影响

以霍山米斛为试材,于采摘期采摘不同栽培基质培养的霍山米斛,采用苯酚-硫酸显色法测定总多糖含量,探究不同栽培基质对霍山米斛总多糖含量的影响。结果表明:不同栽培基质霍山米斛总多糖含量为S1(松树锯末+石子,低矮大棚)>S3(松树皮+石子,低矮大棚)>S4(椰子壳+石子,低矮大棚)>S2(石子,低矮大棚)>S5(石子,仿野生)。统计学分析表明,不同基质栽培的霍山米斛总多糖含量的差异存在统计学意义,聚类分析数据显示,5种栽培基质的霍山米斛可以分为4类:S1单独一类、S3单独一类、S4单独一类、S2和S5一类。试验旨为霍山米斛的最佳栽培基质选择和初步判定栽培基质的种类提供依据,以期充分地开发霍山米斛资源。

吲哚布芬酯类化合物的设计与合成

目的探讨吲哚布芬酯类化合物的设计与合成。方法依据药物化学中的拼合原理和前药原理,以吲哚布芬为起始原料,设计并合成了3个吲哚布芬酯类化合物。结果其结构均经IR、MS、1H NMR、13C NMR确证。结论所合成目标化合物的体外抗血小板聚集活性实验正在进行中。

三级康复体系下卒中偏瘫的针刺治疗临床思路探讨

脑卒中的高致残率给家庭和社会造成了沉重的经济负担,早期、正确的康复训练对卒中偏瘫患者的运动功能恢复至关重要,中医针刺技术经过几千年的发展,对于卒中偏瘫的治疗形成了自己的理论体系。通过对近十年国内外关于系统的三级康复治疗的相关报道和文献研究,结合中医针刺学对卒中偏瘫治疗的临床总结,探讨现代康复与传统康复医学下的综合康复体系的建立对卒中偏瘫患者康复的必要性和重要性。

应用位点特异性扩增反应鉴别垂盆草及其近缘植物

目的:建立垂盆草药材的DNA分子鉴定方法。方法:不同地区野外采集景天属垂盆草及其近缘药用植物共4种,分别提取总DNA,扩增cp DNA trn L-trn F序列,比对所有样品的该段核苷酸序列,设计特异性鉴别垂盆草及其近缘种的位点特异性引物。结果:垂盆草及其近缘易混淆品的trn L-trn F序列具有多个稳定的SNP位点;选取适宜的变异位点设计的2对特异性引物,在一定的退火温度,只有垂盆草扩增后产生预期长度的阳性扩增产物,而其他3种近缘种在同等条件下不能被有效扩增。结论:所设计的鉴别引物在适宜的反应条件下能特异性鉴别垂盆草及其近缘易混淆植物。

多花黄精多糖对STZ诱导的Ⅰ型糖尿病小鼠影响作用研究

目的研究多花黄精多糖对Ⅰ型糖尿病小鼠血糖、存活率及肝保护等的影响。方法采用连续腹腔注射链脲佐菌素(STZ),建立雌性C57BL/6c小鼠Ⅰ型糖尿病模型。实验分四组:空白对照组、模型组、多花黄精多糖低剂量组(450 zmg·kg^-1)和高剂量组(900 mg·kg^-1)。实验中检测各组小鼠存活率、体重以及血糖变化。实验结束后,分离小鼠肝脏,采用HE染色法评价肝脏病理变化,实时定量PCR(qPCR)法检测肝脏中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、胰岛素受体底物1(IRS-1)mRNA水平。结果雌性C57BL/6c小鼠连续5天腹腔注射STZ,一周后可使血糖明显升高。在高血糖状态下,模型组小鼠死亡率急剧上升,多花黄精多糖高剂量显著提高模型小鼠的存活率;多花黄精多糖低、高剂量可显著增加模型小鼠体重;同时,多花黄精多糖高剂量有一定程度降低血糖的作用。HE染色结果显示,模型小鼠肝脏病变明显:出现大量的单核炎症细胞浸润,肝细胞发生变性明显。并且,肝细胞结构紊乱。而多花黄精多糖高剂量能够改善模型小鼠肝脏炎症浸润、肝细胞变性以及肝脏结构紊乱等病变。qPCR结果显示多花黄精多糖能显著降低糖尿病肝脏中IL-6,IL-1βmRNA的水平,显著升高IRS-1 mRNA的水平。结论多花黄精多糖显著降低Ⅰ型糖尿病小鼠的死亡率,可能与其改善小鼠体重、降低血糖、肝保护等相关。

