基于实验中心多手段相结合模式培养中医药研究生科研素质的探讨

中医药研究型人才是我国中医药事业发展的核心元素,其科研素质的培养是中医药事业发展的关键所在。科研实验中心是中医药教学和科研工作的重要平台支撑,肩负着中医药研究型人才培养的重任。本文以我院临床研究实验中心通过科研诚信、创造性科研思维、科研技能、科研安全意识等多手段相结合培养模式,有效提高了中医药研究生科研素质为例,探讨以实验中心为依托,多手段相结合模式培养中医药研究生科研素质的可行性,以期为其进一步推广提供依据。

面向阿尔茨海默病的非侵入性光生物调节治疗

据我国阿尔茨海默病协会官方网站显示,在我国60岁及以上老年人中约有1500万痴呆患者,其中1000万是阿尔茨海默病患者。随着我国人口结构老龄化,这一数据还将不断攀升。目前,按照现代医学寻找治疗靶点的逻辑思路,尚无有效治疗阿尔茨海默病的因应对策,药物治疗有许多限制,外科手术也无能为力。对此,我们不得不重新思考传统的系统化、整体化和功能化观点,并针对产生阿尔茨海默病背后的先导因素采取相应的治疗策略。近年来,关于光生物调节(PBM)治疗神经退行性疾病的研究逐渐增多,越来越多的学者尝试采用非侵入性PBM方式延缓、抑制,甚至逆转神经元退行性病变。在神经疾病治疗方面,PBM作为一种新的治疗方式,具有无创伤、无副作用、可以调节氧自由基浓度、激活干细胞调节细胞转录、刺激神经递质分泌、激发突触与神经元生长等显著优点。这些优点是其他治疗方式无与伦比的。本文综述了现代医学关于阿尔茨海默病治疗的靶点,阐释了PBM治疗阿尔茨海默病的机制,从动物模型、临床试验、病理与细胞模型方面系统总结了PBM治疗阿尔茨海默病的进展,并对未来发展做出展望,旨在为探索阿尔茨海默病临床干预新措施以及发展先进治疗方法和医疗器械提供参考。

肺炎克雷伯菌的临床分布特征及耐药性分析

目的探讨肺炎克雷伯菌(Klebsiellapneumoniae,K.pneumoniae)的临床分布情况和耐药特征,为治疗提供经验指导。方法对我院2019年5月~2019年10月分离的208株肺炎克雷伯菌进行回顾性分析,其中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌组47株,非产ESBLs菌组161株。结果肺炎克雷伯产ESBLs菌组与非产ESBLs菌组均主要来源于痰液,检出率显著高于其他标本来源;并且在ICU感染率最高,显著高于神经内科;产ESBLs菌组与非产ESBLs菌组肺炎克雷伯菌对β-内酰胺类和头孢菌素类的耐药率均显著高于其他抗菌药物,但这两组间药物耐药性基本一致。结论我院肺炎克雷伯菌的临床耐药率较高,应探索选择其他合适的抗菌药物,根据药敏结果结合临床感染情况,合理制定抗生素使用方案,为有效控制耐药菌产生和提高临床感染的治愈率发挥作用。

化结止痒方治疗结节性痒疹62例临床观察

目的观察化结止痒方治疗结节性痒疹的临床疗效。方法将62例符合入选标准的患者随机分为对照组(30例)和治疗组(32例),对照组口服枸地氯雷他定胶囊,外用地奈德乳膏,治疗组在对照组基础上加用化结止痒方加减治疗。观察两组患者的临床疗效,治疗前后症状、体征评分及不良反应情况。结果两组临床疗效分布比较,差异有统计学意义(P<0.05)。与治疗前比较,两组治疗后各项症状、体征积分均显著减少(P<0.05);两组治疗后各项症状、体征评分差值比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论化结止痒方治疗结节性痒疹有较好的疗效。

