栀子苷抑制HSP70释放改善风湿热痹证胶原性关节炎大鼠血管新生的作用研究

目的探讨栀子苷(geniposide,GE)改善风湿热痹证胶原性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)大鼠血管新生的作用是否与调控热休克蛋白70(heat shock proteins 70,HSP70)的释放有关。方法在大鼠背部和尾根部多点皮内注射完全弗氏佐剂(complete Freund’s adjuvant,CFA)与鸡Ⅱ型胶原蛋白(chicken type II collagen,CCII)等体积混合物,构建CIA模型,在此基础上,给予风湿热刺激,建立风湿热痹证CIA大鼠(CIA rats with moist heat arthralgia spasm syndrome,CIA-S)模型。造模成功后随机分组,给药组分别用GE(60、120 mg·kg^(-1)·d^(-1))、MTX(0.5 mg·kg^(-1)·3d^(-1))灌胃两周,取材。观察大鼠体质量、关节炎指数(arthritis index,AI)等评价模型情况,关节表面温度和血流变指标评价热痹模型热属性,HE染色观察大鼠滑膜病理,多普勒彩超检测血流信号,免疫组化和Westren blot法检测滑膜组织HSP70、CD31、VEGF含量,ELISA法检测大鼠血清HSP70含量。EdU染色、细胞划痕和Transwell迁移实验以及成管实验探究HSP70对人脐静脉血管内皮细胞(human umbilic vein endothelial cells,HUVECs)的增殖、迁移、成管能力的影响。结果与空白组相比,CIA-S组关节肿胀,热属性明显,血管新生强烈,滑膜组织异常增生,炎性细胞浸润,可见微血管形成;CIA-S组与CIA组比较,关节红肿程度加重,炎症峰值提前、持续时间延长,消退缓慢,血管新生与HSP70表达更为强烈。GE给药组呈剂量依赖性,有效改善关节炎症状,减少HSP70含量。细胞实验结果表明,GE抑制HSP70的表达和释放,进而抑制HSP70诱导的HUVECs增殖、迁移和成管能力增强。结论GE有可能通过抑制HSP70的释放改善风湿热痹证CIA大鼠血管新生,进而改善关节炎。

1-磷酸鞘氨醇及受体对自身免疫性疾病血管新生的影响

1-磷酸鞘氨醇(sphingosine-1-phosphate,S1P)是细胞膜鞘磷脂代谢过程产生的一类信号分子,在免疫系统中,与细胞膜表面的G蛋白偶联受体S1P受体(S1P receptors,S1PRs)结合,通过相关炎症信号通路,影响新生血管的形成。该文简述S1P及其受体通过细胞内信号转导对类风湿关节炎、多发性硬化症、结肠炎、系统性红斑狼疮等自身免疫性疾病微血管生成的影响,提出了S1P及其受体可能是治疗自身免疫性疾病血管炎症新的靶点。

关节滑膜炎性微环境对类风湿关节炎发生发展作用的研究进展

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种慢性自身免疫性疾病,其主要伴有炎症反应、滑膜增生、血管新生、血管翳形成、关节软骨和骨损坏等病理特征。近期研究发现,关节滑膜炎性微环境与RA的发生发展密切相关。本综述主要从巨噬细胞的极化、成纤维样滑膜细胞的异常增殖、血管内皮细胞的血管新生、以及炎症细胞因子四个方面对RA相关信号通路进行概述,通过阐明关节滑膜炎性微环境与RA发生发展的具体联系,为RA的防治治疗提供参考。

介导缺氧诱导因子-1α表达的相关信号通路在类风湿性关节炎中的研究进展

类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis, RA)是一种系统性自身免疫性疾病,其病情的发生发展与关节缺氧微环境密切相关。缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α, HIF-1α)是调节细胞对缺氧反应的核转录因子,在促进滑膜炎症、血管新生及血管翳形成、软骨破坏及骨侵蚀方面发挥重要作用。HIF-1α的表达除受氧感受器调节外,还受多条信号转导途径的调控,包括PI3K/Akt、Ras-Raf-MEK-ERK、JAK/STAT、NF-κB等。该文就参与调控HIF-1α表达的信号通路进行概述,以期为治疗RA以及寻找新的改善病情药物提供新的思路和依据。