霍山石斛药材HPLC指纹图谱研究

目的建立霍山石斛(Dendrobium huoshanense)药材的HPLC指纹图谱,为进一步提高霍山石斛药材的质量提供依据。方法霍山石斛药材甲醇提取物的分析采用Agilent C_(18)色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相甲醇-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱;流量为1.0mL/min;检测波长240nm;柱温30℃。再通过聚类分析、主成分分析和PCA载荷图进行评价。结果建立了霍山县不同产地的霍山石斛药材指纹图谱,标定了14个共有峰,指认了2个峰,13批霍山石斛药材的指纹图谱的相似度均达到0.850以上;聚类分析、主成分分析和PCA载荷图分析模式均表现出不同产地的霍山石斛药材质量具有差异性。结论运用3种统计分析方法均能够较好地对指纹图谱进行识别,为霍山石斛药材的采收、质量控制等提供科学依据。

吡啶查尔酮类化合物对小鼠肝纤维化的作用

脂联素是脂肪组织分泌的一种脂肪细胞因子[1],为脂联素受体内源性激动剂,可通过结合AdipoR1和AdipoR2,经腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)途径来调节细胞能量利用[2]。研究发现,脂联素可以限制活化的肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)的增殖和迁移,具有强烈的抗肝纤维化活性[3]。

苦参查尔酮异构酶的基因克隆与表达分析

目的为明晰苦参查尔酮异构酶(sfCHI)的结构基因信息及其在苦参黄酮类化合物生源路径中的表达调控机理。方法本实验以苦参为研究对象,基于其转录组学数据,克隆sfCHI基因并针对该cDNA序列展开生物信息学分析,采用半定量PCR方法检测安徽产苦参不同组织中sfCHI基因表达情况。结果结果显示苦参sfCHI基因的cDNA序列长度为1265 bp,含有630 bp的开放式阅读框(ORF),编码209个氨基酸;序列分析表明sfCHI与狭叶羽扇豆查尔酮异构酶基因相似性最高,达89.95%;进化树分析该基因与大豆、野大豆等植物的亲缘关系较近;半定量PCR结果显示sfCHI基因在苦参根中表达量最低,在叶、叶柄与茎中的表达未见明显差异。结论本研究通过对苦参查尔酮异构酶的基因克隆与不同组织间的表达分析,初步明确了该基因的序列信息与理化特征,这对进一步研究苦参黄酮类物质生物合成机制将起到积极的推动作用。

氯硝柳胺衍生物的合成及抗肿瘤活性研究

以氯硝柳胺为起始原料,经醚化、亲核取代反应得到目标化合物,采用MTT法考察所合成化合物对人类乳腺癌细胞(MDA-MB-231)和人类胰腺癌细胞(ASPC-1)的体外抗肿瘤活性。合成了5个氯硝柳胺衍生物,其结构均经IR、1H-NMR、13C-NMR和MS确证。初步的体外抗肿瘤活性结果显示目标化合物9b和9c的抗肿瘤活性强于阳性对照药,其中化合物9b的活性对所测两种肿瘤株的抑制活性均强于阳性对照药,展现出较强的应用前景。

葛根在各国的利与弊：本草与应用

葛根作为我国传统中药材,具有悠久的历史,其功效解肌退热、生津止渴、升阳止泻等.目前,主要分布在中国、日本、美国、欧洲等国家.葛根分别以不同的方式引入各个地区,并在其当地对环境,经济,生态产生不同的影响.本文通过查阅大量国内外文献,对葛根的本草,应用及生物学意义进行阐述.

基于高通量测序的药用植物“凤丹”根皮的转录组分析

牡丹皮为我国传统常用中药,安徽省铜陵地区栽培的"凤丹"根皮加工而成的药材牡丹皮被誉为道地药材,药用活性成分丰富多样,但目前尚不清楚"凤丹"药用部位次生代谢过程中活性物质合成的遗传学基础。研究采用Illumina Hi Seq 4000高通量测序平台对五年生"凤丹"根皮转录组进行测序,对测序结果进行de novo拼接和功能注释,测序后获得72 997条unigene。进一步利用公共数据库进行同源比对,其中41 139条unigene被Nr数据库成功注释,34 952条unigene能被GO数据库成功注释,20 016条unigene被KEGG数据库成功舒注释,共涉及到5个大类、34个种类、352条代谢通路;在次生物质合成与代谢途径中,其中苯丙素类化合物、萜类化合物骨架合成、各种类型萜类化合物、生物碱类化合物以及黄酮类成分生物合成途径中的unigene分别有214,104,152,55,36个;不同产地样本间差异表达基因的富集性比较显示不同产地样本间存在明显差异;此外,在72 997条unigene中共检测到9 939个SSR序列,其中二核苷酸重复的SSR标记占20.75%。研究的结果不仅为挖掘"凤丹"次生代谢物生物合成关键基因提供了基础数据信息,也为药用牡丹的遗传多样性研究和分子标记开发奠定了分子基础。