LncRNA XR_378418对肝星状细胞生物学行为及转录组学影响

目的探究长链非编码RNA(LncRNA)XR_378418在肝星状细胞JS-1生物学行为中的作用,并基于转录组测序探索LncRNA XR_378418参与肝纤维化发生的潜在分子机制。方法构建重组质粒pcDNA-LncRNA XR_378418和pcDNA-NC,分别转染JS-1细胞;通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、细胞计数试剂盒8(CCK-8)以及划痕实验分别检测LncRNA XR_378418的表达水平、JS-1细胞增殖和迁移情况;通过高通量测序分析LncRNA XR_378418对JS-1细胞转录组学的影响。结果RT-qPCR结果显示,过表达组中的LncRNA XR_378418表达水平高于对照组(P<0.05);CCK-8和划痕结果显示,LncRNA XR_378418表达增加后,JS-1细胞增殖和迁移能力增强;高通量测序结果显示,共挑选出248个差异基因,其中上调的基因有127个、下调的基因有117个;基因本体论(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)功能富集分析结果显示,LncRNA XR_378418过表达改变了JS-1细胞部分基因的转录能力,参与调控细胞黏附、细胞自噬、Ca 2+信号传导等功能。结论LncRNA XR_378418可促进JS-1细胞增殖和迁移,影响JS-1细胞中细胞黏附、钙离子信号转导等相关基因的表达。

肺炎克雷伯菌肺部感染临床特征分析

目的总结肺炎克雷伯菌肺部感染临床特点。方法对2019年-2021年某三甲中医院肺炎克雷伯菌肺部感染患者(KP,Klebsiella pneumoniae)进行回顾性研究,根据药敏结果分为耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌组(CRKP,Carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae)和碳青霉烯类敏感肺炎克雷伯菌组(CSKP,Carbapenem-sensitive Klebsiella pneumoniae),比较两组之间的临床感染特点和药敏情况。结果CRKP组和CSKP组肺炎克雷伯菌肺部感染患者均以男性、老年、脑血管疾病为主,CRKP组发生肺部以外侵袭性感染的比例高于CSKP组(χ^(2)=5.235,P=0.022),统计显示CRKP组使用有创机械通气(χ^(2)=4.424,P=0.035)、留置导尿管(χ^(2)=4.151,P=0.042)及碳青霉烯酶类药物(χ^(2)=6.742,P=0.009)的比例高于CSKP组。CRKP组对除替加环素、阿米卡星、复方新诺明等以外的绝大部分临床常用抗生素有较高的耐药率。结论CRKP肺部感染患者需要警惕其它部位的侵袭性肺炎克雷伯菌感染,尤其需要注意高龄男性,有脑血管基础疾病的人群,CRKP肺部感染对于常用β-内酰胺类抗生素几乎全部耐药,治疗难度较CSKP组高。

抗CCP抗体、GPI和AKA三指标联合诊断类风湿关节炎的临床意义

目的评价抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP抗体)、葡萄糖-6-磷酸异构酶(GPI)和抗角蛋白抗体(AKA)单项或联合检测在类风湿关节炎(RA)早期诊断中的作用。方法收集47例我院住院的RA患者和45例同时期入住我院的非RA患者作为对照人群的血清,进行抗CCP抗体、GPI和AKA检测。结果抗CCP抗体、GPI、AKA抗体诊断RA的灵敏度分别为85. 1%,85. 1%和69. 5%,诊断RA的特异性分别为97. 8%,95. 6%和91. 1%。抗CCP抗体对RA的灵敏度较AKA高,差异有统计学意义(P<0. 05),抗CCP抗体与GPI的特异性对比,差异无统计学意义(P>0. 05),而抗CCP抗体对于RA诊断特异性高于AKA,差异有统计学意义(P<0. 05)。抗CCP抗体的阳性预测值最高,阴性预测值以抗CCP抗体、GPI、AKA三者联合检测较好。Youden index亦显示三者联合检测较单独检测抗CCP抗体、GPI或AKA效果好。结论抗CCP抗体、GPI对RA具有较好的灵敏度和高度的特异性,联合检测抗CCP抗体、GPI和AKA可作为早期RA患者及GPI阴性RA患者的早期诊断指标。

环状RNA作为生物标志物在急性髓细胞性白血病中的研究进展

环状RNA(circRNA)是一类经反向剪接、缺少多聚腺苷酸尾、带有共价闭环结构的非编码RNA,具有高度的稳定性和保守性,在调节转录和剪接中起着重要作用。急性髓细胞性白血病(AML)是以异常和未成熟的髓系细胞增生为主要特征的血液系统恶性肿瘤,具有复杂的侵袭性和异质性。目前,针对AML的研究仍非常有限,因此亟待明确AML的发病机制和潜在治疗靶点。circRNA在细胞内外广泛存在,与AML患者的临床特征和预后相关,可以通过结合微小RNA调控AML细胞靶基因等方式,影响细胞增殖、凋亡和耐药。本文总结了circRNA在AML中的功能作用和研究进展。