RANKL介导的诱导破骨细胞分化的相关经典信号通路研究进展

破骨细胞(osteoclasts,OCs)源于髓系造血前体细胞,作为多核细胞参与骨吸收过程。OCs的过度分化影响骨组织吸收,常见于骨质疏松症、类风湿关节炎、强直性脊柱炎、骨硬化症等骨相关性疾病。调控破骨细胞分化是治疗此类疾病的主要手段。OCs分化的途径可以分为核因子受体激活因子-κB配体(receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL)介导的主要经典途径如:OPG/RANK/RANKL、TRAF6/RANKL/NF-κB、TRAF6/RANKL/MAPKs、JAK2/STAT3/RANKL、Wnt/RANKL和一些炎性细胞因子(如:IL-1、IL-6、IL-17、TNF-α)参与的非经典途径。该文主要综述以上RANKL介导的相关经典途径对OCs分化的影响和机制。

1-磷酸鞘氨醇及其信号通路在炎症相关性疾病中的作用

1-磷酸鞘氨醇(sphingosine 1-phosphate,S1P)是细胞膜鞘磷脂在代谢过程中产生的一类重要的信号分子,S1P可被转运到细胞外,通过作用于S1P受体,激活一系列下游信号分子发挥作用,如Ras/Raf/ERK、PI3K/Akt等,也可作为第二信使直接作用于细胞内靶点,如HDAC、TRAF2。其介导的信号通路在很多生理和病理过程中发挥作用,如细胞增殖和迁移、炎性细胞因子浸润、血管生成、自身免疫等。该文分别从S1P的胞外及胞内两种作用方式,探讨S1P及其信号通路在炎症相关性疾病中的作用,综述S1P信号通路相关药物研究进展。

丹皮酚通过抑制p38 MAPK/N-SMase2通路减少脂多糖诱导的THP-1细胞外泌体分泌

目的探讨丹皮酚抑制脂多糖诱导后THP-1细胞分泌外泌体的作用及机制。方法超速离心法提取外泌体,透射电镜(TEM)观察外泌体形态,Western blot检测标志蛋白Alix、TSG101、CD9和CD63,动态光散射检测外泌体粒径。CCK-8检测细胞存活率,BCA法检测外泌体蛋白量,Western blot检测N-SMase2、p-p38 MAPK蛋白水平。结果超速离心法获得的微囊泡结构物具有完整清晰茶托样膜,直径众数为130 nm,含标志性蛋白Alix、TSG101、CD9和CD63,鉴定为外泌体。丹皮酚(120、60及30μmol/L)可降低脂多糖(1 mg/L)诱导的THP-1细胞分泌外泌体,减少N-SMase2蛋白表达,抑制p38 MAPK磷酸化。结论丹皮酚抑制THP-1细胞外泌体分泌,该作用与抑制p38 MAPK/N-SMase2通路有关。

糖代谢重编程及其靶向治疗药物在炎症相关疾病中的作用

细胞在炎性微环境影响下发生糖代谢重编程,使其主要供能方式由氧化磷酸化转变为有氧糖酵解,该过程参与炎症相关疾病发生发展的各个阶段。糖代谢重编程不仅改变单个细胞的代谢模式,而且打破了机体微环境的代谢稳态,进一步促进细胞有氧糖酵解,为炎症相关疾病的恶性进展提供有利条件。有氧糖酵解的相关代谢酶、转运蛋白、代谢产物等均为关键信号分子,药物通过靶向这些特异性强的关键分子,抑制有氧糖酵解从而发挥治疗作用。本文围绕糖代谢重编程对炎症相关肿瘤、类风湿关节炎、阿尔茨海默病等炎症相关疾病发生发展的影响以及药物靶向糖代谢重编程对疾病的治疗作用展开综述。

糖酵解-脂肪酸代谢失衡调控的铁死亡在代谢性疾病中的研究进展

在代谢性疾病中,活性氧累积及氧化应激与铁死亡密切相关。糖酵解-脂肪酸代谢失衡作为代谢性疾病关键调控方式,能够直接或间接参与铁死亡,影响其发生发展。而铁死亡是一种新型调节性细胞死亡方式,由铁依赖性脂肪酸过氧化物过度累积引发。其与糖酵解-脂肪酸代谢密切相关,在代谢性疾病中发挥重要作用。该调节性细胞死亡方式显著区别于其他程序性死亡方式,在细胞形态、标志性特征及机制等方面均有独特变化。本文首先阐明糖酵解及脂肪酸代谢失衡参与铁死亡发生的主要机制,并进一步综述铁死亡在肿瘤、2型糖尿病及类风湿关节炎等代谢性疾病中的研究进展,揭示糖酵解-脂肪酸代谢失衡与铁死亡异常的内在联系及其对代谢性疾病的影响,以期为代谢性疾病防治提供新策略。