霍山石斛GDP-甘露糖焦磷酸化酶基因克隆及表达分析

为明确GDP-甘露糖焦磷酸化酶(GMPP)基因的功能及其在石斛多糖生物合成中的表达调控机制,该研究以霍山石斛为原材料,克隆GMPP基因且对该c DNA序列进行分析,利用qPCR技术检测霍山产地3种石斛(霍山石斛、铁皮石斛、铜皮石斛)中GMPP基因的表达情况。结果显示霍山石斛GMPP基因c DNA序列长1 867 bp,包含1 245 bp的开放阅读框(ORF),编码415个氨基酸;序列分析表明霍山石斛GMPP与铁皮石斛、黄花石斛相似性高达99%;进化树分析该基因与铁皮石斛、黄花石斛等植物的GMPP亲缘关系较近; qPCR结果显示GMPP基因在霍山石斛茎中表达量最高,其次是叶,然后是花,根中表达量最低,且在霍山产3种石斛中霍山石斛的相对表达量最高,铁皮石斛的表达量最低。该研究发现霍山石斛GMPP基因表达水平与其茎、叶、花、根中多糖含量呈高度相关性,对进一步研究霍山石斛多糖生物合成机制将起到积极的促进作用。

芍药在中国和日本的本草学比较

为考察曾一同作为芍药药用的白芍和赤芍的区别与联系,笔者通过梳理我国历代本草著作中关于芍药和白芍、赤芍的记载,从基源、功效、采收加工及区分方法等方面进行了本草考证,并结合了日本本草文献对芍药的记叙,理清了从芍药到白芍、赤芍区别论述再到功效主治上的区分这一演变过程,明确了白芍、赤芍的区别和其内在的紧密联系。

苍耳子药用品种的本草考证

《中国药典》收载中药苍耳子Xanthii Fructus的正品来源为苍耳属植物苍耳Xanthium sibiricum的成熟、干燥果实,通过系统地查阅古代本草文献,结合我国苍耳属几种苍耳类植物的形态描述和野外实地观察,对本草中记载的供药用的苍耳子原植物描绘图进行比较分析,对苍耳子供药用品种的来源植物进行了再考证,指出本草中苍耳子的来源植物的记载多为与药典一致的苍耳,但也存在兼有蒙古苍耳X.mongolicum的使用,为苍耳属药用植物的资源合理利用和开发提供依据。

蕲蛇毒腺的转录组分析及蛇毒蛋白功能基因的挖掘

蕲蛇是一种传统名贵中药材,具有免疫调节、抗肿瘤、抗炎、镇痛等药理作用,临床主要用于治疗类风湿性关节炎、强直性脊柱炎、干燥综合征和肿瘤等疾病。蕲蛇毒腺中分泌的蛇毒蛋白具有凝血、抗癌、抗栓、改善微循环和神经毒性等功能。为挖掘蕲蛇中蛇毒蛋白功能基因,利用基因工程技术在体外实现大量蛇毒蛋白的表达和纯化,该研究利用高通量测序平台对蕲蛇毒腺进行了转录组测序,组装获得了32862条unigene,其中26589条被公共数据库成功注释,2695条被注释到62个转录因子家族中,并且预测出5920个SSR位点。对分泌性磷脂酶A2和C型凝集素进行序列分析和同源建模,结果显示分泌性磷脂酶A2是同源二聚体,每个单体中包含5个保守的氨基酸构成了酶的催化活性中心;C型凝集素则有一个保守的糖基化结合位点,可以特异结合N-乙酰-D-葡萄糖胺。该研究对蕲蛇毒腺进行转录组测序,为蕲蛇毒腺中蛇毒蛋白功能的研究奠定了基础,将促进蕲蛇基因资源的开发和利用。

基于多花黄精转录组的多糖及薯蓣皂苷生物合成路径研究

多花黄精Polygonatum cyrtonema为百合科黄精属植物,其干燥根茎作为黄精药材来源之一,一直药食兼具,其主要活性成分为多糖和皂苷类。现有研究多集中于药材质量与药理药效学评价,对其药效物质的生物合成研究报道较少。为进一步探索多花黄精中多糖及薯蓣皂苷生物合成途径及其相关的结构基因,该研究对多花黄精叶、茎、根茎、根4个组织部位进行转录组测序分析。采用BGISEQ-500测序平台,共获得42.03 Gb数据;以Trinity软件对去除冗余后的全部读长进行组装,共获得137233条转录本,其中68.13%的unigene在7个功能数据库(KEGG,GO,NR,NT,SwissProt,Pfam,KOG)中得到注释。通过数据挖掘,对可能参与多糖与薯蓣皂苷生物合成的转录本进行分析,阐释了多花黄精中该2类药效物质生合成的可能途径;应用实时定量PCR,将多花黄精多糖及皂苷合成基因的实际转录水平与其生物信息学数据进行比对,验证其表达情况。该实验为多花黄精次生代谢产物生物合成途径研究及其相关结构基因功能的阐明提供数据资料。