疏肝健脾方调控TLR4/MyD88/NLRP3信号轴抑制肝纤维化小鼠细胞焦亡的机制研究

目的:基于TLR4/MyD88/NLRP3信号轴探究疏肝健脾方对肝纤维化小鼠的治疗作用及机制。方法:采用四氯化碳(CCl_(4))与橄榄油混合液背部皮下注射的方法,复制化学性肝纤维化小鼠模型。造模首日,灌胃给予疏肝健脾方,每天1次,连续12周;HE、Masson和天狼猩红染色观察小鼠肝组织病理学损伤程度,透射电镜观察肝组织超微结构的变化及焦亡小体情况;RT-qPCR、Western blot和免疫组织化学染色检测肝组织中α-SMA、CollagenⅠ、Caspase-1、IL-1β、IL-18以及TLR4/MyD88/NLRP3信号轴表达的变化情况。结果:病理分析显示模型组小鼠肝脏肝小叶结构模糊,肝细胞索排列紊乱,胶原沉积增加,焦亡小体数量明显增加,肝组织中α-SMA、CollagenⅠ、Caspase-1、IL-1β、IL-18以及TLR4、MyD88和NLRP3的mRNA和蛋白表达水平相较于正常组肝脏均显著升高。与模型组相比,疏肝健脾方给药后可改善肝脏病理组织学损伤程度,抑制细胞焦亡,显著下调α-SMA、CollagenⅠ、Caspase-1、IL-1β、IL-18以及TLR4、MyD88和NLRP3 mRNA与蛋白表达水平。结论:疏肝健脾方抗肝纤维化作用可能与调控TLR4/MyD88/NLRP3信号轴,减少细胞焦亡,抑制肝星状细胞活化有关。

1例早发脑型肝豆状核变性家系ATP7B基因突变和临床表型分析

目的探讨1例早发脑型肝豆状核变性家系的临床表型和遗传学病因。方法提取该家系先证者及其父母和弟弟的外周白细胞基因组DNA,用Sanger法对先证者ATP7B基因外显子及外显子/内含子连接区进行序列分析,并对先证者的弟弟进行突变位点检测。结果该家系先证者主要临床特征是记忆力减退,言语不清,肢体不自主抖动,角膜K-F环(+),肝功能正常。Sanger测序显示先证者ATP7B基因第8和第13外显子分别存在c.2333G>T(p.Arg>Leu)、c.2975C>T(p.Pro>Leu)复合杂合错义变异。两种变异均为已知致病突变,分别来自母亲和父亲。先证者弟弟携带c.2333G>T(p.Arg>Leu),目前表型正常。结论该家系为ATP7B基因突变导致的脑型Wilson病。ATP7B基因c.2333G>T(p.Arg>Leu)和c.2975C>T(p.Pro>Leu)是该家系患病的遗传学病因,对家系中的后代再发风险有重要的指导意义。

B10细胞在自身免疫性疾病中的研究进展

调节性B细胞(Breg)是一群具有负向免疫调节作用的B细胞,可产生负向调节细胞因子,如白细胞介素10(IL-10)、转化生长因子β(TGF-β),或以细胞间接触等方式参与免疫调节,抑制炎性反应。B10细胞是一类可产生IL-10的Breg,参与多种自身免疫性疾病的发生发展过程。我们总结了B10细胞的起源、免疫机制以及B10细胞在类风湿性关节炎、炎症性肠病、干燥综合症等自身免疫性疾病中的作用以及调控机制,在治疗自身免疫性疾病的相关应用尝试,并探讨了B10细胞作为治疗自身免疫性疾病的新方法的可行性。

121株金黄色葡萄球菌临床分离株的分子流行病学及遗传学特征

目的研究临床分离的金黄色葡萄球菌株的分子及遗传学特征.方法收集中国科学技术大学附属第一医院及安徽中医药大学第一附属医院2018-2019年临床检出的非重复金黄色葡萄球菌121株,检测其δ溶血、mecA基因、Agr系统分型、Spa分型等,并对mec A基因阳性菌株进行SCCmec分型.结果121株金黄色葡萄球菌中有甲氧西林耐药菌株(MRSA)67株,甲氧西林敏感菌株(MSSA)54株;MRSA菌株主要携带Ⅲ型SCCmec元件(18,26.86%)和Ⅳ型SCCmec元件(24,35.82%);Agr系统主要为Ⅰ型和Ⅱ型;121株临床菌株中共有Spa类型54种,最为常见的是t437(15,12.40%)和t034(9,7.44%);在12株δ溶血阴性的金黄色葡萄球菌中有11株(91.67%)为MRSA菌株,δ溶血阴性的金黄色葡萄球菌携带的Agr系统类型主要为Ⅱ型(50.00%),携带的SCCmec元件主要为Ⅱ型(占58.33%),δ溶血阴性的金黄色葡萄球菌中共有Spa类型8种,最为常见的是t18363(41.67%).结论本研究阐述了医院分离的金黄色葡萄球菌分子及遗传学特征信息,有助于追踪医院内流行性金黄色葡萄球菌株的出现、传播,并提供对临床感染控制策略.