基于网络药理学结合药动学及靶点验证探究黄芩清热除痹胶囊治疗类风湿关节炎质量标志物

黄芩清热除痹胶囊(Huangqin Qingre Chubi capsule, HQC)作为临床治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)的有效方剂,质量控制尚属空白。本研究拟通过网络药理学、药动学结合实验验证探究HQC治疗RA的质量标志物(quality markers, Q-marker)。通过构建“药效成分-靶点-通路”可视化网络,初步预测HQC治疗RA潜在质量标志物。建立风湿热痹证胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis, CIA)大鼠模型,阐明HQC药效成分在大鼠疾病状态下的动态量化规律。建立肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor-α, TNF-α)诱导的RA成纤维样滑膜细胞(MH7A)体外炎症模型,检测活性成分对鞘氨醇激酶1 (sphingosin kinase-1, Sphk1)、p-SphK1蛋白表达影响。网络药理学结果显示,黄芩苷、栀子苷、木犀草素、薏苡素和苦杏仁苷为HQC治疗RA的重要活性成分。定量分析结果进一步验证这5种成分的可测性。蛋白免疫印迹证实栀子苷和黄芩苷显著抑制Sphk1和p-SphK1蛋白表达。以上研究确定上述5种成分可作为HQC治疗RA的质量标志物。本实验经安徽中医药大学实验动物伦理委员会审核通过(批准号:AHUCM-rats-2021049),所有程序均严格按照动物使用和护理的原则进行。

HIF-VEGF-Ang-2信号转导介导的滑膜血管新生在类风湿关节炎中的作用

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)是一种以血管新生、炎性因子浸润和关节破坏为主要病理特征的自身免疫性疾病。血管新生推动RA的发展,在其发病机制中发挥重要作用。HIF (hypoxia-inducible factor)-VEGF(vascular endothelial growth factor)-Ang-2 (angiopoietin-2)信号转导是诱导滑膜血管新生的关键途径。靶向HIFVEGF-Ang-2信号转导抑制滑膜血管新生是一种有前景的RA治疗方法。本文对HIF-VEGF-Ang-2信号转导介导的滑膜血管新生在RA中的作用和机制进行综述,以期为RA的治疗提供新的靶点和策略。

华佗救心丸GC-MS特征图谱及3个成分的含量测定

目的:利用气相色谱-质谱(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)联用技术,建立华佗救心丸GC-MS特征图谱,同时测定龙脑、异龙脑和麝香酮3个成分的含量。方法:采用VF-WAXms毛细管色谱柱(0.25 mm×30 m,0.25μm),柱温为程序升温(140℃,停留2 min,然后以35℃·min^(-1)线性升温至230℃,停留5 min),进样口温度:210℃,检测器温度250℃;离子源为电子轰击源(electrospray ion source,EI),离子源温度为230℃,MS四极杆温度为150℃,发射电流为34.6μA,发射能量为70.0 eV,质谱监测模式为全扫描(SCAN),溶剂延迟为3 min。应用2012版中药色谱指纹图谱相似度评价软件对12批华佗救心丸进行相似度分析,同时对龙脑、异龙脑和麝香酮3个成分含量进行测定。结果:建立了华佗救心丸的GC-MS指纹图谱,12批华佗救心丸的色谱图与特征图谱的相似度均在0.999以上,标定共有峰8个,并指认了其中3个共有峰,分别为异龙脑、龙脑和麝香酮。12批样品中龙脑、异龙脑和麝香酮的含量范围分别为每丸0.8757~1.5250 g、0.7304~1.1405 g、0.0971~0.1120 g。结论:所建立的GC-MS特征图谱结合3个成分的含量测定,能较全面地反映华佗救心丸中挥发性化学成分质量,该方法简便可行,准确稳定,重复性和专属性好,可对华佗救心丸质量控制提供参考。