细胞焦亡在肝纤维化发生发展中的作用

肝纤维化是肝脏对各种慢性肝损伤进行自我修复的一种可逆性病理反应,可发展为肝硬化、肝癌。细胞焦亡是有别于细胞凋亡、坏死的细胞新型程序性死亡方式,与肝纤维化发病密切相关。简述了细胞焦亡的概念、激活途径以及在肝星状细胞、肝实质细胞、Kupffer细胞、嗜酸性粒细胞中作用的最新研究进展,指出细胞焦亡可诱发肝脏炎症,过度活化肝星状细胞,促进肝纤维化发生、发展,为其临床诊疗提供了新的思路与潜在靶点。

N^(6)-甲基腺嘌呤甲基化在肝脏疾病中的作用

N^(6)-甲基腺嘌呤(m6A)是存在于多种RNAs中的化学修饰方式,最常见于mRNA。肝脏是机体重要的代谢和消化器官,m6A甲基化在肝脏生理病理过程中发挥着重要作用。简述了m6A甲基化在肝脏生理和病毒性肝炎、非酒精性脂肪性肝病、肝纤维化以及肝细胞癌等肝脏疾病中的生物学作用及潜在应用价值,指出m6A甲基化可调控相关因子,参与肝脏疾病的发生发展,为其临床诊疗提供新的思路和靶点。

播散性浅表性光线性汗孔角化症1例致病突变位点的鉴定及功能初探

目的对播散性浅表性光线性汗孔角化症的突变位点进行鉴定并初步探讨其功能。方法对患者的外周血进行采样,收集全基因组DNA,采用PCR结合Sanger测序验证突变位点。构建野生型和突变型5-焦磷酸甲羟戊酸脱羧酶(MVD)相关真核表达载体,通过免疫印迹法检测MVD相关突变对蛋白在细胞中溶解度的影响。结果测序发现,MVD cDNA,c.746T>C是该患者的致病位点,此突变属于播散性浅表性光化性汗孔角化症的热点突变。功能研究发现该突变导致MVD蛋白在细胞中的溶解度改变,具体表现为野生型MVD主要存在于上清中,突变导致MVD蛋白以不可溶的状态存在于细胞沉淀中。结论本研究鉴定了该患者发病的遗传突变,证实了既往已报道过的突变位点,进一步表明MVD为播散性浅表性光线性汗孔角化症的致病基因,突变导致蛋白的溶解度降低可能是该病发病的原因之一。

智脑胶囊调控PI3K/AKT/GSK-3β信号通路诱导阿尔茨海默病模型细胞增殖的研究

目的:探讨智脑胶囊(Zhinao Capsule, ZNC)对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)体外细胞模型增殖的影响及其作用机制。方法:采用全反式维甲酸(all trans retinoic acid, ATRA)+冈田酸(okadaic acid, OA)刺激人神经母细胞瘤细胞(human neuroblastoma cell, SK-N-SH)建立AD体外模型,CCK8法筛选ZNC含药血清最佳作用浓度和时间;流式细胞术、RT-qPCR和Western blot法检测最佳浓度ZNC含药血清作用最佳时间后,对SK-N-SH细胞周期、凋亡及PI3K、AKT、GSK-3βmRNA、总蛋白和磷酸化蛋白表达的影响。结果:ATRA+OA刺激后,SK-N-SH细胞活力降低,细胞凋亡增加,p-PI3K、p-AKT和p-GSK-3β蛋白表达显著降低,GSK-3βmRNA和总蛋白表达明显升高;给予ZNC干预后,不仅可明显促进SK-N-SH细胞增殖,抑制其凋亡,还可显著升高p-PI3K、p-AKT和p-GSK-3β蛋白表达,降低GSK-3βmRNA和总蛋白表达。结论:智脑胶囊可促进AD模型细胞增殖,其机制可能与调控PI3K/AKT/GSK-3β信号通路有关。